| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 主要符号表 | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-17页 |
| 1.1 鳗鲡病原菌及其引起的相关疾病 | 第11-12页 |
| 1.2 鱼类细菌性疾病的疫苗研究现状与趋势 | 第12-14页 |
| 1.2.1 鱼类疫苗的研究现状 | 第12-13页 |
| 1.2.2 鱼类细菌性疾病疫苗的研究趋势 | 第13-14页 |
| 1.3 鱼类病原菌重组外膜蛋白（OMPS）的免疫原性研究 | 第14页 |
| 1.4 本研究的内容和意义 | 第14-17页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第14-15页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第15-17页 |
| 第2章 鳗鲡病原性气单胞菌与爱德华氏菌外膜蛋白全长基因克隆，体外拼接及重组表达载体的构建 | 第17-46页 |
| 2.1 材料与方法 | 第17-25页 |
| 2.1.1 仪器与试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.2 菌株 | 第18-20页 |
| 2.1.3 细菌培养与 DNA 模板的制备 | 第20页 |
| 2.1.4 病原性气单胞菌和爱德华氏菌外膜蛋白基因序列的检索、筛选与比对 | 第20页 |
| 2.1.5 病原性气单胞菌和爱德华氏菌外膜蛋白基因引物设计与PCR扩增 | 第20-21页 |
| 2.1.6 病原性气单胞菌和爱德华氏菌外膜蛋白基因全长的序列分析 | 第21页 |
| 2.1.7 病原性嗜水气单胞菌和爱德华氏菌外膜蛋白基因全长的结构与免疫原性分析 | 第21页 |
| 2.1.8 双基因的连接 | 第21-23页 |
| 2.1.9 重组表达载体的构建 | 第23-25页 |
| 2.1.10 重组质粒的筛选和鉴定 | 第25页 |
| 2.1.11 双基因G-Arom-Edwa的亲水性、免疫原性分析与蛋白质结构预测 | 第25页 |
| 2.2 结果 | 第25-43页 |
| 2.2.1 病原性气单胞菌和爱德华氏菌外膜蛋白基因参考序列的比对与系统发育分析 | 第25-26页 |
| 2.2.2 病原性气单胞菌和爱德华氏菌外膜蛋白基因全长的PCR扩增 | 第26-28页 |
| 2.2.3 PCR扩增鳗鲡病原性气单胞菌和爱德华氏菌外膜蛋白基因结果的系统发育分析 | 第28-29页 |
| 2.2.4 PCR扩增鳗鲡病原性气单胞菌和爱德华氏菌外膜蛋白基因序列的氨基酸序列比对 | 第29-30页 |
| 2.2.5 PCR扩增鳗鲡病原性嗜水气单胞菌（B11）和爱德华氏菌（B79）外膜蛋白基因表达产物的结构与功能分析 | 第30-37页 |
| 2.2.6 基因连接、双酶酶切及重组组质粒鉴鉴定 | 第37-40页 |
| 2.2.7 连接基因G-Arom-Edwa推测的融合表达产物结构和免疫原性预测结果 | 第40-43页 |
| 2.3 讨论 | 第43-46页 |
| 2.3.1 外膜蛋白基因的筛选 | 第43-44页 |
| 2.3.2 嗜水气单胞菌和迟钝爱德华氏菌外膜蛋白基因的连接 | 第44页 |
| 2.3.3 构建表达载体过程中遇到的问题与解决措施 | 第44-46页 |
| 第3章 鳗鲡病原性气单胞菌与爱德华氏菌外膜蛋白双基因连接表达载体的表达、纯化及表达产物的免疫原性初步研究 | 第46-60页 |
| 3.1 材料与方法 | 第46-52页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第46-49页 |
| 3.1.2 不同条件下OMP-Arom-Edwa的原核表达 | 第49-50页 |
| 3.1.3 OMP-Arom-Edwa蛋白的纯化 | 第50-52页 |
| 3.1.4 重组表达蛋白（OMP-Arom-Edwa）免疫原性初步研究 | 第52页 |
| 3.2 结果 | 第52-58页 |
| 3.2.1 OMP-Arom-Edwa的诱导表达 | 第52-55页 |
| 3.2.2 目的蛋白（OMP-Arom-Edwa）的亲和层析纯化 | 第55-56页 |
| 3.2.3 表达蛋白的复性与蛋白含量测定 | 第56-57页 |
| 3.2.4 表达蛋白的免疫原性（ELISA效价）测定结果 | 第57-58页 |
| 3.3 讨论 | 第58-60页 |
| 3.3.1 影响外源蛋白基因在大肠杆菌内表达的因素 | 第58-59页 |
| 3.3.2 影响重组融合蛋白纯化的因素 | 第59页 |
| 3.3.3 免疫原性研究 | 第59-60页 |
| 第4章 总结与展望 | 第60-61页 |
| 4.1 论文主要成果 | 第60页 |
| 4.2 论文主要创新点及展望 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录 | 第67-68页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第68页 |
