| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 常用英文缩写表 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一部分 食管鳞癌组织学样本中PKM2和mTOR表达分析 | 第17-23页 |
| 引言 | 第17页 |
| 一、材料和试剂 | 第17-18页 |
| 1. 试剂 | 第17-18页 |
| 2. 主要仪器 | 第18页 |
| 二、实验方法 | 第18-20页 |
| 1. 临床资料收集 | 第18-19页 |
| 2. 食管鳞癌细胞的镜下特征 | 第19页 |
| 3. 蜡块制备及HE染色 | 第19页 |
| 4. 食管组织免疫组化染色。 | 第19-20页 |
| 5. 对照 | 第20页 |
| 6. 免疫组织化学染色结果分析 | 第20页 |
| 7. 统计学分析 | 第20页 |
| 三、结果 | 第20-21页 |
| 四、结论 | 第21-23页 |
| 第二部分 PKM2可以调节食管鳞癌的能量代谢 | 第23-39页 |
| 一、材料和试剂 | 第23-27页 |
| 1. 药品、试剂 | 第23-25页 |
| 2. 仪器 | 第25-26页 |
| 3. 其他生物材料 | 第26-27页 |
| 二、实验方法 | 第27-36页 |
| 1. 细胞培养 | 第27-28页 |
| 2. 质粒扩增 | 第28页 |
| 3. 细菌质粒提取 | 第28-29页 |
| 4. 转染级质粒的提取 | 第29-30页 |
| 5. 转染 | 第30页 |
| 6. 总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 7. RNA逆转录为cDNA | 第31页 |
| 8. PCR | 第31-32页 |
| 9. 实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
| 10. 蛋白提取 | 第33页 |
| 11. Western Blot | 第33-34页 |
| 12. 葡萄糖实验 | 第34-35页 |
| 13. 乳酸生成实验 | 第35-36页 |
| 三、结果 | 第36-37页 |
| 四、结论 | 第37-39页 |
| 第三部分 mOR信号通路参与食管鳞癌能量代谢的调节 | 第39-54页 |
| 一、材料、试剂与仪器 | 第39-43页 |
| 1. 药品、试剂 | 第39-41页 |
| 2. 仪器 | 第41-42页 |
| 3. 其他生物材料 | 第42-43页 |
| 二、实验方法 | 第43-51页 |
| 1. 细胞培养 | 第43页 |
| 2. 雷帕霉素对KYSE150细胞 | 第43-44页 |
| 3 细菌质粒提取 | 第44页 |
| 4. 转染级质粒的提取 | 第44-45页 |
| 5. 转染 | 第45-46页 |
| 6. 总RNA的提取 | 第46页 |
| 7. RNA逆转录为cDNA | 第46-47页 |
| 8. PCR | 第47页 |
| 9. 实时荧光定量PCR | 第47-49页 |
| 10. 蛋白提取 | 第49页 |
| 11. Western Blot | 第49-50页 |
| 12. 葡萄糖实验 | 第50-51页 |
| 13. 乳酸生成实验 | 第51页 |
| 三、结果 | 第51-52页 |
| 四、结论 | 第52-54页 |
| 第四部分 mTOR信号通路调节PKM2参与食管鳞癌能量代谢的机制 | 第54-61页 |
| 一、材料、试剂与仪器 | 第54-55页 |
| 1. 药品、试剂 | 第54-55页 |
| 2. 仪器 | 第55页 |
| 3. 其他生物材料 | 第55页 |
| 二、实验方法 | 第55-58页 |
| 1. 细胞培养 | 第55页 |
| 2. mTOR表达改变对PKM2表达的影响 | 第55-57页 |
| 3. 葡萄糖实验 | 第57页 |
| 4. 乳酸生成实验 | 第57-58页 |
| 三、结果 | 第58页 |
| 四、结论 | 第58-61页 |
| 讨论 | 第61-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 译述 | 第68-89页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 个人简介 | 第90页 |
