| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略语 | 第12-13页 |
| 中文部分 | 第13-65页 |
| 第一部分 绪论 | 第13-16页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第16-37页 |
| 2.1 研究对象 | 第16-19页 |
| 2.1.1 人体相关试验 | 第16-17页 |
| 2.1.2 动物相关试验 | 第17-19页 |
| 2.2 收集方法 | 第19-20页 |
| 2.2.1 AD患者样本收集 | 第19页 |
| 2.2.2 小鼠样本收集 | 第19-20页 |
| 2.3 细胞制备 | 第20-22页 |
| 2.3.1 真皮细胞悬液的制备 | 第20页 |
| 2.3.2 脾脏单个核细胞悬液的制备 | 第20-21页 |
| 2.3.3 细胞冻存与复苏 | 第21-22页 |
| 2.4 试剂 | 第22-25页 |
| 2.5 主要仪器及耗材 | 第25-26页 |
| 2.6 实验方法 | 第26-37页 |
| 2.6.1 AD患者PBMCs的分离纯化 | 第26页 |
| 2.6.2 RT-PCR检测 | 第26-29页 |
| 2.6.3 Western-Blot检测： | 第29-31页 |
| 2.6.4 磁珠分离法分离纯化初始化CD4~+T细胞 | 第31-32页 |
| 2.6.5 CCK-8 法检测利多卡因对小鼠CD4~+T细胞的细胞毒性 | 第32-33页 |
| 2.6.6 定向诱导初始化CD4~+T细胞分化，并探究不同浓度利多卡因对其的影响 | 第33页 |
| 2.6.7 流式细胞染色检测细胞表达水平 | 第33-34页 |
| 2.6.8 ELISA法检测血清总IgE水平 | 第34-35页 |
| 2.6.9 免疫组织化学染色检测 | 第35-36页 |
| 2.6.10统计学分析 | 第36-37页 |
| 第三部分 结果 | 第37-51页 |
| 3.1 利多卡因静脉封闭治疗AD患者的作用 | 第37-41页 |
| 3.1.1 利多卡因可明显改善AD患者皮损严重程度 | 第37-38页 |
| 3.1.2 利多卡因治疗后的AD患者PBMCs中的Treg关键转录因子FoxP3 mRNA水平和Treg细胞(CD4~+CD25highFoxP3+CD127low)的比例均明显上升 | 第38-39页 |
| 3.1.3 利多卡因对人体PBMCs中其他细胞因子的调节作用 | 第39-41页 |
| 3.2 利多卡因治疗卵清蛋白诱导的AD小鼠的作用 | 第41-48页 |
| 3.2.1 成功采用卵清蛋白经皮致敏诱导AD小鼠模型 | 第41-44页 |
| 3.2.2 利多卡因治疗对皮损中FoxP3 mRNA和皮损、脾脏、淋巴结的Treg的表达水平的影响 | 第44-47页 |
| 3.2.3 利多卡因对小鼠其他细胞因子的调节作用 | 第47-48页 |
| 3.3 利多卡因治疗特应性皮炎的机制研究 | 第48-51页 |
| 3.3.1 利多卡因在一定浓度下可上调初始化T细胞定向诱导为Treg的比例 | 第48-49页 |
| 3.3.2 利多卡因对于Treg的上调作用与Smad3 /TGF-β 信号通路显著相关 | 第49-51页 |
| 第四部分 讨论 | 第51-57页 |
| 4.1 AD患者PBMCs与小鼠皮损处Treg细胞的表达情况 | 第51-52页 |
| 4.2 Treg细胞水平与其他细胞因子表达水平的关系 | 第52-55页 |
| 4.3 利多卡因促进Treg细胞分化的机制研究 | 第55-57页 |
| 第五部分 结论 | 第57-58页 |
| 第六部分 参考文献 | 第58-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 攻读学位期间发表的相关论文 | 第63-65页 |
| 英文部分 | 第65-117页 |
| Part One Introduction | 第67-71页 |
| Part Two Materials and Methods | 第71-94页 |
| 2.1 Subjects | 第71-74页 |
| 2.1.1 Human Trials | 第71-73页 |
| 2.1.2 Animal Experiments | 第73-74页 |
| 2.2 Sample Collection | 第74-75页 |
| 2.3 Cells | 第75-77页 |
| 2.3.1 Preparation of murine dermal cells suspension | 第75页 |
| 2.3.2 Preparation of murine spleenocytes | 第75-76页 |
| 2.3.3 Freezing and anabiosis of cells | 第76-77页 |
| 2.4 Reagent Preparation of main reagent | 第77-79页 |
| 2.5 Primary instruments and consumable items | 第79-80页 |
| 2.6 Methods | 第80-94页 |
| 2.6.1 Isolation of PBMCs | 第80-81页 |
| 2.6.2 RT-PCR | 第81-84页 |
| 2.6.3 Western-Blot | 第84-87页 |
| 2.6.4 Purification of Naive CD4~+ T cells | 第87-89页 |
| 2.6.5 Analysis of lidocaine cytotoxicity on murine CD4~+ T Cells | 第89-90页 |
| 2.6.6 In vitro Treg cells differentiation | 第90页 |
| 2.6.7 Flow cytometry | 第90-91页 |
| 2.6.8 Serum total Ig E detection | 第91-92页 |
| 2.6.9 Immunohistochemistry | 第92-93页 |
| 2.6.10 Statistical Analysis | 第93-94页 |
| Part Three Results | 第94-108页 |
| 3.1 Effect of lidocaine therapy on AD pateints | 第94-97页 |
| 3.1.1 Lidocaine therapy significantly ameliorated AD patients’ lesional severity | 第94-95页 |
| 3.1.2 Lidocaine therapy enhanced the percentage of Treg cells and promoted Fox P3 m RNAexpression in both AD patients | 第95-96页 |
| 3.1.3 Lidocaine regulated other cytokines in PBMCs of AD patients | 第96-97页 |
| 3.2 Effect of Lidocaine on the murine OVA-sensitized AD models | 第97-105页 |
| 3.2.1 OVA-sensitized murine AD models were successfully established | 第97-100页 |
| 3.2.2 Lidocaine could up-regulate Fox P3 m RNA expression and the proportion of Treg cells indermis of leisional skin but not in spleen and lymoh nodes | 第100-104页 |
| 3.2.3 Modulation of lidocaine on other cytokines in murine models | 第104-105页 |
| 3.3 Mechanism of lidocaine promotion on the differentiation of Treg cells in AD | 第105-108页 |
| 3.3.1 Lidocaine could up-regulated the proportion of Treg at the concentration of 0.8mmol/L | 第105-106页 |
| 3.3.2 The up-regulation of Treg cells by lidocaine was significantly relevant with Smad3/TGF-βsignaling pathway | 第106-108页 |
| Part Four Discussion | 第108-114页 |
| 4.1 Treg expression in PBMCs of AD patients and murine lesional skins | 第108-110页 |
| 4.2 The relationship between Treg cells and other cytokines | 第110-113页 |
| 4.3 The mechanism of lidocaine promotion on the differentiation of Treg cells | 第113-114页 |
| Part Five Conclusion | 第114-115页 |
| Part Six References | 第115-117页 |
