| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1.1 概述 | 第14页 |
| 1.2 昆虫血液相关研究 | 第14-19页 |
| 1.2.1 昆虫血细胞分类及功能 | 第14-16页 |
| 1.2.2 昆虫血造作用机制 | 第16-19页 |
| 1.3 启动子研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3.1 启动子的结构与功能 | 第19页 |
| 1.3.2 启动子的分类 | 第19-20页 |
| 1.3.3 启动子的应用 | 第20页 |
| 1.3.4 家蚕组织特异性启动子的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.4 Bac-to-Bac系统简介及其在启动子的应用 | 第21-24页 |
| 1.4.1 Bac-to-Bac系统简介 | 第21-22页 |
| 1.4.2 Bac-to-Bac系统在家蚕启动子的研究应用 | 第22-24页 |
| 第二章 引言 | 第24-26页 |
| 2.1 研究背景及目的意义 | 第24页 |
| 2.2 主要研究内容 | 第24-25页 |
| 2.3 技术路线 | 第25-26页 |
| 第三章 家蚕血细胞特异表达基因的筛选 | 第26-34页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第26-27页 |
| 3.1.1 材料 | 第26页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第27页 |
| 3.1.4 主要溶液及配制 | 第27页 |
| 3.2 方法和步骤 | 第27-31页 |
| 3.2.1 芯片筛选血细胞特异表达的基因 | 第27页 |
| 3.2.2 荧光定量PCR分析候选基因时空表达情况 | 第27-31页 |
| 3.3 结果分析 | 第31-33页 |
| 3.3.1 芯片筛选血细胞特异表达的基因 | 第31-32页 |
| 3.3.2 荧光定量PCR分析血细胞特异表达候选基因时空表达特征 | 第32-33页 |
| 3.4 讨论 | 第33-34页 |
| 第四章 BmCathepsinO启动子的克隆及蚕体组织活性分析 | 第34-54页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第34-36页 |
| 4.1.1 主要材料 | 第34页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第34页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第34页 |
| 4.1.4 主要溶液配制 | 第34-36页 |
| 4.2 实验方法与步骤 | 第36-44页 |
| 4.2.1 BmCathepsinO启动子预测 | 第36页 |
| 4.2.2 BmCathepsinO启动子片段的获得 | 第36-39页 |
| 4.2.3 DH10Bac感受态制备 | 第39-40页 |
| 4.2.4 重叠延伸PCR法点突变 | 第40页 |
| 4.2.5 重组转移载体的构建 | 第40-41页 |
| 4.2.6 转化大肠杆菌DH10Bac | 第41页 |
| 4.2.7 重组Bacimd提取与鉴定 | 第41-42页 |
| 4.2.8 细胞培养和转染 | 第42页 |
| 4.2.9 病毒的扩增与滴度测定 | 第42-43页 |
| 4.2.10 病毒侵染家蚕幼虫 | 第43-44页 |
| 4.2.11 流式分析BmCathepsinO启动子活性 | 第44页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第44-52页 |
| 4.3.1 BmCathepsinO启动子预测 | 第44页 |
| 4.3.2 BmCathepsinO启动子片段的获得 | 第44-46页 |
| 4.3.3 重组转移载体构建与鉴定 | 第46-47页 |
| 4.3.4 重组Bacmid的获得及鉴定 | 第47-49页 |
| 4.3.5 重组杆状病毒的获得 | 第49页 |
| 4.3.6 不同截短BmCathepsinO启动子驱动报告基因在家蚕中的表达 | 第49-51页 |
| 4.3.7 流式分析各截短BmCathepsinO启动子活性 | 第51-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 Bmintegrin β2基因启动子克隆以及蚕体活性分析 | 第54-62页 |
| 5.1 材料与试剂 | 第54页 |
| 5.2 方法与步骤 | 第54页 |
| 5.3 结果与分析 | 第54-60页 |
| 5.3.1 Bmintegrinβ2启动子克隆 | 第54-55页 |
| 5.3.2 重组转移载体构建与鉴定 | 第55-56页 |
| 5.3.3 重组Bacmid的鉴定 | 第56-57页 |
| 5.3.4 重组杆状病毒的获得以及在BmE-SWU3细胞的活性 | 第57页 |
| 5.3.5 不同截短的Bmintegrinβ2启动子驱动报告基因在家蚕中的表达 | 第57-59页 |
| 5.3.6 流式分析Bmintegrinβ2各截短启动子活性 | 第59-60页 |
| 5.4 讨论 | 第60-62页 |
| 第六章 家蚕新基因Bm04862启动子克隆以及蚕体活性分析 | 第62-74页 |
| 6.1 材料与试剂 | 第62页 |
| 6.2 方法与步骤 | 第62-64页 |
| 6.2.1 巢式RACE法获得Bm04862全长 | 第62页 |
| 6.2.2 序列生物信息学分析 | 第62页 |
| 6.2.3 Bm04862蛋白亚细胞定位 | 第62-63页 |
| 6.2.4 Bm04862微生物诱导分析 | 第63页 |
| 6.2.5 Bm04862启动子克隆以及蚕体活性分析 | 第63-64页 |
| 6.3 结果分析 | 第64-72页 |
| 6.3.1 Bm04862基因全长的获得 | 第64-65页 |
| 6.3.2 Bm04862蛋白结构分析 | 第65-66页 |
| 6.3.3 全长载体构建以及亚细胞定位 | 第66-67页 |
| 6.3.4 微生物诱导分析 | 第67-68页 |
| 6.3.5 Bm04862启动子序列克隆 | 第68-69页 |
| 6.3.6 重组载体的构建 | 第69页 |
| 6.3.7 重组Bacmid检测 | 第69-70页 |
| 6.3.8 重组杆状病毒的获得以及在BmE-SWU3细胞的活性 | 第70-71页 |
| 6.3.9 Bm04862启动子驱动报告基因在家蚕中的表达 | 第71-72页 |
| 6.3.10 流式分析Bm04862启动子活性 | 第72页 |
| 6.4 讨论 | 第72-74页 |
| 第七章 综合与总结 | 第74-76页 |
| 1. 家蚕血细胞特异表达启基因的筛选 | 第74页 |
| 2. BmCathepsinO启动子的克隆及活性分析 | 第74页 |
| 3. Bmintegrin β2基因启动子克隆以及蚕体活性分析 | 第74-75页 |
| 4. Bm04862基因鉴定及其启动子研究 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 附录 | 第82-86页 |
| 硕士期间发表文章及课题参研情况 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
