缩略语表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
前言 | 第14-16页 |
文献回顾 | 第16-31页 |
实验一 | 第31-52页 |
1 材料 | 第31-33页 |
1.1 实验试剂 | 第31页 |
1.2 主要仪器 | 第31-32页 |
1.3 主要溶液及配制 | 第32页 |
1.4 细胞及研究对象 | 第32-33页 |
2 方法 | 第33-39页 |
2.1 细胞的复苏、传代、保存 | 第33-34页 |
2.2 细胞总RNA的提取 | 第34-35页 |
2.3 细胞总RNA的纯化与质量控制 | 第35-36页 |
2.4 细胞LncRNA/mRNA的基因芯片分析 | 第36-38页 |
2.5 实时荧光定量PCR检测差异LncRNA的表达 | 第38-39页 |
2.6 生物信息学分析 | 第39页 |
3 结果 | 第39-49页 |
3.1 细胞总RNA的提取及鉴定 | 第39-41页 |
3.2 LncRNA/mRNA的基因芯片分析结果 | 第41-45页 |
3.3 RT-PCR引物PCR反应条件检验 | 第45-46页 |
3.4 显著下调LncRNA的RT-PCR验证 | 第46-48页 |
3.5 显著上调LncRNA的RT-PCR验证 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
实验二 | 第52-65页 |
1 材料 | 第52-55页 |
1.1 实验试剂 | 第52-53页 |
1.2 主要仪器 | 第53-54页 |
1.3 主要溶液及配制 | 第54-55页 |
1.4 细胞及研究对象 | 第55页 |
2 方法 | 第55-58页 |
2.1 LncRNA-U2 siRNA合成及细胞转染实验 | 第55页 |
2.2 RT-PCR检测siRNA对LncRNA-U2表达抑制效率 | 第55-56页 |
2.3 MTT法检测卵巢癌细胞顺铂敏感性逆转实验 | 第56页 |
2.4 检测U2对细胞迁移活性的影响 | 第56-57页 |
2.5 western blot检测U2与细胞凋亡蛋白相关性 | 第57-58页 |
3 结果 | 第58-63页 |
3.1 siRNA抑制LncRNA效率的检测 | 第58页 |
3.2 MTT法检测卵巢癌细胞顺铂敏感性逆转 | 第58-61页 |
3.3 western blot检测LncNA-U2对细胞凋亡信号相关蛋白的表达影响 | 第61页 |
3.4 检测LncRNA-U2对细胞迁移活性的影响 | 第61-63页 |
4 讨论 | 第63-65页 |
小结 | 第65-68页 |
参考文献 | 第68-73页 |
附录 | 第73-77页 |
个人简历和研究成果 | 第77-79页 |
致谢 | 第79页 |