| 摘要 | 第2-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一部分 过表达Beclin 1 基因可诱发MG63骨肉瘤细胞自噬的发生 | 第12-22页 |
| 1.1 实验目的 | 第12页 |
| 1.2 实验仪器及耗材 | 第12页 |
| 1.3 实验试剂 | 第12-13页 |
| 1.4 实验步骤 | 第13-18页 |
| 1.4.1 MG63骨肉瘤细胞的培养与冻存 | 第13-14页 |
| 1.4.2 DsRed-LC3-GFP报告系统监测自噬 | 第14页 |
| 1.4.3 Western blot分析 | 第14-18页 |
| 1.5 实验结果 | 第18-22页 |
| 第二部分 Beclin 1 过表达后可减少Gemcitabine诱导的凋亡 | 第22-34页 |
| 2.1 实验目的 | 第22页 |
| 2.2 实验仪器及耗材 | 第22页 |
| 2.3 实验试剂 | 第22页 |
| 2.4 实验步骤 | 第22-26页 |
| 2.4.1 MG63骨肉瘤细胞的培养与冻存 | 第22-23页 |
| 2.4.2 PCR检测Caspase 3、Caspase 7、BCL-2、cyclin D1、c-FLIP的表达 | 第23-26页 |
| 2.5 实验结果 | 第26-34页 |
| 第三部分 Wnt信号通路对自噬的影响 | 第34-41页 |
| 3.1 实验目的 | 第34页 |
| 3.2 实验仪器 | 第34页 |
| 3.3 实验试剂 | 第34页 |
| 3.4 实验步骤 | 第34-39页 |
| 3.4.1 MG63骨肉瘤细胞的培养与冻存 | 第34-35页 |
| 3.4.2 PCR检测ATG4、Beclin 1、LAMP1、ATG5、ATG12的表达 | 第35-39页 |
| 3.5 实验结果 | 第39-41页 |
| 第四部分 Wnt信号通路与骨肉瘤细胞对Gemcitabine抵抗的关系 | 第41-49页 |
| 4.1 实验目的 | 第41页 |
| 4.2 实验仪器 | 第41页 |
| 4.3 实验试剂 | 第41页 |
| 4.4 实验步骤 | 第41-43页 |
| 4.4.1 MG63骨肉瘤细胞的培养与冻存 | 第41-42页 |
| 4.4.2 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第42页 |
| 4.4.3 应用ELISA技术分析Beclin 1 在MG63细胞上清的水平 | 第42-43页 |
| 4.5 实验结果 | 第43-49页 |
| 讨论 | 第49-53页 |
| 结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 综述 | 第58-77页 |
| 综述参考文献 | 第70-77页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
