| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略语 | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-25页 |
| 1.1 肝癌 | 第10-19页 |
| 1.1.1 原发性肝癌 | 第10-11页 |
| 1.1.2 肝癌标志物 | 第11-12页 |
| 1.1.3 肝癌的治疗 | 第12-13页 |
| 1.1.4 EVL (Ena/VASP like protein) | 第13-14页 |
| 1.1.5 EVL 结构 | 第14-15页 |
| 1.1.6 Ena/VASP蛋白的碳酸化 | 第15-16页 |
| 1.1.7 Ena/VASP 蛋白功能 | 第16-19页 |
| 1.1.8 Ena/VASP蛋白的亚细胞定位 | 第19页 |
| 1.2 RNA干扰 | 第19-23页 |
| 1.2.1 RNA干扰简介 | 第19-20页 |
| 1.2.2 RNA干扰机制 | 第20-21页 |
| 1.2.3 RNA干扰特征 | 第21-22页 |
| 1.2.4 RNA干扰的应用及展望 | 第22-23页 |
| 1.3 研究意义 | 第23-25页 |
| 第二章 实验部分 | 第25-48页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第25-28页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.2 实验仪器及材料 | 第26-27页 |
| 2.1.3 主要溶液配制 | 第27-28页 |
| 2.2 实验过程 | 第28-38页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第28页 |
| 2.2.2 细胞传代 | 第28-29页 |
| 2.2.3 细胞冻存 | 第29页 |
| 2.2.4 细胞计数 | 第29页 |
| 2.2.5 血清灭活 | 第29页 |
| 2.2.6 G418最佳浓度筛选 | 第29页 |
| 2.2.7 shRNA质粒 | 第29-30页 |
| 2.2.8 质粒的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.9 转染细胞 | 第31页 |
| 2.2.10 荧光显微镜下观察转染效率 | 第31-32页 |
| 2.2.11 细胞总蛋白提取 | 第32页 |
| 2.2.12 Western Blot | 第32-35页 |
| 2.2.13 RNA提取 | 第35-36页 |
| 2.2.14 荧光定量PCR | 第36页 |
| 2.2.15 MTT实验 | 第36-37页 |
| 2.2.16 平板克隆实验 | 第37页 |
| 2.2.17 Transwell侵袭实验 | 第37-38页 |
| 2.2.18 流式细胞术检测细胞周期 | 第38页 |
| 2.3 结果与分析 | 第38-45页 |
| 2.3.1 转染条件的确定 | 第38-39页 |
| 2.3.2 G418筛选条件确定 | 第39-40页 |
| 2.3.3 Western Blot分析人正常肝细胞L02和肝癌细胞7721中EVL蛋白表达差异 | 第40页 |
| 2.3.4 荧光定量PCR分析ShRNA转染后EVL基因水平抑制效率 | 第40-41页 |
| 2.3.5 Western blot分析shRNA-EVL转染后EVL蛋白表达变化 | 第41页 |
| 2.3.6 MTT法检测细胞生长曲线 | 第41-42页 |
| 2.3.7 细胞集落形成实验检测抑制EVL蛋白表达对肝癌细胞集落形成率的影响 | 第42-43页 |
| 2.3.8 Transwell侵袭实验检测抑制EVL蛋白表达后肝癌细胞侵袭能力变化 | 第43-44页 |
| 2.3.9 流式细胞术分析抑制EVL蛋白表达对肝癌SMMC-7721细胞周期的影响 | 第44-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-48页 |
| 全文总结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
