| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 外文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-21页 |
| 第一章 坏死梭杆菌所致绵羊腐蹄病的研究进展 | 第10-21页 |
| 1 病原学 | 第10-14页 |
| 1.1 坏死梭杆菌的分类 | 第11页 |
| 1.2 坏死梭杆菌的形态特性 | 第11-12页 |
| 1.3 坏死梭杆菌的培养特性 | 第12-13页 |
| 1.4 坏死梭杆菌的毒力因子 | 第13页 |
| 1.5 坏死梭杆菌的白细胞毒素 | 第13-14页 |
| 2 国内流行现状 | 第14页 |
| 3 临床症状 | 第14-15页 |
| 4 病理变化 | 第15页 |
| 5 实验室诊断 | 第15-17页 |
| 5.1 病原分离鉴定 | 第15-16页 |
| 5.2 血清学诊断 | 第16页 |
| 5.3 分子生物学诊断 | 第16-17页 |
| 5.4 鉴别诊断 | 第17页 |
| 6 危害及防治措施 | 第17-19页 |
| 6.1 危害 | 第17-18页 |
| 6.2 预防 | 第18页 |
| 6.3 治疗 | 第18-19页 |
| 7 坏死梭杆菌白细胞毒素制备疫苗的研究现状 | 第19-20页 |
| 8 本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二部分 试验研究 | 第21-43页 |
| 第二章 坏死梭杆菌的分离及鉴定 | 第21-27页 |
| 1 材料 | 第21-22页 |
| 1.1 样品来源 | 第21页 |
| 1.2 试剂 | 第21页 |
| 1.3 仪器 | 第21页 |
| 1.4 实验动物 | 第21页 |
| 1.5 培养基配制 | 第21-22页 |
| 2 方法 | 第22-23页 |
| 2.1 样本采集 | 第22页 |
| 2.2 坏死梭杆菌的分离 | 第22页 |
| 2.3 动物试验 | 第22-23页 |
| 2.4 分离菌株基因组DNA提取 | 第23页 |
| 2.5 引物设计与合成 | 第23页 |
| 2.6 PCR扩增 | 第23页 |
| 2.7 系统发育树分析 | 第23页 |
| 3 结果 | 第23-25页 |
| 3.1 细菌生长特性 | 第23-24页 |
| 3.2 动物致死试验结果 | 第24页 |
| 3.3 PCR鉴定结果 | 第24-25页 |
| 3.4 系统发育树分析结果 | 第25页 |
| 4 讨论 | 第25-26页 |
| 5 小结 | 第26-27页 |
| 第三章 坏死梭杆菌白细胞毒素的原核表达及Western-blot鉴定 | 第27-39页 |
| 1 材料 | 第27-28页 |
| 1.1 菌株 | 第27页 |
| 1.2 试剂 | 第27页 |
| 1.3 仪器 | 第27-28页 |
| 2 方法 | 第28-33页 |
| 2.1 lktA基因的引物设计 | 第28页 |
| 2.2 目的基因的扩增 | 第28页 |
| 2.3 PCR产物的回收 | 第28页 |
| 2.4 目的基因克隆与转化 | 第28-31页 |
| 2.5 目的蛋白的表达与Western-blot分析 | 第31-33页 |
| 3 结果 | 第33-37页 |
| 3.1 lktA目的基因扩增结果 | 第33页 |
| 3.2 PCR产物回收结果 | 第33-34页 |
| 3.3 重组质粒鉴定结果 | 第34-35页 |
| 3.4 重组表达质粒鉴定结果 | 第35-36页 |
| 3.5 诱导表达结果 | 第36-37页 |
| 3.6 重组蛋白纯化结果 | 第37页 |
| 3.7 Western-blot检测结果 | 第37页 |
| 4 讨论 | 第37-38页 |
| 5 小结 | 第38-39页 |
| 第四章 坏死梭杆菌白细胞毒素重组蛋白的免疫原性分析 | 第39-42页 |
| 1 材料 | 第39页 |
| 1.1 血清来源 | 第39页 |
| 1.2 试剂 | 第39页 |
| 1.3 仪器 | 第39页 |
| 1.4 实验动物 | 第39页 |
| 2 方法 | 第39-40页 |
| 2.1 重组蛋白免疫原的制备 | 第39页 |
| 2.2 免疫程序 | 第39-40页 |
| 2.3 血清抗体的制备 | 第40页 |
| 2.4 间接ELISA抗体效价的测定 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41页 |
| 5 小结 | 第41-42页 |
| 第五章 全文结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 附录1 | 第49-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 个人简历 | 第52-53页 |
| 导师简介 | 第53-55页 |
| 导师简介1 | 第53-54页 |
| 导师简介2 | 第54-55页 |
