| 摘要 | 第4-6页 |
| Summary | 第6-8页 |
| 缩略词对照表 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-31页 |
| 1. 精子发生 | 第15-18页 |
| 1.1 睾丸构成 | 第15-16页 |
| 1.2 精子发生过程 | 第16-17页 |
| 1.3 精液组成 | 第17页 |
| 1.4 成熟精子结构 | 第17-18页 |
| 2．精液冷冻对绵羊繁殖的意义 | 第18-20页 |
| 2.1 精液冷冻的价值 | 第18-19页 |
| 2.2 绵羊精液冷冻研究进展 | 第19页 |
| 2.3 绵羊精液冷冻的意义 | 第19-20页 |
| 3．冻融过程对精子结构的影响 | 第20-22页 |
| 3.1 冻融过程影响精子质膜结构 | 第21页 |
| 3.2 冻融过程影响精子头部分子构成 | 第21-22页 |
| 3.3 冻融过程影响精子线粒体功能 | 第22页 |
| 4．精子RNA冷冻标志物的研究 | 第22-24页 |
| 4.1 精子mRNA与精子冻融损伤的关系 | 第23页 |
| 4.2 精子miRNA与精子冻融损伤的关系 | 第23-24页 |
| 5. 精子蛋白冷冻标志物的研究 | 第24-28页 |
| 5.1 蛋白质组学 | 第24-25页 |
| 5.2 精子蛋白质组学研究方法 | 第25-27页 |
| 5.3 冻融精子的蛋白质组学研究 | 第27-28页 |
| 6. 精浆蛋白冷冻标志物的研究 | 第28-29页 |
| 7. 研究意义 | 第29-31页 |
| 第二章 绵羊冻融精子质量分析 | 第31-45页 |
| 1. 材料与方法 | 第31-37页 |
| 1.1 材料 | 第31页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第31-32页 |
| 1.3 方法 | 第32-37页 |
| 1.3.1 精液的采集、冷冻和解冻 | 第32-33页 |
| 1.3.2 活率检测 | 第33页 |
| 1.3.3 活动率检测 | 第33-34页 |
| 1.3.4 精子形态学观 | 第34页 |
| 1.3.5 质膜完整率检测 | 第34页 |
| 1.3.6 DNA损伤检测 | 第34-35页 |
| 1.3.7 顶体完整率检测 | 第35页 |
| 1.3.8 活性氧含量检测 | 第35页 |
| 1.3.9 ATP含量检测 | 第35-36页 |
| 1.3.10 线粒体膜电势检测 | 第36-37页 |
| 1.3.11 扫描电镜检测 | 第37页 |
| 1.3.12 透射电镜检测 | 第37页 |
| 1.3.13 数据处理和图像分析 | 第37页 |
| 2. 结果与分析 | 第37-43页 |
| 2.1 活动率、活率、形态和质膜完整率 | 第37-39页 |
| 2.2 DNA损伤、顶体完整率和活性氧含量 | 第39-41页 |
| 2.3 ATP含量和线粒体完整性 | 第41-42页 |
| 2.4 扫描电镜检测精子头部结果 | 第42-43页 |
| 2.5 透射电镜检测精子中段结果 | 第43页 |
| 3. 讨论 | 第43-44页 |
| 4. 小结 | 第44-45页 |
| 第三章 绵羊精子冻融损伤的蛋白标志物筛选 | 第45-62页 |
| 1. 材料与方法 | 第45-52页 |
| 1.1 材料 | 第45页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第45-47页 |
| 1.3 方法 | 第47-52页 |
| 1.3.1 精液的采集、冷冻和解冻 | 第47页 |
| 1.3.2 精子蛋白提取 | 第47-48页 |
| 1.3.3 双向电泳 | 第48-51页 |
| 1.3.4 胶内酶切和MALDI-TOF/TOF MS鉴定 | 第51-52页 |
| 1.3.5 数据处理和图像分析 | 第52页 |
| 2. 结果与分析 | 第52-61页 |
| 2.1 绵羊鲜精和冻融精子的蛋白表达谱 | 第52-58页 |
| 2.2 差异蛋白的GO注释 | 第58-59页 |
| 2.3 差异蛋白的Pathway富集 | 第59页 |
| 2.4 差异蛋白互作分析和标志蛋白的筛选 | 第59-61页 |
| 3. 讨论 | 第61页 |
| 4. 小结 | 第61-62页 |
| 第四章 HK1和CK2蛋白与绵羊精子冻融损伤的相关性分析 | 第62-86页 |
| 1. 材料与方法 | 第62-70页 |
| 1.1 材料 | 第62页 |
| 1.2 试剂与仪器 | 第62-64页 |
| 1.3 方法 | 第64-70页 |
| 1.3.1 精液的采集、冷冻和解冻 | 第64-65页 |
| 1.3.2 精子凋亡检测 | 第65页 |
| 1.3.3 免疫印迹 | 第65-67页 |
| 1.3.4 免疫荧光 | 第67页 |
| 1.3.5 QRT-PCR | 第67-69页 |
| 1.3.6 数据处理和图像分析 | 第69-70页 |
| 2. 结果与分析 | 第70-82页 |
| 2.1 CK2α 蛋白与绵羊精子冻融损伤的相关性 | 第70-78页 |
| 2.1.1 CK2α'蛋白与绵羊冻融精子顶体和DNA损伤的相关性 | 第70-75页 |
| 2.1.2 CK2α 蛋白与绵羊冻融精子凋亡的相关性 | 第75-78页 |
| 2.2 HK1蛋白与绵羊冻融精子活动力的相关性 | 第78-82页 |
| 3. 讨论 | 第82-85页 |
| 3.1 CK2与绵羊精子冻融损伤的关系 | 第82-84页 |
| 3.2 HK1与绵羊精子冻融损伤的关系 | 第84-85页 |
| 4. 小结 | 第85-86页 |
| 第五章 结论 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 作者简介及在学期间研究成果 | 第108-110页 |
| 导师简介 | 第110-111页 |
