| 中文摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第12-18页 |
| 1.1 HPV疫苗研究现状 | 第12-13页 |
| 1.2 肿瘤微环境 | 第13页 |
| 1.3 肿瘤微环境中Th2免疫应答对肿瘤免疫抑制的作用及影响 | 第13-14页 |
| 1.4 IL-4和IL-13在肿瘤免疫抑制微环境的功能及其影响 | 第14-15页 |
| 1.5 抗IL-4、IL-13主动免疫对调节肿瘤微环境的作用和意义 | 第15-16页 |
| 1.6 课题研究思路、目的及意义 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 细胞株、菌株及质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第18页 |
| 2.1.3 实验试剂及实验用品 | 第18-20页 |
| 2.1.4 实验主要仪器及设备 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-41页 |
| 2.2.1 IL-4、IL-13抗原表位寡核苷酸序列的合成 | 第21-22页 |
| 2.2.2 实验所需序列及测定 | 第22页 |
| 2.2.3 构建重组表达质粒pHBcAg-IL13肽表位、pHBcAg-IL4肽表位 | 第22-29页 |
| 2.2.4 重组质粒的诱导表达 | 第29-30页 |
| 2.2.5 病毒样颗粒的纯化 | 第30-32页 |
| 2.2.6 病毒样颗粒的鉴定 | 第32页 |
| 2.2.7 重组蛋白的浓度测定 | 第32-33页 |
| 2.2.8 TC-1肿瘤细胞的培养 | 第33-34页 |
| 2.2.9 C57BL/6小鼠TC-1移植肿瘤模型的建立 | 第34页 |
| 2.2.10 肿瘤模型中LA、A13疫苗的靶向干预 | 第34-35页 |
| 2.2.11 小鼠全血血清的制备 | 第35页 |
| 2.2.12 血清中细胞因子的检测 | 第35-36页 |
| 2.2.13 脾细胞体外刺激 | 第36-37页 |
| 2.2.14 ELISA检测细胞因子表达情况 | 第37-38页 |
| 2.2.15 流式细胞术检测脾细胞中T细胞亚群 | 第38页 |
| 2.2.16 ELISPOT检测分泌IFN-γ、IL-4的T细胞水平 | 第38-41页 |
| 第三章 结果 | 第41-75页 |
| 3.1 重组质粒酶切鉴定结果 | 第41页 |
| 3.2 重组蛋白的诱导表达 | 第41-42页 |
| 3.3 病毒样颗粒的纯化 | 第42-45页 |
| 3.3.1 硫酸铵盐析法初步纯化重组蛋白 | 第42-43页 |
| 3.3.2 蔗糖密度梯度离心精细纯化、鉴定重组蛋白 | 第43-45页 |
| 3.4 病毒样颗粒的鉴定 | 第45-48页 |
| 3.4.1 透射电子显微镜观察病毒样颗粒 | 第45-47页 |
| 3.4.2 高效液相色谱(HPLC)对病毒样颗粒纯度的分析 | 第47-48页 |
| 3.5 TC-1移植肿瘤C57BL/6小鼠中免疫应答特点分析 | 第48-51页 |
| 3.5.1 荷瘤小鼠脾细胞高表达Th2细胞因子 | 第48-49页 |
| 3.5.2 流式细胞术检测荷瘤鼠脾细胞中T细胞亚群水平 | 第49-51页 |
| 3.6 抗IL-4、IL-13疫苗在TC-1移植肿瘤小鼠模型中的预防性干预 | 第51-64页 |
| 3.6.1 疫苗预防性免疫对小鼠TC-1肿瘤生长的影响 | 第51-54页 |
| 3.6.2 疫苗预防性免疫促进HPV E7特异的表达IFN-γ的脾细胞应答 | 第54-55页 |
| 3.6.3 疫苗预防性免疫引起荷瘤小鼠血清IFN-γ水平升高 | 第55-56页 |
| 3.6.4 疫苗预防性免疫抑制了荷瘤小鼠血清IL-4、IL-13水平 | 第56-57页 |
| 3.6.5 疫苗预防性免疫影响了脾细胞细胞因子表达 | 第57-58页 |
| 3.6.6 疫苗预防性免疫显著增强了Th1而抑制了Th2细胞水平 | 第58-61页 |
| 3.6.7 疫苗预防性免疫增强了抗原特异性CTL应答水平 | 第61-63页 |
| 3.6.8 疫苗预防性免疫显著抑制了脾细胞中Treg水平 | 第63-64页 |
| 3.7 IL-4、IL-13疫苗单独或联合治疗性HPV疫苗对TC-1肿瘤的治疗性干预 | 第64-75页 |
| 3.7.1 IL-4、IL-13疫苗单独或联合治疗性疫苗免疫对TC-1肿瘤生长的影响 | 第64-67页 |
| 3.7.2 IL-4、IL-13疫苗单独或联合治疗性疫苗免疫提高了小鼠血清IFN-γ水平 | 第67-68页 |
| 3.7.3 IL-4、IL-13疫苗单独或联合治疗性疫苗免疫增强了脾细胞中Th1水平 | 第68-70页 |
| 3.7.4 IL-4、IL-13疫苗单独或联合治疗性免疫提高了抗原特异CTL水平 | 第70-72页 |
| 3.7.5 IL-4、IL-13疫苗单独或联合治疗性疫苗免疫抑制了脾细胞中Tregs水平 | 第72-75页 |
| 第四章 讨论 | 第75-78页 |
| 4.1 肿瘤微环境Th2应答在肿瘤免疫中的作用 | 第75-76页 |
| 4.2 IL-4与IL-13疫苗预防性免疫对小鼠移植肿瘤的干预 | 第76-77页 |
| 4.3 IL-4、IL-13疫苗联合治疗性HPV疫苗治疗性免疫对小鼠移植肿瘤的干预 | 第77-78页 |
| 第五章 结论和展望 | 第78-80页 |
| 5.1 结论 | 第78-79页 |
| 5.2 展望 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-84页 |
| 附录 | 第84-92页 |
| 附录Ⅰ 英文缩写 | 第84-85页 |
| 附录Ⅱ 主要溶液配制方法 | 第85-92页 |
| 综述 | 第92-95页 |
| 作者简历 | 第95页 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
