| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第13-25页 |
| 1.1 植物细胞壁 | 第13-16页 |
| 1.1.1 纤维素 | 第13-14页 |
| 1.1.2 半纤维素 | 第14-15页 |
| 1.1.3 木质素 | 第15-16页 |
| 1.2 植物次生壁转录调控研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3 KNOX蛋白的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.4 MYB转录因子的研究进展 | 第19-22页 |
| 1.5 棉花纤维发育模式 | 第22-24页 |
| 1.6 立题依据 | 第24-25页 |
| 第二章 GhKNL1在棉纤维发育中的功能研究 | 第25-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 载体与菌种 | 第25页 |
| 2.1.3 化学试剂 | 第25页 |
| 2.1.4 试剂盒与工具酶 | 第25页 |
| 2.1.5 常用储液 | 第25页 |
| 2.1.6 常用缓冲液 | 第25-26页 |
| 2.1.7 仪器设备 | 第26页 |
| 2.1.8 培养基 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.2.1 农杆菌感受态细胞(供电转方法使用)的制备和转化 | 第26页 |
| 2.2.2 棉花转化 | 第26-27页 |
| 2.2.3 棉花的继代管理 | 第27页 |
| 2.2.4 CTAB法提取棉花叶片的gDNA | 第27页 |
| 2.2.5 20D棉花纤维材料RNA的提取 | 第27页 |
| 2.2.6 逆转录RNA成cDNA | 第27-28页 |
| 2.2.7 荧光实时定量PCR(RT-PCR) | 第28-29页 |
| 2.2.8 离体胚实验 | 第29-30页 |
| 2.3 实验结果 | 第30-36页 |
| 2.3.1 GhKNL1 RNAi载体构建和棉花转化 | 第30-31页 |
| 2.3.2 GhKNL1 RNAi转基因棉花阳性苗的鉴定 | 第31页 |
| 2.3.3 RNA的提取、半定量及GhKNL1基因的实时定量分析 | 第31页 |
| 2.3.4 与棉纤维发育相关的部分基因在转基因棉花中的表达水平定量分析 | 第31-34页 |
| 2.3.5 GhKNL1 RNAi的转基因棉花的表型分析 | 第34-35页 |
| 2.3.6 离体胚表型分析 | 第35-36页 |
| 2.3.7 KNL1蛋白的诱导 | 第36页 |
| 2.4 讨论 | 第36-39页 |
| 2.4.1 抑制GhKNL1基因表达促进转基因棉花棉纤维生长发育 | 第36-38页 |
| 2.4.2 棉纤维发育相关的基因表达水平发生变化 | 第38-39页 |
| 第三章 GhMYBL1在棉纤维发育中功能的初步研究 | 第39-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第39页 |
| 3.1.2 载体与菌种 | 第39页 |
| 3.1.3 工具酶及试剂盒 | 第39页 |
| 3.1.4 常用储液 | 第39页 |
| 3.1.5 常用缓冲液 | 第39-40页 |
| 3.1.6 常用培养基 | 第40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-46页 |
| 3.2.1 农杆菌介导的转基因棉花的转化方法 | 第40页 |
| 3.2.2 CTAB提取棉花gDNA的方法 | 第40页 |
| 3.2.3 次生壁发育相关的基因的启动子SMRE基序的查找 | 第40页 |
| 3.2.4 拟南芥杂交方法 | 第40-41页 |
| 3.2.5 GUS染色及观察 | 第41页 |
| 3.2.6 荧光定量 | 第41页 |
| 3.2.7 原生质体实验 | 第41-42页 |
| 3.2.8 EMSA实验 | 第42-46页 |
| 3.3 实验结果 | 第46-55页 |
| 3.3.1 GhMYBL1-RNAi载体的构建和棉花转化 | 第46-47页 |
| 3.3.2 GhMYBL1过量表达载体的构建和棉花转化 | 第47-48页 |
| 3.3.3 次生壁发育相关的基因的启动子序列SMRE基序的查找 | 第48页 |
| 3.3.4 拟南芥杂交实验 | 第48-51页 |
| 3.3.5 原生质体实验 | 第51-52页 |
| 3.3.6 凝胶迁移(EMSA)实验 | 第52-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-67页 |
| 硕士研究生在读期间发表的论文 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
