中文摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
英汉缩略词对照表 | 第12-13页 |
前言 | 第13-16页 |
第一部分 稳定转染细胞株的建立 | 第16-37页 |
1 材料与方法 | 第16-28页 |
1.1 实验材料与仪器 | 第16页 |
1.2 主要实验试剂 | 第16-18页 |
1.3 主要实验仪器 | 第18页 |
1.4 实验方法 | 第18-28页 |
2 结果 | 第28-31页 |
2.1 DNMT1沉默载体转染效率的确定 | 第28页 |
2.2 稳定沉默细胞的DNMT1m RNA表达检测 | 第28-30页 |
2.3 稳定沉默细胞的DNMT1蛋白表达检测 | 第30-31页 |
3 讨论 | 第31-33页 |
4 结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-37页 |
第二部分 DNMT1对食管鳞癌影响的体外实验 | 第37-63页 |
1 材料与方法 | 第37-45页 |
1.1 实验材料与仪器 | 第37页 |
1.2 主要实验试剂 | 第37-38页 |
1.3 主要实验仪器 | 第38页 |
1.4 实验方法 | 第38-45页 |
2 结果 | 第45-56页 |
2.1 CCK-8 法检测食管鳞癌细胞增殖情况 | 第45页 |
2.2 集落形成实验 | 第45-46页 |
2.3 Transwell迁移实验 | 第46-47页 |
2.4 Transwell侵袭实验 | 第47-48页 |
2.5 细胞周期 | 第48-49页 |
2.6 细胞凋亡 | 第49-50页 |
2.7 肿瘤相关抑癌基因m RNA表达的检测 | 第50-54页 |
2.8 肿瘤相关抑癌基因蛋白表达的检测 | 第54-55页 |
2.9 肿瘤相关抑癌基因DAPK和RASSF1A甲基化的检测 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
4 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
第三部分 沉默DNMT1对裸鼠移植瘤生长的影响 | 第63-79页 |
1 材料与方法 | 第63-69页 |
1.1 实验材料与仪器 | 第63页 |
1.2 主要实验试剂 | 第63-65页 |
1.3 主要实验仪器 | 第65页 |
1.4 实验方法 | 第65-69页 |
2 结果 | 第69-75页 |
2.1 裸鼠体内移植瘤的生长情况 | 第69-70页 |
2.2 裸鼠肿瘤组织中DNMT1和抑癌基因DAPK、RASSF1A的表达 | 第70-73页 |
2.3 免疫组化检测裸鼠移植瘤组织中抑癌基因DAPK和RASSF1A的表达 | 第73页 |
2.4 甲基化特异性PCR检测裸鼠移植瘤组织中抑癌基因DAPK和RASSF1A的甲基化状态 | 第73-75页 |
3 讨论 | 第75-77页 |
4 结论 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-79页 |
全文总结 | 第79-80页 |
综述 | 第80-92页 |
参考文献 | 第86-92页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第92-93页 |
致谢 | 第93页 |