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超积累型东南景天SaCAD基因的克隆及其功能分析

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 绪论第13-25页
    1.1 研究背景第13-22页
        1.1.1 重金属污染现状及危害第13-14页
        1.1.2 土壤重金属污染修复技术与植物修复第14-16页
        1.1.3 植物耐受重金属机制第16-18页
        1.1.4 细胞壁及其在逆境中的作用第18页
        1.1.5 木质素和肉桂醇脱氢酶(CAD)在逆境中作用第18-22页
    1.2 研究内容第22-24页
        1.2.1 SaCAD基因的分离和生物信息学分析第22页
        1.2.2 SaCAD基因时空表达模式分析第22页
        1.2.3 SaCAD基因的亚细胞定位研究第22-23页
        1.2.4 SaCAD转基因酵母的耐镉分析第23页
        1.2.5 SaCAD转基因拟南芥的功能分析第23页
        1.2.6 SaCAD转基因拟南芥细胞壁酶活和组分分析第23-24页
    1.3 技术路线第24-25页
第二章 实验材料与方法第25-52页
    2.1 实验材料第25-30页
        2.1.1 供试植物材料第25页
        2.1.2 菌株及载体第25页
        2.1.3 酶及试剂第25-26页
        2.1.4 主要仪器设备第26-27页
        2.1.5 培养基、试剂和缓冲液的配置第27-28页
        2.1.6 引物第28-30页
    2.2 实验方法第30-52页
        2.2.1 SaCAD基因的克隆第31-35页
        2.2.2 SaCAD生物信息学分析第35-36页
        2.2.3 SaCAD基因的时空表达模式第36页
        2.2.4 SaCAD的亚细胞定位分析第36-39页
        2.2.5 转基因酵母的镉耐性分析第39-40页
        2.2.6 SaCAD基因在拟南芥中获得和检测第40-43页
        2.2.7 SaCAD转基因植株的镉耐性分析第43-47页
        2.2.8 SaCAD与拟南芥AtCAD基因家族成员在Cd胁迫下的表达分析第47页
        2.2.9 转基因拟南芥酶活测定第47-49页
        2.2.10 转基因拟南芥细胞壁的结构分析第49-52页
第三章 结果与分析第52-74页
    3.1 SaCAD基因结构和生物信息学分析第52-58页
        3.1.1 SaCAD基因序列分析第52-53页
        3.1.2 生物信息学分析第53-58页
    3.2 镉胁迫下SaCAD基因的表达模式分析第58-59页
    3.3 SaCAD的亚细胞定位第59-60页
    3.4 SaCAD基因转基因酵母对镉的耐性分析第60-61页
    3.5 SaCAD转基因拟南芥的检测第61-63页
    3.6 转基因拟南芥的镉耐性分析第63-69页
        3.6.1 转基因拟南芥根长实验第63-64页
        3.6.2 镉胁迫后拟南芥表型分析第64页
        3.6.3 拟南芥的生理指标测定第64-66页
        3.6.4 转基因拟南芥的抗氧化作用第66-68页
        3.6.5 超表达SaCAD对拟南芥镉积累能力的影响第68-69页
    3.7 转基因植株SaCAD的表达分析第69-71页
        3.7.1 SaCAD与拟南芥AtCAD基因家族成员在Cd胁迫下的表达分析第69-70页
        3.7.2 CAD酶活测定第70-71页
        3.7.3 拟南芥细胞壁PAL酶活测定第71页
    3.8 转基因拟南芥细胞壁的结构分析第71-74页
        3.8.1 石蜡切片观察拟南芥根部细胞壁结构第71-72页
        3.8.2 拟南芥细胞壁组分测定第72-74页
第四章 结论与展望第74-78页
    4.1 结论第74-76页
        4.1.1 SaCAD基因的研究意义第74页
        4.1.2 SaCAD基因的生物信息学分析第74-75页
        4.1.3 SaCAD的亚细胞定位第75页
        4.1.4 SaCAD基因对酵母和拟南芥的镉耐性影响第75-76页
        4.1.5 转基因拟南芥的酶活和细胞壁结构分析第76页
    4.2 本实验的创新点第76页
    4.3 研究展望第76-78页
参考文献第78-89页
在读期间的学术研究第89-90页
致谢第90页

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