摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略词表 | 第10-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-35页 |
1.1 水稻功能基因组的研究方法 | 第15-19页 |
1.1.1 正向遗传学方法 | 第15-17页 |
1.1.2 反向遗传学方法 | 第17-19页 |
1.2 叶色突变体的分子机制 | 第19-25页 |
1.2.1 叶绿素的生物合成 | 第19-21页 |
1.2.2 血红素的代谢途径 | 第21-22页 |
1.2.3 叶绿素的生物降解 | 第22-23页 |
1.2.4 叶绿体分化、发育 | 第23-24页 |
1.2.5 核-质信号传输途径 | 第24页 |
1.2.6 其他非直接相关基因突变 | 第24-25页 |
1.3 叶色突变体的应用价值 | 第25-26页 |
1.3.1 在基础研究中的价值 | 第25页 |
1.3.2 在农业生产中的价值 | 第25-26页 |
1.4 线粒体转运家族的研究现状 | 第26-34页 |
1.4.1 植物线粒体转运家族的分类 | 第27-29页 |
1.4.2 植物线粒体转运家族的功能 | 第29-30页 |
1.4.3 pANTs和BT1亚族的进化分析 | 第30-33页 |
1.4.4 pANTs的研究现状 | 第33-34页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第34-35页 |
第二章 材料与方法 | 第35-49页 |
2.1 水稻材料的种植及处理条件 | 第35页 |
2.1.1 水稻材料的种植条件 | 第35页 |
2.1.2 水稻材料的取材与处理 | 第35页 |
2.2 叶片色素含量的测定 | 第35-36页 |
2.3 叶肉细胞透射电镜观察 | 第36页 |
2.4 sla的遗传分析 | 第36页 |
2.5 Osbt1-3基因的定位及鉴定 | 第36-39页 |
2.5.1 DNA提取 | 第36-37页 |
2.5.2 PCR反应及电泳检测 | 第37-38页 |
2.5.3 SSR分子标记筛选、设计及定位 | 第38页 |
2.5.4 互补载体的构建及遗传转化 | 第38-39页 |
2.5.5 互补转基因材料的鉴定 | 第39页 |
2.6 亚细胞定位 | 第39-44页 |
2.6.1 载体构建 | 第39页 |
2.6.2 水稻原生质体制备和转化 | 第39-40页 |
2.6.3 叶绿体的分离 | 第40-41页 |
2.6.4 叶绿体被膜及内囊体的分离 | 第41页 |
2.6.5 OsBT1-3蛋白的提取 | 第41-42页 |
2.6.6 SDS-PAGE电泳及Western Blot分析 | 第42-44页 |
2.7 OsBT1-3蛋白的原核表达及功能分析 | 第44-46页 |
2.7.1 OsBT1-3原核表达载体的构建及表达菌株的选择 | 第44页 |
2.7.2 OsBT1-3蛋白原核表达的检测 | 第44页 |
2.7.3 OsBT1-3蛋白底物特异性检测 | 第44-45页 |
2.7.4 OsBT1-3蛋白的动力学参数 | 第45页 |
2.7.5 OsBT1-3蛋白的转运模式 | 第45-46页 |
2.8 RNA提取 | 第46-47页 |
2.9 qRT-PCR分析 | 第47-49页 |
第三章 结果与分析 | 第49-75页 |
3.1 突变体sla的第一、二片叶白化表型 | 第49-50页 |
3.2 突变体sla的第一、二片叶的叶绿素含量显著下降 | 第50-51页 |
3.3 突变体sla的白化叶片的叶绿体发育受阻 | 第51-53页 |
3.4 突变体sla的表型受单个隐性核基因控制 | 第53页 |
3.5 突变体sla白化表型相关基因的定位克隆 | 第53-55页 |
3.6 转基因互补验证 | 第55-57页 |
3.7 OsBT1-3同源比对分析 | 第57-59页 |
3.8 亚细胞定位OsBT1-3是一个质体被膜上的跨膜蛋白 | 第59-62页 |
3.9 OsBT1-2的亚细胞定位为另一个质体蛋白 | 第62-63页 |
3.10 OsBT1-3的原核表达 | 第63-64页 |
3.11 OsBT1-3的功能研究 | 第64-69页 |
3.11.1 OsBT1-3转运ATP、ADP和AMP | 第64-65页 |
3.11.2 OsBT1-3对腺嘌啉核苷酸的转运没有偏好性 | 第65页 |
3.11.3 OsBT1-3是一个单向转运蛋白 | 第65-69页 |
3.12 OsBT1-3的表达模式 | 第69-71页 |
3.13 OsBT1-2的表达模式 | 第71-72页 |
3.14 光照调控OsBT1-3的表达 | 第72-73页 |
3.15 OsBT1-3对叶绿体发育、叶绿素合成相关基因有调控作用 | 第73-75页 |
第四章 讨论与总结 | 第75-79页 |
4.1 讨论 | 第75-77页 |
4.1.1 OsBT1-3在叶绿体早期发育过程中发挥作用 | 第75页 |
4.1.2 OsBT1-3定位于叶绿体被膜上 | 第75-76页 |
4.1.3 OsBT1-3是一个腺苷酸单向转运蛋白 | 第76页 |
4.1.4 OsBT1-2和OsBT1-3在不同组织和生长时期行使功能 | 第76-77页 |
4.2 总结 | 第77-79页 |
本文的创新点 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-87页 |
附录Ⅰ 水稻转基因操作 | 第87-90页 |
附录Ⅱ 引物表 | 第90-92页 |
博士期间已发表的学术论文及专利 | 第92-93页 |
致谢 | 第93-94页 |