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水稻苗期白叶基因OsBT1-3的图位克隆与功能研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
缩略词表第10-15页
第一章 文献综述第15-35页
    1.1 水稻功能基因组的研究方法第15-19页
        1.1.1 正向遗传学方法第15-17页
        1.1.2 反向遗传学方法第17-19页
    1.2 叶色突变体的分子机制第19-25页
        1.2.1 叶绿素的生物合成第19-21页
        1.2.2 血红素的代谢途径第21-22页
        1.2.3 叶绿素的生物降解第22-23页
        1.2.4 叶绿体分化、发育第23-24页
        1.2.5 核-质信号传输途径第24页
        1.2.6 其他非直接相关基因突变第24-25页
    1.3 叶色突变体的应用价值第25-26页
        1.3.1 在基础研究中的价值第25页
        1.3.2 在农业生产中的价值第25-26页
    1.4 线粒体转运家族的研究现状第26-34页
        1.4.1 植物线粒体转运家族的分类第27-29页
        1.4.2 植物线粒体转运家族的功能第29-30页
        1.4.3 pANTs和BT1亚族的进化分析第30-33页
        1.4.4 pANTs的研究现状第33-34页
    1.5 本研究的目的和意义第34-35页
第二章 材料与方法第35-49页
    2.1 水稻材料的种植及处理条件第35页
        2.1.1 水稻材料的种植条件第35页
        2.1.2 水稻材料的取材与处理第35页
    2.2 叶片色素含量的测定第35-36页
    2.3 叶肉细胞透射电镜观察第36页
    2.4 sla的遗传分析第36页
    2.5 Osbt1-3基因的定位及鉴定第36-39页
        2.5.1 DNA提取第36-37页
        2.5.2 PCR反应及电泳检测第37-38页
        2.5.3 SSR分子标记筛选、设计及定位第38页
        2.5.4 互补载体的构建及遗传转化第38-39页
        2.5.5 互补转基因材料的鉴定第39页
    2.6 亚细胞定位第39-44页
        2.6.1 载体构建第39页
        2.6.2 水稻原生质体制备和转化第39-40页
        2.6.3 叶绿体的分离第40-41页
        2.6.4 叶绿体被膜及内囊体的分离第41页
        2.6.5 OsBT1-3蛋白的提取第41-42页
        2.6.6 SDS-PAGE电泳及Western Blot分析第42-44页
    2.7 OsBT1-3蛋白的原核表达及功能分析第44-46页
        2.7.1 OsBT1-3原核表达载体的构建及表达菌株的选择第44页
        2.7.2 OsBT1-3蛋白原核表达的检测第44页
        2.7.3 OsBT1-3蛋白底物特异性检测第44-45页
        2.7.4 OsBT1-3蛋白的动力学参数第45页
        2.7.5 OsBT1-3蛋白的转运模式第45-46页
    2.8 RNA提取第46-47页
    2.9 qRT-PCR分析第47-49页
第三章 结果与分析第49-75页
    3.1 突变体sla的第一、二片叶白化表型第49-50页
    3.2 突变体sla的第一、二片叶的叶绿素含量显著下降第50-51页
    3.3 突变体sla的白化叶片的叶绿体发育受阻第51-53页
    3.4 突变体sla的表型受单个隐性核基因控制第53页
    3.5 突变体sla白化表型相关基因的定位克隆第53-55页
    3.6 转基因互补验证第55-57页
    3.7 OsBT1-3同源比对分析第57-59页
    3.8 亚细胞定位OsBT1-3是一个质体被膜上的跨膜蛋白第59-62页
    3.9 OsBT1-2的亚细胞定位为另一个质体蛋白第62-63页
    3.10 OsBT1-3的原核表达第63-64页
    3.11 OsBT1-3的功能研究第64-69页
        3.11.1 OsBT1-3转运ATP、ADP和AMP第64-65页
        3.11.2 OsBT1-3对腺嘌啉核苷酸的转运没有偏好性第65页
        3.11.3 OsBT1-3是一个单向转运蛋白第65-69页
    3.12 OsBT1-3的表达模式第69-71页
    3.13 OsBT1-2的表达模式第71-72页
    3.14 光照调控OsBT1-3的表达第72-73页
    3.15 OsBT1-3对叶绿体发育、叶绿素合成相关基因有调控作用第73-75页
第四章 讨论与总结第75-79页
    4.1 讨论第75-77页
        4.1.1 OsBT1-3在叶绿体早期发育过程中发挥作用第75页
        4.1.2 OsBT1-3定位于叶绿体被膜上第75-76页
        4.1.3 OsBT1-3是一个腺苷酸单向转运蛋白第76页
        4.1.4 OsBT1-2和OsBT1-3在不同组织和生长时期行使功能第76-77页
    4.2 总结第77-79页
本文的创新点第79-80页
参考文献第80-87页
附录Ⅰ 水稻转基因操作第87-90页
附录Ⅱ 引物表第90-92页
博士期间已发表的学术论文及专利第92-93页
致谢第93-94页

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