| 摘要 | 第3-9页 |
| ABSTRACT | 第9-15页 |
| 第一章 引言 | 第19-26页 |
| 1.1 真核生物编码基因的结构特点 | 第19页 |
| 1.2 真核生物成熟mRNA的合成及加工 | 第19-20页 |
| 1.3 蛋白质的生物合成 | 第20-21页 |
| 1.4 5'UTR对下游编码基因翻译的调控机制 | 第21-23页 |
| 1.5 uORF与人类疾病关系 | 第23-26页 |
| 第二章 实验材料 | 第26-32页 |
| 2.1 仪器及分析软件 | 第26-27页 |
| 2.2 分子生物学实验试剂 | 第27-29页 |
| 2.2.1 外周血基因组DNA提取试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.2 常规PCR试剂 | 第28页 |
| 2.2.3 电泳试剂 | 第28页 |
| 2.2.4 细胞RNA提取及逆转录试剂 | 第28-29页 |
| 2.3 TA克隆试剂 | 第29-30页 |
| 2.4 限制性内切酶及连接酶 | 第30页 |
| 2.5 双荧光素酶检测试剂 | 第30页 |
| 2.6 细胞培养试剂 | 第30-32页 |
| 第三章 实验方法 | 第32-54页 |
| 3.1 实验设计与技术路线 | 第32页 |
| 3.2 前期对疾病数据库的研究 | 第32-33页 |
| 3.3 人外周全血样品DNA提取及浓度的测定 | 第33-34页 |
| 3.4 psiCHECK~(TM)-2载体改造 | 第34-43页 |
| 3.4.1. 添加多克隆位点 | 第35-40页 |
| 3.4.2 4个候选靶点基因5'UTR序列的扩增 | 第40-43页 |
| 3.5 构建野生型与突变型的靶点基因5'UTR-psiCHECK~(TM)-2载体 | 第43-46页 |
| 3.5.1 野生型靶点基因5'UTR-psiCHECK~(TM)-2载体构建 | 第43-44页 |
| 3.5.2 突变型靶点基因5'UTR-psiCHECK~(TM)-2载体构建 | 第44-46页 |
| 3.6 细胞功能实验 | 第46-53页 |
| 3.6.1 细胞培养 | 第46-49页 |
| 3.6.2 蛋白表达检测 | 第49页 |
| 3.6.3 荧光定量PCR检测mRNA | 第49-53页 |
| 3.7 统计分析 | 第53-54页 |
| 第四章 实验结果 | 第54-66页 |
| 4.1 多克隆位点的添加 | 第54页 |
| 4.2 靶点基因5'UTR序列的扩增 | 第54-55页 |
| 4.3 野生型靶点基因5'UTR序列与psiCHECK~(TM)-2载体连接 | 第55-57页 |
| 4.4 突变型靶点基因5'UTR-psiCHECK~(TM)-2载体构建 | 第57-60页 |
| 4.5 蛋白表达含量检测 | 第60-62页 |
| 4.6 荧光定量PCR检测mRNA | 第62-66页 |
| 第五章 分析与讨论 | 第66-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 附录：英文缩写词中英文对照表 | 第78-79页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
