中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-10页 |
英文缩略词表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-16页 |
第二章 miR-495 在骨肉瘤中的表达及生物学行为影响 | 第16-34页 |
2.1 实验材料 | 第16-19页 |
2.1.1 主要实验试剂及细胞系 | 第16-18页 |
2.1.2 实验设备及仪器 | 第18-19页 |
2.1.3 临床组织样本 | 第19页 |
2.1.4 细胞株及细胞培养 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-25页 |
2.2.1 RT-qPCR | 第19-22页 |
2.2.2 骨肉瘤细胞的转染 | 第22-23页 |
2.2.3 MTT检测 | 第23页 |
2.2.4 克隆形成实验 | 第23页 |
2.2.5 细胞周期分析 | 第23-24页 |
2.2.6 Annexin V/PI凋亡检测 | 第24页 |
2.2.7 Caspase-3 活性检测 | 第24-25页 |
2.2.8 Transwell细胞体外侵袭实验 | 第25页 |
2.2.9 统计学分析 | 第25页 |
2.3 实验结果 | 第25-31页 |
2.3.1 miR-495 在骨肉瘤中的表达 | 第25-26页 |
2.3.2 miR-495 对骨肉瘤的生物学行为影响 | 第26-31页 |
2.4 讨论 | 第31-34页 |
第三章 miR-495 靶向HMGN5基因对骨肉瘤的调控机制研究 | 第34-56页 |
3.1 实验材料 | 第35-38页 |
3.1.1 主要实验试剂及细胞系 | 第35-37页 |
3.1.2 实验设备及仪器 | 第37-38页 |
3.1.3 细胞株及细胞培养 | 第38页 |
3.2 实验方法 | 第38-47页 |
3.2.1 荧光素酶报告基因实验 | 第38-42页 |
3.2.2 HMGN5回复实验 | 第42-44页 |
3.2.3 细胞总蛋白的提取 | 第44-45页 |
3.2.4 总蛋白的定量 | 第45页 |
3.2.5 免疫印迹实验(Western Blot) | 第45-47页 |
3.2.6 统计学分析 | 第47页 |
3.3 实验结果 | 第47-52页 |
3.3.1 miR-495 的靶向基因验证 | 第47-49页 |
3.3.2 miR-495 对骨肉瘤细胞中HMGN5表达的影响 | 第49页 |
3.3.3 HMGN5表达回复对骨肿瘤的影响 | 第49-51页 |
3.3.4 miR-495 对HMGN5下游基因表达的影响 | 第51-52页 |
3.4 讨论 | 第52-56页 |
第四章 结论 | 第56-57页 |
创新点与展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
综述 miRNA相关的骨肉瘤病因学及临床研究进展 | 第66-98页 |
参考文献 | 第81-98页 |
作者简介及在学期间所获得的科研成果 | 第98-100页 |
致谢 | 第100页 |