| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词 | 第9-14页 |
| 绪论 | 第14-17页 |
| 1. Fos基因促进干细胞向肌腱细胞分化 | 第17-32页 |
| 1.1.引言 | 第17页 |
| 1.2. 实验试剂与仪器 | 第17-20页 |
| 1.2.1. 材料和试剂 | 第17-19页 |
| 1.2.2. 实验仪器及材料 | 第19-20页 |
| 1.2.3. 相关试剂的配制 | 第20页 |
| 1.2.4. 实验动物 | 第20页 |
| 1.2.5. 实验仪器 | 第20页 |
| 1.3. 实验方法 | 第20-26页 |
| 1.3.1. 肌腱干细胞(TSPCs)的分离和培养 | 第21页 |
| 1.3.2. 细胞冻存 | 第21页 |
| 1.3.3. 细胞复苏 | 第21-22页 |
| 1.3.4. 病毒感染 | 第22页 |
| 1.3.5. 提取RNA | 第22-23页 |
| 1.3.6. 逆转录合成cDNA | 第23页 |
| 1.3.7. 实时荧光定量PCR(RealtimePCR) | 第23-24页 |
| 1.3.8. 体外组织工程肌腱的制备 | 第24页 |
| 1.3.9. 膑腱缺损动物模型的建立 | 第24页 |
| 1.3.10. 组织学检测 | 第24-26页 |
| 1.3.11. 统计学分析 | 第26页 |
| 1.4. 实验结果 | 第26-30页 |
| 1.4.1. 构建Fos过表达细胞系 | 第26-27页 |
| 1.4.2. 肌腱干细胞过表达Fos基因后的基因表达 | 第27-28页 |
| 1.4.3. 膑腱修复后基因的表达 | 第28-29页 |
| 1.4.4. 膑腱修复后的组织学比较 | 第29-30页 |
| 1.5. 讨论 | 第30-32页 |
| 2. 硬度诱导肌腱干细胞向肌腱系成熟 | 第32-55页 |
| 2.1. 引言 | 第32页 |
| 2.2. 材料和试剂 | 第32-35页 |
| 2.2.1. 材料和试剂 | 第32-34页 |
| 2.2.2. 实验动物 | 第34页 |
| 2.2.3. 实验仪器 | 第34页 |
| 2.2.4. 相关溶液的配制 | 第34-35页 |
| 2.3. 实验方法 | 第35-39页 |
| 2.3.1. PDMS材料制作 | 第35页 |
| 2.3.2. 多向分化及鉴定 | 第35-36页 |
| 2.3.3. 小鼠膑腱损伤模型 | 第36页 |
| 2.3.4. 力学测试 | 第36页 |
| 2.3.5. 组织学检测 | 第36-37页 |
| 2.3.6. 胶原含量测定 | 第37-38页 |
| 2.3.7. 透射电镜样本制备 | 第38页 |
| 2.3.8. 胶原纤维直径测量 | 第38-39页 |
| 2.3.9. 细胞增殖检测 | 第39页 |
| 2.4. 实验结果 | 第39-54页 |
| 2.4.1. 不同浓度配比形成的PDMS基质的杨氏模量 | 第39-40页 |
| 2.4.2. 小鼠跟腱不同区域以及小鼠不同发育阶段跟腱的杨氏模量 | 第40-41页 |
| 2.4.3. 普通孔板和PDMS基质上细胞增殖能力比较 | 第41页 |
| 2.4.4. Scx-GFP肌腱干细胞在不同硬度基质上的荧光表达 | 第41-43页 |
| 2.4.5. Scx-GFP肌腱干细胞在不同硬度基质上肌腱相关基因的表达 | 第43-44页 |
| 2.4.6. 肌腱干细胞在PDMS基质和普通孔板上形态学比较 | 第44页 |
| 2.4.7. PDMS基质和普通孔板上诱导形成细胞片 | 第44-45页 |
| 2.4.8. 不同基质硬度对细胞片胶原纤维生长作用的比较 | 第45-46页 |
| 2.4.9. 不同硬度基质上形成的细胞片肌腱相关基因的表达 | 第46页 |
| 2.4.10. 不同基质硬度上生长的肌腱干细胞向脂肪系,骨系分化能力检测 | 第46-47页 |
| 2.4.11. 大鼠髌腱窗口造模 | 第47-48页 |
| 2.4.12. 膑腱修复2周后样本及组织学比较 | 第48-49页 |
| 2.4.13. 膑腱修复2周后胶原纤维改变 | 第49页 |
| 2.4.14. 膑腱修复2周后的基因表达 | 第49-50页 |
| 2.4.15. 膑腱修复4周后样本组织学和胶原含量比较 | 第50-51页 |
| 2.4.16. 膑腱修复4周后胶原纤维改变 | 第51-52页 |
| 2.4.17. 膑腱修复4周后的基因表达 | 第52-53页 |
| 2.4.18. 修复4周后修复肌腱的力学性能比较 | 第53-54页 |
| 2.5. 讨论 | 第54-55页 |
| 3. 特异性整合素亚型在基质诱导的肌腱分化中的作用 | 第55-66页 |
| 3.1. 引言 | 第55页 |
| 3.2. 实验试剂与仪器 | 第55-57页 |
| 3.2.1. 材料和试剂 | 第55-56页 |
| 3.2.2. 实验仪器 | 第56-57页 |
| 3.3. 实验方法 | 第57-58页 |
| 3.3.1. 细胞免疫荧光 | 第57页 |
| 3.3.2. 流式分析 | 第57-58页 |
| 3.3.3. siRNA转染 | 第58页 |
| 3.4. 实验结果 | 第58-65页 |
| 3.4.1. 不同细胞在PDMS上贴附能力比较 | 第58-59页 |
| 3.4.2. Integrin在肌腱干细胞和间充质干细胞中的表达 | 第59-60页 |
| 3.4.3. 肌腱干细胞特异integrin亚型的筛选 | 第60-61页 |
| 3.4.4. 肌腱干细胞特异integrin亚型在PDMS基质上的表达 | 第61页 |
| 3.4.5. Integrin αm免疫荧光检测 | 第61-62页 |
| 3.4.6. Integrin αm在PDMS基质和普通孔板上的表达以及与脂阀蛋白的定位 | 第62-63页 |
| 3.4.7. Fos基因与integrin的表达关系 | 第63-64页 |
| 3.4.8. Fos基因在不同硬度基质上的表达 | 第64-65页 |
| 3.5. 讨论 | 第65-66页 |
| 4. 总结 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 综述 | 第73-85页 |
| 参考文献 | 第80-85页 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第85页 |
