| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| ·GTPV的流行概况 | 第13页 |
| ·病原学 | 第13-16页 |
| ·病毒的分类及形态 | 第13-14页 |
| ·病毒的理化特性 | 第14页 |
| ·基因组结构 | 第14-16页 |
| ·GTPV的诊断方法 | 第16-19页 |
| ·临床诊断 | 第16-17页 |
| ·实验室诊断 | 第17-19页 |
| ·GTPV缺失重组病毒的构建与筛选 | 第19-21页 |
| ·转移载体的构建元件 | 第19-20页 |
| ·缺失重组病毒的构建 | 第20-21页 |
| ·缺失重组毒的筛选 | 第21页 |
| ·羊痘疫苗的研究概况 | 第21-23页 |
| ·灭活疫苗 | 第21-22页 |
| ·弱毒疫苗 | 第22页 |
| ·亚单位疫苗 | 第22页 |
| ·活载体疫苗和基因缺失疫苗 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第23-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-40页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·质粒载体 | 第25页 |
| ·病毒与细胞 | 第25页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·引物设计 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-40页 |
| ·原代犊牛睾丸(bovine testicle,BT)细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·GTPV的增殖 | 第28页 |
| ·病毒DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·同源重组臂的克隆与鉴定 | 第29-33页 |
| ·转移载体质粒pLF-Eg和pRF-Eg的构建及鉴定 | 第33-37页 |
| ·重组病毒vLF-Eg和vRF-Eg的制备、纯化和鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组病毒的生物学特性鉴定 | 第38-40页 |
| 第三章 实验结果 | 第40-48页 |
| ·同源重组臂基因片段的克隆和序列分析结果 | 第40-41页 |
| ·同源重组基因片段的克隆结果 | 第40页 |
| ·扩增片段的核苷酸同源性分析结果 | 第40-41页 |
| ·中间转移载体PLF和PRF的鉴定结果 | 第41-42页 |
| ·重组转移载体质粒的构建鉴定结果 | 第42页 |
| ·重组病毒vLF-EG和vRF-EG的制备、纯化及PCR鉴定结果 | 第42-43页 |
| ·重组病毒的生物学特性鉴定 | 第43-48页 |
| ·重组病毒与亲本病毒的TCID_(50)比较结果 | 第43-46页 |
| ·重组病毒在BT细胞上的生长动力学 | 第46页 |
| ·重组病毒的遗传稳定性 | 第46-48页 |
| 第四章 讨论 | 第48-52页 |
| ·GTPV基因工程减毒疫苗的研究 | 第48页 |
| ·GTPV ORF5～ORF19和ORF149～ORF151区域的分子背景分析 | 第48-50页 |
| ·培养细胞的选择 | 第50页 |
| ·基因缺失重组毒株的鉴定 | 第50-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第61页 |
