| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 1 前言 | 第13-18页 |
| ·清道夫受体B 型Ⅰ类（Scavenger Receptor class B typeⅠ,SR-BⅠ）的研究进展 | 第13-14页 |
| ·SR-BⅠ的发现和组织分布 | 第13页 |
| ·SR-BⅠ的生物学功能 | 第13-14页 |
| ·抗冻蛋白与动物抗寒机制 | 第14-16页 |
| ·抗冻蛋白简介 | 第14-15页 |
| ·鱼类抗冻蛋白分类及其特性 | 第15-16页 |
| ·鱼类抗冻蛋白在水产行业和生物工程的应用前景 | 第16页 |
| ·研究的目的、意义 | 第16-18页 |
| ·研究目的 | 第16-17页 |
| ·研究意义 | 第17-18页 |
| 2 红笛鲷清道夫受体B 型Ⅰ类全长基因的克隆 | 第18-31页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·实验对象 | 第18页 |
| ·实验菌株和载体 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要溶液和试剂的配制 | 第18页 |
| ·主要实验仪器 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-25页 |
| ·RNA 的提取 | 第19页 |
| ·红笛鲷SR-BⅠ的RACE 克隆 | 第19-25页 |
| ·结果与分析 | 第25-29页 |
| ·红笛鲷部分组织总RNA 的提取 | 第25页 |
| ·cDNA 一链的合成 | 第25-26页 |
| ·红笛鲷SR-BⅠ基因的3’端及5’端片段的电泳结果 | 第26页 |
| ·红笛鲷SR-BⅠ基因序列分析 | 第26-27页 |
| ·红笛鲷SR-BⅠ基因的同源性分析及系统树的构建 | 第27-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 3 SR-BⅠ基因在红笛鲷表达差异研究 | 第31-38页 |
| ·实验仪器 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-33页 |
| ·溶藻弧菌的培养 | 第31页 |
| ·红笛鲷的暂养及样品采集 | 第31页 |
| ·Transzol 提取RNA 及cDNA 一链合成 | 第31页 |
| ·SR-BⅠ基因在红笛鲷不同组织中的表达情况 | 第31-32页 |
| ·SR-BⅠ基因在红笛鲷不同组织中的表达情况 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-36页 |
| ·红笛鲷SR-BⅠ基因在各个组织的时间表达差异 | 第33-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| 4 红笛鲷抗冻蛋白Ⅱ型全长基因的克隆 | 第38-43页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-39页 |
| ·RNA 的提取 | 第38页 |
| ·红笛鲷AFPⅡ的RACE 克隆 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-41页 |
| ·红笛鲷AFPⅡ基因的3’端及5’端片段的电泳结果 | 第39页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 5 红笛鲷AFPⅡ基因的原核表达 | 第43-50页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·载体和菌株 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·蛋白电泳所用溶液 | 第43页 |
| ·仪器 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·引物的设计 | 第44页 |
| ·红笛鲷AFPⅡ基因的ORF 扩增 | 第44页 |
| ·提取质粒DNA | 第44-45页 |
| ·PCR 产物酶切及质粒的酶切消化 | 第45页 |
| ·连接 | 第45-46页 |
| ·连接产物转入DH5α并筛选阳性克隆 | 第46页 |
| ·重组质粒转入表达菌BL21 | 第46页 |
| ·重组融合蛋白的诱导表达 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-48页 |
| ·AFPⅡ基因的合成及表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·重组红笛鲷AFPⅡ基因在大肠杆菌中的表达情况分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 6 AFPⅡ基因在红笛鲷表达差异研究 | 第50-52页 |
| ·实验仪器 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50页 |
| ·红笛鲷的暂养及样品采集 | 第50页 |
| ·Transzol 法提取总RNA 及cDNA 一链合成 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-51页 |
| ·红笛鲷AFPⅡ基因在不同组织的差异表达 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| 7 结论 | 第52-53页 |
| ·红笛鲷SR-BⅠ基因的克隆 | 第52页 |
| ·红笛鲷SR-BⅠ基因差异表达分析 | 第52页 |
| ·红笛鲷AFPⅡ基因的克隆 | 第52页 |
| ·红笛鲷AFPⅡ基因原核表达载体的构建 | 第52页 |
| ·红笛鲷AFPⅡ基因差异表达分析 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简历 | 第58-59页 |
| 导师简介 | 第59页 |
