摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
符号说明 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 禽流感概述 | 第12页 |
1.2 H9N2亚型禽流感 | 第12-13页 |
1.3 病原学 | 第13-14页 |
1.3.1 病毒体 | 第13页 |
1.3.2 禽流感病毒的基因组结构及其编码蛋白 | 第13-14页 |
1.4 禽流感病毒增殖特点 | 第14-15页 |
1.4.1 禽流感病毒的膜融合 | 第14页 |
1.4.2 禽流感病毒基因组转录与复制 | 第14-15页 |
1.5 禽流感病毒的致病力因素 | 第15-17页 |
1.5.1 血凝素(HA) | 第15页 |
1.5.2 神经氨酸酶(NA) | 第15-16页 |
1.5.3 核蛋白(NP) | 第16页 |
1.5.4 基质蛋白(MP) | 第16页 |
1.5.5 非结构蛋白(NS) | 第16-17页 |
1.5.6 聚合酶(PB1、PB2、PA) | 第17页 |
1.6 禽流感病毒的抵抗力 | 第17页 |
1.7 禽流感病毒的检测和防治 | 第17-18页 |
1.7.1 检测方法 | 第17-18页 |
1.7.2 防治方法 | 第18页 |
1.8 禽流感疫苗 | 第18-19页 |
1.8.1 全病毒灭活苗 | 第18页 |
1.8.2 亚单位疫苗 | 第18-19页 |
1.8.3 重组活载体疫苗 | 第19页 |
1.8.4 核酸疫苗 | 第19页 |
1.8.5 反义基因工程疫苗 | 第19页 |
1.9 本研究的目的与意义 | 第19-22页 |
第二章 H9N2亚型禽流感病毒基因序列分析 | 第22-60页 |
2.1 试验材料 | 第22-24页 |
2.1.1 病毒样本来源 | 第22-23页 |
2.1.2 阳性血清 | 第23页 |
2.1.3 实验动物和鸡胚 | 第23页 |
2.1.4 试剂和仪器 | 第23页 |
2.1.5 引物 | 第23-24页 |
2.2 试验方法 | 第24-28页 |
2.2.1 1%鸡红细胞的制备 | 第24页 |
2.2.2 4单位抗原制备 | 第24-25页 |
2.2.3 病毒的初步鉴定 | 第25页 |
2.2.4 病毒增殖与纯化 | 第25页 |
2.2.5 病毒RNA提取与反转录 | 第25-26页 |
2.2.6 聚合酶链式反应(PCR)退火温度的选择 | 第26页 |
2.2.7 目的片段的回收 | 第26页 |
2.2.8 感受态细胞的制备 | 第26页 |
2.2.9 载体连接与转化 | 第26-27页 |
2.2.10 提取质粒 | 第27页 |
2.2.11 序列拼接与比对 | 第27-28页 |
2.3 试验结果 | 第28-56页 |
2.3.1 血凝和血凝抑制试验结果 | 第28页 |
2.3.2 PCR退火温度的选择 | 第28页 |
2.3.3 HA基因序列分析 | 第28-33页 |
2.3.4 NA基因序列分析 | 第33-37页 |
2.3.5 MP基因序列分析 | 第37-40页 |
2.3.6 NP基因序列分析 | 第40-43页 |
2.3.7 NS基因序列分析 | 第43-46页 |
2.3.8 PB1基因序列分析 | 第46-49页 |
2.3.9 PB2基因序列分析 | 第49-53页 |
2.3.10 PA基因序列分析 | 第53-56页 |
2.3.11 H9N2亚型禽流感的基因分型结果 | 第56页 |
2.4 讨论 | 第56-60页 |
第三章 14株H9N2 AIV的交叉免疫保护作用 | 第60-68页 |
3.1 试验材料 | 第60-61页 |
3.1.1 病毒 | 第60页 |
3.1.2 H9N2血清 | 第60页 |
3.1.3 SPF鸡和SPF鸡胚 | 第60-61页 |
3.1.4 试剂和仪器 | 第61页 |
3.2 试验方法 | 第61-63页 |
3.2.1 灭活疫苗的制备 | 第61页 |
3.2.2 免疫血清的制备 | 第61页 |
3.2.3 交叉HI试验 | 第61-62页 |
3.2.4 代表株病毒的EID_(50) | 第62页 |
3.2.5 血凝素热稳定性测定 | 第62页 |
3.2.6 交叉免疫攻毒保护试验 | 第62页 |
3.2.7 排毒检测 | 第62-63页 |
3.3 试验结果 | 第63-65页 |
3.3.1 抗原性分析 | 第63页 |
3.3.2 HA效价和ELD_(50) | 第63-64页 |
3.3.3 血凝素热稳定性 | 第64-65页 |
3.3.4 交叉免疫攻毒保护结果 | 第65页 |
3.4 讨论 | 第65-68页 |
全文总结 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
致谢 | 第78-80页 |
附录 | 第80-87页 |