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2011-2012年江浙部分地区H9N2 AIV分子流行病学调查

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
符号说明第11-12页
第一章 文献综述第12-22页
    1.1 禽流感概述第12页
    1.2 H9N2亚型禽流感第12-13页
    1.3 病原学第13-14页
        1.3.1 病毒体第13页
        1.3.2 禽流感病毒的基因组结构及其编码蛋白第13-14页
    1.4 禽流感病毒增殖特点第14-15页
        1.4.1 禽流感病毒的膜融合第14页
        1.4.2 禽流感病毒基因组转录与复制第14-15页
    1.5 禽流感病毒的致病力因素第15-17页
        1.5.1 血凝素(HA)第15页
        1.5.2 神经氨酸酶(NA)第15-16页
        1.5.3 核蛋白(NP)第16页
        1.5.4 基质蛋白(MP)第16页
        1.5.5 非结构蛋白(NS)第16-17页
        1.5.6 聚合酶(PB1、PB2、PA)第17页
    1.6 禽流感病毒的抵抗力第17页
    1.7 禽流感病毒的检测和防治第17-18页
        1.7.1 检测方法第17-18页
        1.7.2 防治方法第18页
    1.8 禽流感疫苗第18-19页
        1.8.1 全病毒灭活苗第18页
        1.8.2 亚单位疫苗第18-19页
        1.8.3 重组活载体疫苗第19页
        1.8.4 核酸疫苗第19页
        1.8.5 反义基因工程疫苗第19页
    1.9 本研究的目的与意义第19-22页
第二章 H9N2亚型禽流感病毒基因序列分析第22-60页
    2.1 试验材料第22-24页
        2.1.1 病毒样本来源第22-23页
        2.1.2 阳性血清第23页
        2.1.3 实验动物和鸡胚第23页
        2.1.4 试剂和仪器第23页
        2.1.5 引物第23-24页
    2.2 试验方法第24-28页
        2.2.1 1%鸡红细胞的制备第24页
        2.2.2 4单位抗原制备第24-25页
        2.2.3 病毒的初步鉴定第25页
        2.2.4 病毒增殖与纯化第25页
        2.2.5 病毒RNA提取与反转录第25-26页
        2.2.6 聚合酶链式反应(PCR)退火温度的选择第26页
        2.2.7 目的片段的回收第26页
        2.2.8 感受态细胞的制备第26页
        2.2.9 载体连接与转化第26-27页
        2.2.10 提取质粒第27页
        2.2.11 序列拼接与比对第27-28页
    2.3 试验结果第28-56页
        2.3.1 血凝和血凝抑制试验结果第28页
        2.3.2 PCR退火温度的选择第28页
        2.3.3 HA基因序列分析第28-33页
        2.3.4 NA基因序列分析第33-37页
        2.3.5 MP基因序列分析第37-40页
        2.3.6 NP基因序列分析第40-43页
        2.3.7 NS基因序列分析第43-46页
        2.3.8 PB1基因序列分析第46-49页
        2.3.9 PB2基因序列分析第49-53页
        2.3.10 PA基因序列分析第53-56页
        2.3.11 H9N2亚型禽流感的基因分型结果第56页
    2.4 讨论第56-60页
第三章 14株H9N2 AIV的交叉免疫保护作用第60-68页
    3.1 试验材料第60-61页
        3.1.1 病毒第60页
        3.1.2 H9N2血清第60页
        3.1.3 SPF鸡和SPF鸡胚第60-61页
        3.1.4 试剂和仪器第61页
    3.2 试验方法第61-63页
        3.2.1 灭活疫苗的制备第61页
        3.2.2 免疫血清的制备第61页
        3.2.3 交叉HI试验第61-62页
        3.2.4 代表株病毒的EID_(50)第62页
        3.2.5 血凝素热稳定性测定第62页
        3.2.6 交叉免疫攻毒保护试验第62页
        3.2.7 排毒检测第62-63页
    3.3 试验结果第63-65页
        3.3.1 抗原性分析第63页
        3.3.2 HA效价和ELD_(50)第63-64页
        3.3.3 血凝素热稳定性第64-65页
        3.3.4 交叉免疫攻毒保护结果第65页
    3.4 讨论第65-68页
全文总结第68-70页
参考文献第70-78页
致谢第78-80页
附录第80-87页

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