| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-32页 |
| ·酶的固定化 | 第15-22页 |
| ·酶的固定化技术发展进程 | 第15-16页 |
| ·酶的固定化方法及研究进展 | 第16-21页 |
| ·酶的固定化载体及研究进展 | 第21-22页 |
| ·核酸适配体及其研究进展 | 第22-27页 |
| ·核酸适配体的筛选技术(SELEX) | 第23-25页 |
| ·核酸适配体的应用 | 第25-27页 |
| ·甘草酸及其衍生物 | 第27-31页 |
| ·甘草酸及其衍生物的性质及应用 | 第27-29页 |
| ·单葡萄糖醛酸基甘草次酸的制备 | 第29-31页 |
| ·本论文的主要研究内容及意义 | 第31-32页 |
| 第二章 材料和方法 | 第32-43页 |
| ·材料 | 第32-35页 |
| ·菌株及质粒 | 第32页 |
| ·药品和试剂 | 第32-33页 |
| ·主要溶液和培养基 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-43页 |
| ·菌株的培养 | 第35页 |
| ·重组蛋白PGUS-E的诱导表达、纯化 | 第35-36页 |
| ·蛋白质SDS-PAGE检测 | 第36页 |
| ·核酸文库的设计 | 第36-37页 |
| ·SELEX筛选 | 第37-39页 |
| ·核酸适配体的亲和力测定 | 第39-40页 |
| ·生物素修饰的aptamer与链霉素磁珠连接 | 第40页 |
| ·氨基修饰的aptamer与羧基修饰的磁珠共价连接 | 第40页 |
| ·氨基修饰的aptamer与羧基修饰的氧化石墨烯共价连接 | 第40-41页 |
| ·β-葡萄糖醛酸苷酶活力的测定 | 第41页 |
| ·利用Aptamer修饰的磁珠一步纯化固定化PGUS-E | 第41页 |
| ·Aptamer修饰的磁珠再生 | 第41-42页 |
| ·固定化PGUS-E用于甘草酸生物催化转化 | 第42-43页 |
| 第三章 β-葡萄糖醛酸苷酶的核酸适配体 | 第43-59页 |
| 引言 | 第43页 |
| ·PGUS-E的诱导表达、分离纯化 | 第43-46页 |
| ·SELEX筛选 | 第46-52页 |
| ·PGUS-E与Ni-NTA磁珠结合 | 第46页 |
| ·ssDNA扩增条件的优化 | 第46-48页 |
| ·dsDNA酶切制备ssDNA次级文库 | 第48-49页 |
| ·SELEX筛选结果 | 第49-52页 |
| ·Aptamer的表征 | 第52-57页 |
| ·Aptamer亲和力测定 | 第52-53页 |
| ·Aptamer的结构 | 第53-54页 |
| ·Aptamer对PGUS-E催化特性的影响 | 第54-57页 |
| ·小结 | 第57-59页 |
| 第四章 β-葡萄糖醛酸苷酶的一步纯化固定化 | 第59-80页 |
| 引言 | 第59页 |
| ·Aptamer与载体共价连接 | 第59-64页 |
| ·aptamer与氧化石墨烯共价连接及表征 | 第60-63页 |
| ·aptamer与羧基磁珠共价连接及表征 | 第63-64页 |
| ·PGUS-E的一步纯化固定化 | 第64-68页 |
| ·羧基磁珠活性位点的封闭 | 第64-65页 |
| ·离子强度对PGUS-E纯化、固定化的影响 | 第65-67页 |
| ·pH对PGUS-E纯化、固定化的影响 | 第67-68页 |
| ·PGUS-E的最大负载量 | 第68页 |
| ·Aptamer对PGUS-E的吸附行为研究 | 第68-73页 |
| ·Aptamer对PGUS-E的等温吸附模型研究 | 第68-71页 |
| ·Aptamer对PGUS-E的吸附动力学模型研究 | 第71-73页 |
| ·β-葡萄糖醛酸苷酶Aptamer的应用 | 第73-79页 |
| ·Aptamer一步纯化固定化PGUS-E用于催化转化甘草酸 | 第73-75页 |
| ·Aptamer用于比色法定量检测PGUS-E | 第75-77页 |
| ·Aptamer用于PGUS-E和PGUS的纯化 | 第77-79页 |
| ·小结 | 第79-80页 |
| 第五章 结论与展望 | 第80-82页 |
| ·结论 | 第80-81页 |
| ·创新点 | 第81页 |
| ·展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 作者简介 | 第91-92页 |
| 附件 | 第92页 |
