| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 符号说明 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1 禽致病性大肠杆菌的研究进展 | 第11-12页 |
| ·禽致病性大肠杆菌的流行病学 | 第11页 |
| ·禽致病性大肠杆菌的致病因子 | 第11-12页 |
| ·禽致病性大肠杆菌的防控措施 | 第12页 |
| 2 细菌密度感应系统的研究进展 | 第12-18页 |
| ·密度感应系统与细菌感染 | 第13页 |
| ·LuxS/AI-2型密度感应系统 | 第13-14页 |
| ·AI-2的合成途径和结构特征 | 第14-15页 |
| ·甲硫氨酸代谢通路 | 第15-18页 |
| 第二章 禽致病性大肠杆菌中不同甲硫氨酸代谢通路的体外活性验证 | 第18-29页 |
| 1 材料 | 第18-20页 |
| ·菌株及质粒 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·培养基 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| 2 方法 | 第20-23页 |
| ·PCR引物设计和产物回收 | 第20-21页 |
| ·pET28a-luxS,pET28a-pfs以及pET28a-sahH原核表达质粒的构建 | 第21-22页 |
| ·重组蛋白LuxS、Pfs和SahH诱导表达及SDS-PAGE分析 | 第22页 |
| ·重组蛋白LuxS、Pfs和SahH的纯化 | 第22页 |
| ·重组蛋白LuxS、Pfs与SahH的体外催化活性验证 | 第22-23页 |
| 3 结果 | 第23-28页 |
| ·原核表达质粒pET28a-luxS,pET28a-pfs以及pET28a-sahH的构建 | 第23-25页 |
| ·重组菌BL21(pET28a-luxS),BL21(pET28a-pfs)和BL21(pET28a-sahH)的鉴定和测序 | 第25-26页 |
| ·重组菌BL21(pET28a-luxS),BL21(pET28a-pfs)和BL21(pET28a-sahH)诱导、表达和可溶性分析 | 第26-27页 |
| ·HCY测定标准曲线 | 第27页 |
| ·LuxS/Pfs和SahH的酶活测定结果 | 第27-28页 |
| 4 讨论 | 第28-29页 |
| 第三章 禽致病性大肠杆菌不同甲硫氨酸循环通路的构建 | 第29-43页 |
| 1 材料 | 第29-30页 |
| ·主要菌株 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·培养基 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-37页 |
| ·禽致病性大肠杆菌DE17△pfs基因缺失株的构建 | 第30-33页 |
| ·APEC不同甲硫氨酸循环通路的构建 | 第33-36页 |
| ·AI-2的活性检测 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-42页 |
| ·pfs基因打靶片段的构建 | 第37-38页 |
| ·pfs基因缺失鉴定 | 第38-39页 |
| ·回复载体pSTV28-sahH的构建 | 第39-40页 |
| ·sahH基因的转录水平检测结果 | 第40-41页 |
| ·AI-2的活性检测结果 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 不同甲硫氨酸代谢通路通路对禽致病性大肠杆菌致病性的影响 | 第43-53页 |
| 1 材料 | 第44-45页 |
| ·主要菌株及细胞 | 第44页 |
| ·实验动物 | 第44页 |
| ·主要试剂和培养基 | 第44-45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| 2 方法 | 第45-47页 |
| ·菌株的培养条件 | 第45页 |
| ·生长曲线测定 | 第45页 |
| ·半数致死量(LD_(50))测定 | 第45-46页 |
| ·体内分布实验 | 第46页 |
| ·黏附与侵袭实验 | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-51页 |
| ·生长曲线测定结果 | 第47-48页 |
| ·半数致死量测定结果 | 第48-49页 |
| ·体内分布结果 | 第49-50页 |
| ·黏附与侵袭结果 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 全文总结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-65页 |
