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棉花纤维中DELLA互作蛋白的鉴定和功能分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 文献综述第11-15页
   ·棉花纤维的生长发育受多种途径的网络调控第11-12页
   ·赤霉素(GA)调控棉花纤维生长发育第12页
   ·DELLA蛋白调控下游基因表达的机制第12-15页
第二章 引言第15-17页
   ·立论依据及研究目的第15-16页
   ·技术路线第16-17页
第三章 材料与方法第17-33页
   ·材料第17-25页
     ·植物材料第17页
     ·宿主菌株与载体质粒第17页
     ·主要仪器第17页
     ·主要化学试剂第17-18页
     ·主要溶液及配方第18页
     ·主要培养基及配方第18-19页
     ·试验所用引物第19-23页
     ·试验中各基因、蛋白质和启动子的ID及数据来源第23-25页
   ·方法第25-33页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备及转化第25页
     ·农杆菌感受态细胞制备及转化第25-26页
     ·酵母菌感受态细胞的制备及其转化第26页
     ·棉花纤维c DNA文库的构建和杂交筛选第26-28页
     ·质粒提取第28-29页
     ·DNA片段回收第29页
     ·DELLA和Gh EIN3蛋白的系统进化分析第29页
     ·酵母双杂交载体构建第29-30页
     ·烟草瞬时表达载体构建第30页
     ·双荧光素酶检测系统第30-31页
     ·农杆菌介导烟草叶片下表皮细胞瞬时表达第31-32页
     ·RT-PCR分析第32页
     ·胚珠培养第32-33页
第四章 结果与分析第33-59页
   ·诱饵载体构建和筛选第33-35页
   ·陆地棉纤维中DELLA与Gh EIN3互作的全面分析第35-52页
     ·陆地棉纤维中Gh EIN3的全面鉴定第35-40页
     ·Gh EIN3s表达分析第40-42页
     ·Gh EIN3s对乙烯信号响应第42-43页
     ·DELLA与Gh EIN3的互作分析第43-46页
     ·DELLA-Gh EIN3-1A互作对Gh EIN3-1A下游基因的影响第46-50页
     ·DELLA-Gh EIN3-1A互作对DELLA下游基因的影响第50-52页
   ·DELLA未知互作蛋白的筛选第52-56页
     ·文库构建第52-53页
     ·杂交筛选第53-54页
     ·共转化验证第54-56页
   ·互作蛋白对DELLA下游基因的影响第56-59页
第五章 讨论第59-61页
   ·在纤维生长发育过程中GA和ET的平衡作用第59页
   ·GA-DELLA-EIN3-1A在纤维生长发育过程中的作用第59页
   ·锌指蛋白FYVE-D和Zin CX8-D功能分析第59-60页
   ·酵母双杂交系统分析第60-61页
第六章 结论第61-63页
参考文献第63-69页
附录第69-79页
 附录1 缩略词表第69-70页
 附录2 克隆获得的Gh GAIs氨基酸序列比对第70-71页
 附录3 Gh GAI1D从10天和20天文库中筛选到的非重复克隆第71-77页
 附录4 文库筛选克隆的简单分类第77-78页
 附录5 攻读硕士学位期间发表论文及摘要情况第78-79页
致谢第79页

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