摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-15页 |
·棉花纤维的生长发育受多种途径的网络调控 | 第11-12页 |
·赤霉素(GA)调控棉花纤维生长发育 | 第12页 |
·DELLA蛋白调控下游基因表达的机制 | 第12-15页 |
第二章 引言 | 第15-17页 |
·立论依据及研究目的 | 第15-16页 |
·技术路线 | 第16-17页 |
第三章 材料与方法 | 第17-33页 |
·材料 | 第17-25页 |
·植物材料 | 第17页 |
·宿主菌株与载体质粒 | 第17页 |
·主要仪器 | 第17页 |
·主要化学试剂 | 第17-18页 |
·主要溶液及配方 | 第18页 |
·主要培养基及配方 | 第18-19页 |
·试验所用引物 | 第19-23页 |
·试验中各基因、蛋白质和启动子的ID及数据来源 | 第23-25页 |
·方法 | 第25-33页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备及转化 | 第25页 |
·农杆菌感受态细胞制备及转化 | 第25-26页 |
·酵母菌感受态细胞的制备及其转化 | 第26页 |
·棉花纤维c DNA文库的构建和杂交筛选 | 第26-28页 |
·质粒提取 | 第28-29页 |
·DNA片段回收 | 第29页 |
·DELLA和Gh EIN3蛋白的系统进化分析 | 第29页 |
·酵母双杂交载体构建 | 第29-30页 |
·烟草瞬时表达载体构建 | 第30页 |
·双荧光素酶检测系统 | 第30-31页 |
·农杆菌介导烟草叶片下表皮细胞瞬时表达 | 第31-32页 |
·RT-PCR分析 | 第32页 |
·胚珠培养 | 第32-33页 |
第四章 结果与分析 | 第33-59页 |
·诱饵载体构建和筛选 | 第33-35页 |
·陆地棉纤维中DELLA与Gh EIN3互作的全面分析 | 第35-52页 |
·陆地棉纤维中Gh EIN3的全面鉴定 | 第35-40页 |
·Gh EIN3s表达分析 | 第40-42页 |
·Gh EIN3s对乙烯信号响应 | 第42-43页 |
·DELLA与Gh EIN3的互作分析 | 第43-46页 |
·DELLA-Gh EIN3-1A互作对Gh EIN3-1A下游基因的影响 | 第46-50页 |
·DELLA-Gh EIN3-1A互作对DELLA下游基因的影响 | 第50-52页 |
·DELLA未知互作蛋白的筛选 | 第52-56页 |
·文库构建 | 第52-53页 |
·杂交筛选 | 第53-54页 |
·共转化验证 | 第54-56页 |
·互作蛋白对DELLA下游基因的影响 | 第56-59页 |
第五章 讨论 | 第59-61页 |
·在纤维生长发育过程中GA和ET的平衡作用 | 第59页 |
·GA-DELLA-EIN3-1A在纤维生长发育过程中的作用 | 第59页 |
·锌指蛋白FYVE-D和Zin CX8-D功能分析 | 第59-60页 |
·酵母双杂交系统分析 | 第60-61页 |
第六章 结论 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
附录 | 第69-79页 |
附录1 缩略词表 | 第69-70页 |
附录2 克隆获得的Gh GAIs氨基酸序列比对 | 第70-71页 |
附录3 Gh GAI1D从10天和20天文库中筛选到的非重复克隆 | 第71-77页 |
附录4 文库筛选克隆的简单分类 | 第77-78页 |
附录5 攻读硕士学位期间发表论文及摘要情况 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |