| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-27页 |
| ·微RNA病毒 | 第12-15页 |
| ·病毒分类 | 第12页 |
| ·基因组结构 | 第12-13页 |
| ·2A蛋白 | 第13-14页 |
| ·内部核糖体进入位点 | 第14页 |
| ·禽类微RNA病毒 | 第14-15页 |
| ·小双节RNA病毒 | 第15-19页 |
| ·病毒发现的历史概述 | 第15-16页 |
| ·PBV的分类 | 第16-17页 |
| ·PBV的基因组结构 | 第17页 |
| ·PBV的基因分型 | 第17-18页 |
| ·PBV的致病性 | 第18-19页 |
| ·Posavirus及相关病毒 | 第19-20页 |
| ·Posavirus | 第19-20页 |
| ·Fisavirus | 第20页 |
| ·星状病毒 | 第20-24页 |
| ·病毒发现的历史概述 | 第20-21页 |
| ·病毒分类 | 第21-22页 |
| ·星状病毒的基因组结构 | 第22页 |
| ·星状病毒对禽类的致病性 | 第22-23页 |
| ·星状病毒的诊断技术 | 第23-24页 |
| ·星状病毒的反向遗传操作技术 | 第24页 |
| ·近20年来鸭新发病毒病的流行概况 | 第24-25页 |
| ·研究目的和意义 | 第25-27页 |
| 第二章 鸭源新病毒的分子检测 | 第27-39页 |
| 摘要 | 第27页 |
| ·前言 | 第27页 |
| ·材料 | 第27-29页 |
| ·临床样品 | 第27-28页 |
| ·主要试剂盒试剂盒 | 第28页 |
| ·主要试剂配制 | 第28-29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-32页 |
| ·样品处理 | 第29页 |
| ·RNA提取 | 第29-31页 |
| ·RT-PCR | 第31页 |
| ·PCR产物的回收和克隆 | 第31页 |
| ·PCR鉴定和测序 | 第31页 |
| ·序列分析 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-37页 |
| ·RT-PCR检测 | 第32-33页 |
| ·PCR扩增产物测序与序列分析 | 第33页 |
| ·鸭源PBV的序列分析 | 第33页 |
| ·鸭源微RNA病毒的序列分析 | 第33-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| ·关于样品来源和所选检测方法 | 第37-38页 |
| ·关于鸭源新病毒 | 第38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 第三章 鸭源新微RNA病毒的分子鉴定 | 第39-58页 |
| 摘要 | 第39页 |
| ·前言 | 第39-40页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·临床样品 | 第40页 |
| ·鸭胚和SPF鸡胚 | 第40页 |
| ·主要试剂、试剂盒和仪器设备 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-43页 |
| ·病毒分离 | 第40页 |
| ·基因组测序 | 第40-42页 |
| ·序列分析 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-55页 |
| ·病毒培养 | 第43页 |
| ·基因组测序 | 第43-44页 |
| ·基因组结构分析 | 第44页 |
| ·同源性分析和进化分析 | 第44-50页 |
| ·聚蛋白裂解位点预测 | 第50-51页 |
| ·蛋白质基序分析 | 第51-53页 |
| ·IRES二级结构预测 | 第53-55页 |
| ·3'UTR二级结构预测 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| ·鸭源微RNA病毒的基因组结构特点 | 第55-56页 |
| ·鸭源微RNA病毒非编码区的二级结构 | 第56-57页 |
| ·鸭源微RNA病毒的分类地位 | 第57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第四章 鸭源小双节RNA病毒的分子检测与鉴定 | 第58-72页 |
| 摘要 | 第58页 |
| ·前言 | 第58页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·临床样品 | 第58-59页 |
| ·鸭胚 | 第59页 |
| ·主要试剂、试剂盒和仪器设备 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-62页 |
| ·样品处理和RNA提取 | 第59页 |
| ·RT-PCR检测 | 第59页 |
| ·病毒分离和培养 | 第59-61页 |
| ·DuPBV 4-17株基因组测序 | 第61-62页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第62页 |
| ·序列分析 | 第62页 |
| ·结果 | 第62-68页 |
| ·分子检测 | 第63-65页 |
| ·DuPBV的变异性分析 | 第65页 |
| ·病毒培养 | 第65页 |
| ·SDS-PAGE | 第65页 |
| ·基因组测序 | 第65-67页 |
| ·基因组结构分析 | 第67-68页 |
| ·衣壳蛋白和RNA聚合酶的同源性分析和进化分析 | 第68页 |
| ·讨论 | 第68-71页 |
| ·DuPBV的基因组结构 | 第68页 |
| ·DuPBV的分类 | 第68-70页 |
| ·蛋鸭群中DuPBV的感染和变异 | 第70-71页 |
| ·关于Posavirus样病毒的发现 | 第71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第五章 鸭源Posavirus样病毒的分子鉴定 | 第72-80页 |
| 摘要 | 第72页 |
| ·前言 | 第72页 |
| ·材料 | 第72-73页 |
| ·毒株 | 第72页 |
| ·鸭胚 | 第72-73页 |
| ·主要试剂、试剂盒和仪器设备 | 第73页 |
| ·方法 | 第73-74页 |
| ·病毒分离 | 第73页 |
| ·基因组测序 | 第73-74页 |
| ·序列分析 | 第74页 |
| ·结果 | 第74-77页 |
| ·病毒分离 | 第75页 |
| ·基因组测序 | 第75页 |
| ·基因组结构分析 | 第75-77页 |
| ·同源性分析和进化分析 | 第77页 |
| ·讨论 | 第77-79页 |
| ·鸭源Posavirus样病毒4-23株的基因组结构特点 | 第77-79页 |
| ·鸭源Posavirus样病毒4-23株的分类地位 | 第79页 |
| ·小结 | 第79-80页 |
| 第六章 导致成年麻鸭发生DVH的DAstV-1的生物学特性研究 | 第80-112页 |
| 摘要 | 第80页 |
| ·前言 | 第80-81页 |
| ·材料 | 第81-82页 |
| ·临床样品 | 第81-82页 |
| ·血清、细胞、SPF鸡胚、鸭胚和实验动物 | 第82页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第82页 |
| ·方法 | 第82-89页 |
| ·核酸提取 | 第84页 |
| ·反转录 | 第84页 |
| ·PCR | 第84页 |
| ·PCR产物的回收 | 第84页 |
| ·连接和转化 | 第84-85页 |
| ·PCR鉴定及测序 | 第85-86页 |
| ·基因组序列测定 | 第86页 |
| ·序列分析 | 第86页 |
| ·病毒的分离和培养 | 第86-87页 |
| ·自然病例的组织病理学检查 | 第87页 |
| ·免疫组织化学试验 | 第87-88页 |
| ·感染鸭群排毒期的监测 | 第88页 |
| ·组织分布检测 | 第88页 |
| ·感染试验 | 第88-89页 |
| ·结果 | 第89-107页 |
| ·流行病学特点和临床症状 | 第89-90页 |
| ·自然病例的大体病变 | 第90页 |
| ·自然病例的组织病理学变化 | 第90-97页 |
| ·病原的分子鉴定 | 第97-99页 |
| ·病毒的分离和培养 | 第99-101页 |
| ·自然病例的免疫组织化学 | 第101-102页 |
| ·DAstV-1排毒期的监测 | 第102页 |
| ·致病性试验 | 第102-104页 |
| ·DAstV-1的组织分布检测 | 第104-105页 |
| ·DAstV-1基因组结构和序列分析 | 第105-107页 |
| ·讨论 | 第107-111页 |
| ·关于DAstV-1所引起的DVH | 第107-108页 |
| ·关于病原的分离和鉴定 | 第108-110页 |
| ·关于DAstV-1的感染和传播途径 | 第110-111页 |
| ·小结 | 第111-112页 |
| 第七章 DAstV-1的反向遗传操作技术初探 | 第112-120页 |
| 摘要 | 第112页 |
| ·前言 | 第112页 |
| ·材料 | 第112-113页 |
| ·病毒、细胞、载体和血清 | 第112页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第112-113页 |
| ·方法 | 第113-117页 |
| ·基因组分段扩增 | 第113-114页 |
| ·中间质粒的构建 | 第114页 |
| ·中间质粒的同义突变 | 第114页 |
| ·DAstV-1 D17株全长质粒的连接 | 第114-115页 |
| ·DAstV-1 D17株全长质粒的测序 | 第115页 |
| ·全长质粒的线化和纯化 | 第115页 |
| ·体外转录与RNA纯化 | 第115-116页 |
| ·细胞转染 | 第116页 |
| ·免疫荧光检测和RT-PCR检测 | 第116-117页 |
| ·结果 | 第117-119页 |
| ·DAstV-1 D17株全基因组的扩增 | 第117页 |
| ·全长质粒pWSK-D17的酶切鉴定 | 第117-118页 |
| ·pWSK-D17的测序结果 | 第118页 |
| ·免疫荧光检测结果 | 第118页 |
| ·DAstV-1 RT-PCR检测结果 | 第118-119页 |
| ·讨论 | 第119页 |
| ·DAstV-1感染性克隆的构建 | 第119页 |
| ·关于DAstV-1拯救病毒的繁殖 | 第119页 |
| ·小结 | 第119-120页 |
| 第八章 结论 | 第120-121页 |
| 第九章 创新点 | 第121-122页 |
| 参考文献 | 第122-140页 |
| 致谢 | 第140-142页 |
| 个人简介 | 第142页 |
