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基于线粒体COI基因蚊类库蚊DNA条形码技术研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 前言第11-17页
   ·绪论第11-12页
     ·库蚊属的分类地位第11页
     ·库蚊属生物学习性及医学重要性第11-12页
   ·库蚊属研究概况第12-13页
     ·形态分类学研究概况第12页
     ·分子分类学研究概况第12-13页
   ·线粒体基因组及COI基因在分子系统学中的应用第13-15页
     ·动物线粒体基因组特点第13-14页
     ·线粒体基因及COI在系统发育中的应用第14-15页
   ·DNA条形码技术第15-16页
     ·DNA条形码的概念第15页
     ·DNA条形码的优越性第15-16页
   ·本研究的目的和意义第16-17页
     ·建立快速有效的蚊种鉴定方法第16页
     ·分析库蚊属中蚊种的系统亲缘关系第16-17页
第二章 材料与方法第17-25页
 1 材料第17页
   ·供试蚊虫第17页
   ·实验试剂第17页
   ·实验器材第17页
 2 方法第17-25页
   ·蚊虫野外采集第17页
   ·蚊虫鉴定第17-18页
     ·蚊虫幼虫标本制作第18页
     ·成蚊针插标本制作第18页
     ·雄蚊尾器标本制作第18页
   ·蚊虫基因组DNA提取第18-20页
     ·经典法提取基因组DNA第18-19页
     ·试剂盒提取基因组DNA第19页
     ·基因组DNA的检测第19-20页
   ·COI基因的制备及检测第20-21页
     ·COI基因片段的扩增第20-21页
     ·PCR产物的回收第21页
   ·分子克隆第21-23页
     ·配制所需试剂第21-22页
     ·pGM-T vector连接反应的建立第22页
     ·重组质粒转化第22页
     ·阳性克隆挑选与检测第22-23页
     ·目的片段测序第23页
   ·序列数据分析第23页
   ·系统发育分析第23-25页
     ·外群第23页
     ·系统发育树的构建第23-25页
第三章 结果与分析第25-45页
 1 形态分类研究第25-27页
   ·标本鉴定统计第25-26页
   ·标本地理分布分析第26-27页
 2 蚊虫总DNA提取、目的片段扩增及其产物回收测定第27-28页
   ·蚊虫DNA提取第27-28页
   ·PCR扩增结果第28页
   ·PCR产物回收测定第28页
 3 pGM-T重组菌落PCR鉴定结果第28-29页
 4 COI基因序列分析第29-37页
   ·序列编辑校对第29-33页
   ·库蚊COI基因的序列分析第33-35页
     ·序列基本特征第33页
     ·库蚊COI序列变异分析及碱基组成第33-35页
   ·COI序列密码子使用频率与氨基酸组成分析第35-36页
   ·库蚊COI基因序列遗传距离分析第36页
   ·碱基替换饱和性分析第36-37页
 5 COI作为条形码基因分析第37-38页
 6 分子系统树分析第38-45页
   ·分子分类研究第38-42页
   ·系统发生研究第42-45页
第四章 讨论第45-49页
 1 形态分类研究讨论第45页
 2 分子分类研究讨论第45-46页
 3 DNA条形码研究讨论第46-47页
 4 系统发生研究讨论第47-49页
第五章 总结第49-51页
参考文献第51-57页
致谢第57页

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