谷胱甘肽过氧化物酶-5在绵羊附睾的表达
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-11页 |
| 1 引言 | 第11-17页 |
| ·附睾的概述 | 第11-12页 |
| ·ROS的作用 | 第12-13页 |
| ·关于GPXs的研究 | 第13-16页 |
| ·GPX1 | 第14页 |
| ·GPX2 | 第14页 |
| ·GPX3 | 第14页 |
| ·GPX4 | 第14-15页 |
| ·GPX5 | 第15-16页 |
| ·GPX6,GPX7,GPX8 | 第16页 |
| ·本实验的研究目的和意义 | 第16页 |
| ·技术路线 | 第16-17页 |
| 2 GPX5基因在绵羊附睾中的表达 | 第17-24页 |
| ·试验材料 | 第17页 |
| ·试验取材 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-21页 |
| ·附睾,睾丸和输精管的采集 | 第17-18页 |
| ·RNA酶处理 | 第18页 |
| ·总RNA提取 | 第18-19页 |
| ·总RNA反转录合成cDNA | 第19页 |
| ·实时荧光定量PCR引物设计以及合成 | 第19-20页 |
| ·引物溶解及稀释 | 第20页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第20-21页 |
| ·数据分析 | 第21页 |
| ·结果 | 第21-24页 |
| ·组织总RNA的电泳检测 | 第21-22页 |
| ·GPX5和-actin基因的RT-qPCR | 第22页 |
| ·RT-qPCR产物特异性检测 | 第22-23页 |
| ·GPX5基因在绵羊附睾不同部位和睾丸的转录量 | 第23-24页 |
| 3 GPX5蛋白在绵羊附睾不同部位和睾丸的表达 | 第24-32页 |
| ·试验材料 | 第24-27页 |
| ·试验组织 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要实验溶液的配制 | 第25-27页 |
| ·实验方法 | 第27-30页 |
| ·提取组织总蛋白 | 第27-28页 |
| ·BCA法测总蛋白浓度 | 第28页 |
| ·蛋白变性 | 第28页 |
| ·western blot | 第28-30页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第28-29页 |
| ·转膜 | 第29-30页 |
| ·Western blot印迹杂交 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-32页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第30-31页 |
| ·western blot结果 | 第31-32页 |
| ·GPX5蛋白 | 第31页 |
| ·GPX5在不同年龄绵羊附睾和睾丸中的表达 | 第31-32页 |
| 4 免疫组化 | 第32-37页 |
| ·试验材料 | 第32页 |
| ·试验仪器 | 第32页 |
| ·试验试剂 | 第32-33页 |
| ·试验试剂配制 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-34页 |
| ·石蜡切片 | 第33-34页 |
| ·免疫组化实验方法 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-37页 |
| ·GPX5在不同年龄绵羊附睾的表达 | 第34-37页 |
| 5 讨论 | 第37-41页 |
| ·Western blot实验过程的讨论 | 第37页 |
| ·免疫组化实验方法的讨论 | 第37-38页 |
| ·GPX5基因在不同年龄绵羊附睾的表达 | 第38-39页 |
| ·Western Blot实验结果讨论 | 第39-40页 |
| ·GPX5在附睾中的分布 | 第40-41页 |
| 6 结论 | 第41页 |
| 7 展望 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 作者简介 | 第47页 |
