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致病疫霉Pi-PIPK-D8功能的研究与分析

摘要第1-4页
Abstract第4-11页
1 前言第11-17页
   ·疫霉菌概述第11页
   ·疫霉菌的主要菌种第11-12页
   ·疫霉菌的生长发育第12-13页
     ·疫霉菌的无性生殖第12页
     ·疫霉菌的有性生殖第12-13页
   ·疫霉菌的致病机理第13-14页
   ·GPCR概述第14-15页
   ·基因功能的研究方法第15-17页
     ·荧光标签与蛋白质亚细胞定位第15页
     ·RNA干扰检测基因的功能第15-16页
     ·实时定量PCR技术检测基因表达第16-17页
   ·本研究目的与意义第17页
   ·实验流程图第17页
2 材料与方法第17-42页
   ·实验材料第17-24页
     ·实验菌株第17-18页
     ·实验载体第18页
     ·实验仪器第18页
     ·实验药品与试剂盒第18-19页
     ·实验溶液第19-23页
     ·实验培养基第23-24页
     ·实验所用引物第24页
     ·实验软件第24页
   ·实验方法第24-42页
     ·致病疫霉遗传转化体系的建立第24-32页
     ·致病疫霉Pi-PIPE-D8 cDNA克隆及序列分析第32-36页
     ·致病疫霉Pi-PIPK-D8在不同发育阶段表达量的分析第36-37页
     ·致病疫霉Pi-PIPK-D8细胞定位第37-41页
     ·致病疫霉Pi-PIPK-D8功能分析第41-42页
3 结果与分析第42-58页
   ·致病疫霉转化体系的建立第42-44页
   ·致病疫霉Pi-PIPK-D8 cDNA克隆及序列分析第44-46页
     ·Pi-PIPK-D8 cDNA蛋白编码区的PCR扩增第44-45页
     ·重组质粒pMD19-PIPKD8的鉴定第45页
     ·致病疫霉菌株HQK8-3 Pi-PIPK-D8 cDNA蛋白编码区序列分析第45-46页
   ·致病疫霉Pi-PIPK-D8在不同发育阶段相对表达量的分析第46-47页
   ·致病疫霉Pi-PIPK-D8蛋白的亚细胞定位第47-52页
     ·致病疫霉Pi-PIPK-D8荧光蛋白融合表达载体的构建第47-50页
     ·荧光蛋白融合表达载体转化子的鉴定第50-51页
     ·荧光蛋白融合表达载体转化子的荧光显微观察第51-52页
   ·致病疫霉Pi-PIPK-D8功能分析第52-58页
     ·Pi-PIPK-D8干扰载体转化子的鉴定第52-53页
     ·单克隆Pi-PIPK-D8的相对表达量分析第53-54页
     ·不同表达量的单克隆显微结构的观察和有性生殖的检测第54-58页
4 讨论与结论第58-61页
   ·讨论第58-60页
     ·致病疫霉遗传转化体系的建立第58-59页
     ·致病疫霉Pi-PIPK-D8功能分析第59-60页
   ·结论第60-61页
致谢第61-62页
参考文献第62-69页
附录第69-74页
作者简介第74页

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