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拟南芥转录因子RAV1负调控ABA信号转导的机制研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-6页
目录第6-9页
英文缩写表第9-11页
第一章 引言第11-30页
   ·ABA的结构和生理功能第11页
   ·ABA的代谢第11-13页
     ·ABA的合成第11-13页
     ·ABA的降解和失活第13页
   ·ABA信号转导过程第13-27页
     ·ABA受体的研究第14-18页
     ·蛋白磷酸酶PP2Cs的研究第18-19页
     ·蛋白激酶SnRK2s的研究第19-21页
     ·ABA信号转导过程中的转录调控第21-27页
   ·转录因子RAV1的研究第27-29页
   ·本论文研究的目的和意义第29-30页
第二章 实验材料与方法第30-54页
   ·实验材料第30-31页
     ·拟南芥材料第30页
     ·常用菌株第30页
     ·克隆载体第30页
     ·酶、试剂盒及各种化学药品第30-31页
   ·实验仪器第31页
   ·实验试剂的配制第31-37页
     ·培养基配置第31-32页
     ·溶液配制第32-37页
   ·实验方法第37-51页
     ·拟南芥的培养第37-38页
     ·常用分子生物学实验方法第38-41页
     ·拟南芥转基因植株的筛选第41-42页
     ·GUS染色分析第42页
     ·烟草系统检测转录因子对下游基因的调控第42-43页
     ·基因转录水平表达分析第43-46页
     ·多克隆抗体制备第46-48页
     ·染色质免疫共沉淀实验(ChIP)第48-49页
     ·植物基因组DNA提取方法(SDS法)第49页
     ·凝胶阻滞实验(EMSA)第49-51页
   ·实验中所用的引物第51-54页
     ·实时定量PCR所用的引物第51-52页
     ·RT-PCR所用的引物第52页
     ·构建转基因植物材料所用的引物第52-53页
     ·ChIP实验和EMSA实验所用的引物第53页
     ·突变体鉴定所用的引物第53页
     ·原核表达蛋白所用的引物第53-54页
第三章 实验结果与分析第54-87页
   ·RAV1是ABA信号转导过程中的负向调控因子第54-63页
     ·RAV1在种子萌发和早期幼苗生长过程中的表达情况第54-55页
     ·外源ABA抑制RAV1的表达第55-56页
     ·RAV1过表达材料和RAV1-U在外源ABA处理下的萌发表型检测第56-60页
     ·RAV1过表达材料和RAV1-U在高盐和高渗胁迫下的萌发表型检测第60-62页
     ·RAV1负调控一系列ABA响应基因的表达第62-63页
   ·RAV1通过直接调控ABI5参与ABA信号转导过程第63-72页
     ·RAV1能够抑制ABI5的表达第63-65页
     ·RAV1能够直接与ABI5的启动子结合第65-68页
     ·ABI5基因位于RAV1基因的遗传上位第68-72页
   ·RAV1直接调控ABI3和ABI4的表达第72-74页
   ·RAV1还可能直接调控其它基因的表达第74-78页
     ·RAV1其它靶基因的寻找第74-76页
     ·RAV1直接与4个候选靶基因的启动子结合第76-77页
     ·4个候选靶基因功能的初步探索第77-78页
   ·SnRK2.2、SnRK2.3和SnRK2.6通过磷酸化作用负调控RAV1第78-81页
     ·SnRK2.2、SnRK2.3和SnRK2.6可能是RAV1的上游调控因子第78-80页
     ·SnRK2.2、SnRK2.3和SnRK2.6能够解除RAV1对ABI5的抑制第80-81页
   ·转录因子WRKY6可能是RAV1的上游调控因子第81-87页
     ·WRKY6在种子萌发和早期幼苗生长过程中的表达情况第82页
     ·WRKY6过表达材料和wrky6突变体在ABA处理下的萌发表型检测第82-84页
     ·WRKY6可能直接抑制RAV1的表达第84-86页
     ·RAV1基因可能位于WRKY6基因的遗传上位第86-87页
第四章 讨论与结论第87-98页
   ·RAV1在种子萌发和早期幼苗生长过程中负调控ABA信号转导过程第87-90页
     ·RAV1表达量的改变影响了植株对ABA的敏感性第87-88页
     ·RAV1过表达材料和RAV1-U在不同浓度ABA处理下分别表现出ABA不敏感和超敏感表型第88-89页
     ·RAV1过表达材料和RAV1-U在萌发后幼苗生长过程中分别表现出ABA不敏感和超敏感表型第89-90页
     ·RAV1负调控一系列ABA响应基因的表达第90页
   ·RAV1直接调控多个ABA响应基因的表达第90-92页
   ·RAV1受到转录水平和翻译后水平的双重调控第92-95页
     ·RAV1的转录水平调控第92-93页
     ·SnRK2.2、SnRK2.3和SnRK2.6通过磷酸化调控RAV1第93-95页
   ·结论第95-98页
参考文献第98-111页
致谢第111-112页
个人简历第112页

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