| 本研究工作的主要创新点 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 目录 | 第11-14页 |
| 1 引言 | 第14-34页 |
| ·斑马鱼是遗传学和发育生物学研究理想的动物模型 | 第14-15页 |
| ·生命科学研究中的动物模型 | 第14-15页 |
| ·斑马鱼的基本特征及作为模式生物的优点 | 第15页 |
| ·斑马鱼胚胎的发育时期 | 第15-20页 |
| ·斑马鱼性腺的发育 | 第20-24页 |
| ·斑马鱼卵巢的发育 | 第21-23页 |
| ·斑马鱼精巢的发育 | 第23-24页 |
| ·原始生殖细胞的发生 | 第24-28页 |
| ·原始生殖细胞的形成 | 第25-26页 |
| ·原始生殖细胞的迁移 | 第26-28页 |
| ·原始生殖细胞的增殖 | 第28页 |
| ·碳酸酐酶家族概述 | 第28-29页 |
| ·同源异型盒基因及nanog基因简介 | 第29-33页 |
| ·同源异型盒基因的发现 | 第29-30页 |
| ·同源异型盒基因的特征 | 第30-31页 |
| ·同源异型盒基因的分类 | 第31页 |
| ·同源异型盒基因的功能 | 第31-32页 |
| ·同源异型盒基因nanog | 第32-33页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 2 斑马鱼CA15b oDNA的克隆与表达研究 | 第34-64页 |
| ·前言 | 第34-35页 |
| ·实验材料 | 第35-39页 |
| ·实验动物 | 第35页 |
| ·质粒与菌株 | 第35页 |
| ·相关引物 | 第35页 |
| ·主要试剂、试剂盒及酶系统 | 第35-36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·生物信息学分析软件和在线分析工具网址 | 第36-37页 |
| ·常用试剂配方 | 第37-39页 |
| ·实验方法 | 第39-50页 |
| ·总RNA的提取及cDNA模板的制备 | 第39-40页 |
| ·目的片段的扩增与回收 | 第40-41页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第41-42页 |
| ·目的片段的连接和转化 | 第42页 |
| ·重组克隆的鉴定及序列测定 | 第42-43页 |
| ·cDNA末端快速扩增(RACE)法获取全长cDNA序列 | 第43-46页 |
| ·体外转录目的基因RNA探针 | 第46-47页 |
| ·组织切片原位杂交 | 第47-48页 |
| ·整体胚胎原位杂交 | 第48-49页 |
| ·免疫组织化学 | 第49-50页 |
| ·结果 | 第50-60页 |
| ·斑马鱼CA15b基因全长cDNA序列的克隆 | 第50-52页 |
| ·斑马鱼CA15b基因序列分析 | 第52-57页 |
| ·CA15b mRNA在斑马鱼不同组织中的表达 | 第57-58页 |
| ·CA15b mRNA在斑马鱼早期胚胎中的表达 | 第58-60页 |
| ·CA XVb蛋白在斑马鱼卵巢中的表达 | 第60页 |
| ·讨论 | 第60-63页 |
| ·斑马鱼CA XVb蛋白分析 | 第60-61页 |
| ·CA15b基因在斑马鱼不同组织中的表达 | 第61-62页 |
| ·CA15b mRNA在斑马鱼早期胚胎中的表达 | 第62-63页 |
| 小结 | 第63-64页 |
| 3 斑马鱼nanog-like oDNA的克隆、表达及其蛋白结合靶序列的初步筛选 | 第64-104页 |
| ·前言 | 第64-65页 |
| ·实验材料 | 第65-68页 |
| ·实验动物 | 第65页 |
| ·质粒与菌株 | 第65页 |
| ·相关引物 | 第65-66页 |
| ·主要试剂、试剂盒及酶系统 | 第66页 |
| ·主要仪器 | 第66页 |
| ·生物信息学分析软件和在线分析工具网址 | 第66-67页 |
| ·常用试剂配方 | 第67-68页 |
| ·实验方法 | 第68-83页 |
| ·总RNA的提取及cDNA模板的制备 | 第68页 |
| ·目的片段的扩增与回收 | 第68-69页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第69页 |
| ·目的片段的连接和转化 | 第69页 |
| ·重组克隆的鉴定及序列测定 | 第69-70页 |
| ·RACE法获取全长cDNA序列 | 第70-72页 |
| ·体外转录目的基因RNA探针 | 第72-73页 |
| ·组织切片原位杂交 | 第73-74页 |
| ·整体胚胎原位杂交和双色荧光原位杂交 | 第74页 |
| ·原核诱导表达融合蛋白 | 第74-77页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第77-79页 |
| ·组织总蛋白的提取 | 第79-80页 |
| ·免疫组织化学和荧光免疫组织化学 | 第80页 |
| ·NANOG-like蛋白结合靶序列的初步筛选 | 第80-83页 |
| ·结果 | 第83-100页 |
| ·斑马鱼nanog-like基因全长cDNA序列的克隆 | 第83-85页 |
| ·斑马鱼nanog-like基因序列分析 | 第85-88页 |
| ·nanog-like mRNA在斑马鱼不同组织中的表达 | 第88-90页 |
| ·nanog-like mRNA在斑马鱼早期胚胎中的表达 | 第90-92页 |
| ·斑马鱼NANOG-like多克隆抗体的制备 | 第92-95页 |
| ·NANOG-like蛋白在斑马鱼不同组织中的表达 | 第95-96页 |
| ·NANOG-like蛋白在斑马鱼性腺中的表达 | 第96-98页 |
| ·NANOG-like蛋白在斑马鱼早期胚胎中的表达 | 第98页 |
| ·NANOG-like蛋白结合靶序列的初步筛选 | 第98-100页 |
| ·讨论 | 第100-103页 |
| ·斑马鱼NANOG-like蛋白序列分析 | 第100-101页 |
| ·nanog-like基因在斑马鱼性腺中的表达 | 第101-102页 |
| ·nanog-like基因在斑马鱼早期胚胎中的表达 | 第102页 |
| ·NANOG-like蛋白结合靶序列的筛选 | 第102-103页 |
| 小结 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-111页 |
| 缩略词 | 第111-113页 |
| 博士在读期间已发表的文章 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
