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基因枪法将抗蚜虫基因转入玉米并再生植株初报

致谢第1-9页
摘要第9-10页
1 文献综述第10-21页
   ·玉米组织培养研究第10-13页
     ·玉米组织培养状况第10-11页
     ·玉米组织培养的影响因素第11-13页
       ·基因型是玉米组织培养最重要的影响因素第11页
       ·玉米幼胚是常用的外植体第11-12页
       ·培养条件对组织培养的影响第12-13页
   ·玉米的遗传转化方法第13-18页
     ·农杆菌介导法第13-15页
     ·基因枪轰击法第15-17页
     ·花粉管通道法第17页
     ·化学诱导法第17-18页
     ·电击法第18页
     ·子房注射法第18页
   ·玉米遗传转化的受体系统第18页
   ·转化体的抗性筛选第18-21页
     ·转基因筛选剂的应用第18-19页
     ·转基因标记的安全性问题第19-21页
2 引言第21-23页
   ·国内的蚜虫危害状况第21页
   ·玉米抗蚜虫的国内外研究进展第21-23页
3 材料与方法第23-35页
   ·玉米再生体系的优化第23-26页
     ·玉米愈伤组织的诱导和继代第23页
       ·试验材料第23页
       ·诱导和继代培养基第23页
       ·愈伤组织的获得第23页
     ·分化前不同浓度的2,4-D 预处理愈伤组织对植株再生的影响第23页
       ·试验材料第23页
       ·培养基第23页
       ·试验方法第23页
     ·甘露醇高渗液体培养基震荡培养愈伤组织对植株再生的影响第23-24页
       ·试验材料第23页
       ·培养基第23-24页
       ·试验方法第24页
     ·三种不同的分化预处理方式对愈伤组织植株再生的影响第24页
       ·培养基第24页
       ·试验材料第24页
       ·试验方法第24页
     ·从生长量和植株再生率两方面研究抗生素G418 对愈伤组织进行抗性筛选的适宜浓度第24-25页
       ·试验材料第24页
       ·抗性筛选培养基第24-25页
       ·试验方法第25页
     ·从生长量和植株再生率两方面研究抗生素Kan 对玉米愈伤组织进行抗性筛选的适宜浓度第25页
     ·从生长量和植株再生率两方面研究除草剂PPT 对玉米愈伤组织进行抗性筛选的适宜浓度第25页
     ·生根与移栽第25-26页
       ·生根培养基第25页
       ·试验方法第25-26页
   ·基因枪转化系统的建立第26-35页
     ·载体的构建第26-31页
       ·菌种及载体第26页
       ·酶和试剂第26页
       ·主要的试验仪器第26-27页
       ·培养基第27页
       ·过渡载体pNMCS-EβF 的构建第27-30页
       ·表达载体pNCX-EβF 的构建第30-31页
     ·基因枪轰击转化第31-33页
       ·轰击前的准备第31-32页
       ·基因枪(PDS-1000/He)轰击法微弹载体准备第32-33页
     ·轰击后愈伤组织的恢复培养、抗性筛选和植株再生第33页
     ·抗性愈伤组织的PCR 检测第33-35页
4 结果与分析第35-49页
   ·玉米再生体系的研究第35-44页
     ·分化前不同浓度2,4-D 预处理愈伤组织对玉米植株再生率的影响第35-36页
     ·甘露醇液体高渗培养基震荡培养愈伤组织对玉米植株再生的影响第36-37页
     ·三种不同的分化预处理方式对玉米愈伤组织再生率的影响第37页
     ·G418 对玉米愈伤组织生长和再生的影响第37-40页
     ·Kan 对玉米愈伤组织生长和再生的影响第40-41页
     ·PPT 对玉米愈伤组织生长及再生的影响第41-43页
     ·不同培养基类型对玉米组织培养再生苗诱导生根的影响第43-44页
   ·基因枪转化系统的建立第44-49页
     ·载体的构建第44-45页
     ·轰击转化第45-48页
       ·轰击前不同预处理方式间的差异第46页
       ·基因枪轰击参数的优化第46-47页
       ·不同基因型间转化效率的差异第47页
       ·不同载体间转化的差异第47-48页
     ·轰击转化后的PCR 检测第48页
     ·再生苗的生根与移栽第48-49页
5 讨论第49-52页
   ·提高玉米愈伤组织再生率方法的研究第49页
   ·G418、Kan 及PPT 在应用于玉米遗传转化中用作筛选剂的浓度探索第49-50页
   ·不同的轰击前预处理方式对轰击转化效率的影响第50-51页
   ·不同轰击距离与轰击压力组合对轰击转化效率的影响第51页
   ·不同的表达载体对轰击转化效率的影响第51-52页
参考文献第52-61页
缩略语表第61-62页
ABSTRACT第62-63页

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