| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 蝎毒素的研究进展 | 第14-32页 |
| ·引言 | 第14-15页 |
| ·蝎的地理分布和系统分类 | 第15-16页 |
| ·蝎蜇伤的症状 | 第16-17页 |
| ·蝎毒液的组成和毒素的功能研究 | 第17-26页 |
| ·钠毒素 | 第17-19页 |
| ·钾毒素 | 第19-21页 |
| ·氯毒素 | 第21-22页 |
| ·钙毒素 | 第22-23页 |
| ·抗菌肽 | 第23-24页 |
| ·脂类分解激活肽 | 第24页 |
| ·舒缓激肽增效肽 | 第24页 |
| ·酶 | 第24-25页 |
| ·其它成分 | 第25-26页 |
| ·蝎毒素的应用 | 第26-30页 |
| ·蝎毒素与离子通道的研究 | 第26-27页 |
| ·蝎毒素与神经性疾病的治疗 | 第27-28页 |
| ·蝎毒素与病虫害防治 | 第28-29页 |
| ·蝎毒素与蛋白质工程 | 第29页 |
| ·蝎毒素与肿瘤治疗 | 第29-30页 |
| ·蝎毒素与免疫调节疾病的治疗 | 第30页 |
| ·本工作的研究基础 | 第30-31页 |
| ·本工作的出发点 | 第31-32页 |
| 第二章 蝎毒腺组织cDNA文库构建 | 第32-46页 |
| ·引言 | 第32-34页 |
| ·材料与方法 | 第34-41页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·组织材料 | 第34页 |
| ·主要试剂盒及试剂 | 第34页 |
| ·设备与仪器 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-41页 |
| ·蝎毒腺组织总RNA的提取与检测 | 第35页 |
| ·蝎毒腺组织mRNA的纯化 | 第35-36页 |
| ·cDNA一链合成 | 第36-37页 |
| ·cDNA二链合成 | 第37-38页 |
| ·Sal ⅠAdapter连接 | 第38页 |
| ·Not Ⅰ酶消化 | 第38-39页 |
| ·柱层析纯化cDNA | 第39-40页 |
| ·连接cDNA和载体 | 第40页 |
| ·将重组的载体电转化到E.coli中 | 第40-41页 |
| ·PCR方法鉴定文库的插入率 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-43页 |
| ·总RNA的提取及mRNA的纯化 | 第41-42页 |
| ·cDNA文库的文库容量和插入检测 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-46页 |
| ·RNA断裂现象 | 第43-44页 |
| ·cDNA文库的质量检测 | 第44-46页 |
| 第三章 蝎毒腺组织cDNA文库的EST分析及毒素基因的鉴定 | 第46-75页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-48页 |
| ·材料与软件 | 第46-47页 |
| ·方法流程 | 第47-48页 |
| ·随机挑选文库中克隆子测序 | 第47页 |
| ·EST处理流程 | 第47-48页 |
| ·Batchblast进行批量注释 | 第48页 |
| ·毒素序列的比对和分析 | 第48页 |
| ·结果 | 第48-73页 |
| ·EST处理 | 第48-49页 |
| ·毒素序列 | 第49-73页 |
| ·钠毒素 | 第49-51页 |
| ·脂类分解激活肽 | 第51-52页 |
| ·α-钾毒素 | 第52-54页 |
| ·β-钾毒素和scorpine类似肽 | 第54-56页 |
| ·κ-钾毒素 | 第56-57页 |
| ·钙毒素 | 第57-58页 |
| ·scamp | 第58-59页 |
| ·细胞毒性肽 | 第59-61页 |
| ·ponericin类似肽 | 第61-62页 |
| ·lcamp | 第62页 |
| ·BmKbpp类似肽 | 第62-63页 |
| ·溶菌酶 | 第63-64页 |
| ·酸性肽 | 第64-65页 |
| ·磷脂酶A2 | 第65-66页 |
| ·La1类似肽 | 第66-67页 |
| ·脯氨酸富集肽 | 第67页 |
| ·tibetanin | 第67-68页 |
| ·8C-toxin | 第68-69页 |
| ·唾液蛋白 | 第69-71页 |
| ·丝氨酸蛋白酶 | 第71-73页 |
| ·讨论 | 第73-75页 |
| 第四章 蝎毒素多样性的机制研究:兴奋型昆虫β-钠毒素基因的适应性进化 | 第75-86页 |
| ·引言 | 第75-76页 |
| ·数据、软件与方法 | 第76-77页 |
| ·数据 | 第76页 |
| ·软件 | 第76页 |
| ·方法步骤 | 第76-77页 |
| ·结果 | 第77-84页 |
| ·兴奋型昆虫β-钠毒素蛋白序列的比对分析和进化树构建 | 第77-79页 |
| ·兴奋型昆虫β-钠毒素的cDNA的比对分析 | 第79-80页 |
| ·兴奋型昆虫β-钠毒素成熟肽区域正向选择位点的检测 | 第80-82页 |
| ·正向选择位点位于兴奋型昆虫β-钠毒素的活性表面 | 第82-84页 |
| ·讨论 | 第84-86页 |
| 第五章 蝎毒素多样性的机制研究:选择性拼接产生LmVP1.1和LmTXLP11 | 第86-96页 |
| ·前言 | 第86页 |
| ·材料和方法 | 第86-90页 |
| ·实验材料和试剂 | 第86-87页 |
| ·实验方法 | 第87-90页 |
| ·蝎基因组DNA的提取 | 第87页 |
| ·PCR引物的设计 | 第87-88页 |
| ·LmTxLP11和LmVP1.1全基因序列的扩增 | 第88页 |
| ·PCR产物琼脂糖凝胶电泳回收 | 第88页 |
| ·将目的片段连接到pMD18T载体 | 第88-89页 |
| ·DH5α感受态细胞的制作 | 第89页 |
| ·重组载体的转化 | 第89-90页 |
| ·结果和分析 | 第90-94页 |
| ·LmTxLP11和LmVP1.1的cDNA序列分析 | 第90-92页 |
| ·选择性拼接产生LmTxLP11和LmVP1.1 | 第92-94页 |
| ·讨论 | 第94-96页 |
| 第六章 蝎毒素的进化分析 | 第96-119页 |
| ·引言 | 第96-97页 |
| ·材料和方法 | 第97-99页 |
| ·蛋白序列 | 第97页 |
| ·软件 | 第97-98页 |
| ·方法步骤 | 第98-99页 |
| ·结果 | 第99-116页 |
| ·具有同源非毒液蛋白的毒素类型的进化推断 | 第99-111页 |
| ·不具有同源非毒液蛋白的毒素类型的进化推断 | 第111-116页 |
| ·讨论 | 第116-119页 |
| 研究总结 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-133页 |
| 博士研究生期间发表和待发表的论文 | 第133-135页 |
| 致谢 | 第135-136页 |
