论文一 小鼠骨髓间充质干细胞向子宫内膜腺上皮分化的蛋白质组学研究 | 第1-71页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
前言 | 第12-16页 |
第一部分 共培养体系的建立及ITRAQ蛋白质组学检测 | 第16-37页 |
1 仪器和材料 | 第16-19页 |
·仪器 | 第16-17页 |
·材料 | 第17-19页 |
2 实验方法 | 第19-24页 |
·小鼠骨髓间充质干细胞的原代培养 | 第19页 |
·小鼠骨髓间充质干细胞表面标记物流式细胞术鉴定 | 第19-20页 |
·小鼠子宫内膜间质细胞的原代培养 | 第20页 |
·细胞免疫化学方法对小鼠子宫内膜间质细胞的鉴定 | 第20-21页 |
·小鼠BMSCs与EStCs共培养体系 | 第21页 |
·制备小鼠子宫内膜腺上皮覆膜冰冻切片 | 第21-22页 |
·激光显微捕获切割获取小鼠子宫内膜上皮 | 第22页 |
·提取蛋白 | 第22-23页 |
·蛋白浓度测定 | 第23页 |
·iTRAQ标记 | 第23页 |
·二维液相色谱(two dimensional lquid chromatography,2-D LC) | 第23-24页 |
·串联质谱(MS/MS) | 第24页 |
·数据分析 | 第24页 |
3 实验结果 | 第24-35页 |
·原代培养小鼠BMSCs及鉴定 | 第24-25页 |
·原代培养小鼠EStCs及鉴定 | 第25-26页 |
·建立BMSCs与EstCs间接共培养体系 | 第26-27页 |
·激光捕获显微切割小鼠子宫内膜腺上皮 | 第27页 |
·数据分析 | 第27-35页 |
4 讨论 | 第35-37页 |
·原代培养BMSCs与EStCs间接共培养体系的建立 | 第35页 |
·小鼠子宫内膜腺上皮的获取 | 第35页 |
·获得五组样品的蛋白质分子信息及相对定量结果 | 第35-37页 |
第二部分 蛋白质组学检测上皮细胞和间质细胞标记的验证 | 第37-46页 |
1 仪器和材料 | 第37-38页 |
·仪器 | 第37页 |
·材料 | 第37-38页 |
·溶液配制 | 第38页 |
2 实验方法 | 第38-40页 |
·石蜡切片免疫组化 | 第38-39页 |
·Western blot验证 | 第39-40页 |
3 实验结果 | 第40-43页 |
·免疫组化方法检测4种蛋白 | 第40-41页 |
·Western blot验证蛋白质组学相对定量结果 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-46页 |
第三部分 骨髓间充质干细胞向子宫内膜腺上皮方向分化过程的蛋白分子及信号通路 | 第46-61页 |
1 材料和方法 | 第46页 |
2 实验结果 | 第46-56页 |
·BMSCs向腺上皮方向分化过程差异蛋白热图及系统聚类分析 | 第46-49页 |
·BMSCs向腺上皮方向分化过程差异蛋白GO分析 | 第49-52页 |
·BMSCs向腺上皮方向分化过程中的蛋白质亚网络及蛋白质分子分析 | 第52-56页 |
3 讨论 | 第56-61页 |
·系统聚类分析从整体差异蛋白水平进一步阐明分化 | 第56-57页 |
·结构分子功能、细胞学功能和整合素介导的通路在BMSCs向子宫内膜方向分化中发挥重要作用 | 第57-58页 |
·差异蛋白在BMSCs向子宫内膜方向分化中发挥重要作用 | 第58-59页 |
·转录因子NF-κB和Wnt信号通路在BMSCs向子宫内膜方向分化中可能发挥重要作用 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
总结 | 第69页 |
主要创新点 | 第69-70页 |
展望 | 第70-71页 |
论文二 TP53单核苷酸多态性RS1042522与绒癌的相关性研究 | 第71-101页 |
中文摘要 | 第71-73页 |
Abstract | 第73-75页 |
前言 | 第75-76页 |
第一部分 不明部位持续性妊娠诊断异位绒癌病例及其TP53和ERBB2外显子测序 | 第76-88页 |
1 材料和仪器 | 第76-77页 |
·材料 | 第76页 |
·主要仪器 | 第76-77页 |
2 研究方法 | 第77-82页 |
·PPUL疑难病例临床诊断 | 第77-78页 |
·基因组DNA提取及保存 | 第78页 |
·引物设计 | 第78-80页 |
·PCR扩增 | 第80-81页 |
·PCR产物的纯化 | 第81页 |
·测序 | 第81-82页 |
3 结果 | 第82-85页 |
·异位绒癌的确诊及治疗 | 第82-84页 |
·基因组DNA抽提 | 第84页 |
·PCR扩增与纯化 | 第84页 |
·患者胚系ERBB2和TP53测序结果比对 | 第84-85页 |
4 讨论 | 第85-88页 |
·不明部位持续性妊娠确诊异位妊娠 | 第85-86页 |
·患者胚系ERBB2和TP53外显子测序 | 第86-88页 |
第二部分 TP53 RS1042522与绒癌的易感相关性研究 | 第88-97页 |
1 材料和仪器 | 第88-89页 |
·材料 | 第88页 |
·主要仪器 | 第88-89页 |
2 研究方法 | 第89-92页 |
·实验分组 | 第89页 |
·基因组DNA提取及保存 | 第89-90页 |
·引物设计 | 第90页 |
·PCR扩增 | 第90页 |
·PCR产物的纯化 | 第90-91页 |
·测序 | 第91-92页 |
·色合计分析 | 第92页 |
3 结果 | 第92-95页 |
·基因组DNA抽提 | 第92页 |
·PCR扩增与纯化 | 第92页 |
·绒癌组和对照组平均年龄t检验 | 第92页 |
·入组人群基因型Hardy-Weinberg平衡检验 | 第92-93页 |
·TP53 SNP rs1042522在绒癌组和对照组中基因型CC、CG、GG测序结果 | 第93-94页 |
·TP53 SNP rs1042522在绒癌组和对照组中等位基因和等位基因型分布 | 第94-95页 |
4 讨论 | 第95-97页 |
总结 | 第97页 |
主要创新点 | 第97-98页 |
展望 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-101页 |
综述 | 第101-112页 |
参考文献 | 第108-112页 |
中英文缩写对照 | 第112-114页 |
研究生期间发表和投稿的论文和综述 | 第114页 |
研宄生期间获奖情况 | 第114-116页 |
致谢 | 第116-118页 |