| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 主要符号对照表 | 第5-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-12页 |
| ·骨髓MSCs概述 | 第8-10页 |
| ·骨髓MSCs的分离和培养 | 第8-9页 |
| ·骨髓MSCs的生物学特性 | 第9页 |
| ·骨髓MSCs的体外成骨诱导分化 | 第9-10页 |
| ·转录因子Oct4 与Nanog在ES细胞中的调控研究 | 第10-11页 |
| ·Nanog与干细胞 | 第10页 |
| ·Oct4 与干细胞 | 第10-11页 |
| ·研究背景，目的和意义 | 第11-12页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第12-29页 |
| ·实验材料 | 第12-15页 |
| ·主要试剂和原料 | 第12-13页 |
| ·主要仪器设备 | 第13页 |
| ·常用溶液及其配制 | 第13-14页 |
| ·菌种和细胞株 | 第14-15页 |
| ·实验方法 | 第15-29页 |
| ·人骨髓MSCs原代细胞的分离培养 | 第15页 |
| ·人骨髓MSCs的保存和复苏 | 第15页 |
| ·人骨髓MSCs的鉴定 | 第15-16页 |
| ·诱导人骨髓MSCs分化成成骨细胞 | 第16页 |
| ·成骨细胞分化鉴定 | 第16页 |
| ·人基因组DNA的提取 | 第16-17页 |
| ·制备感受态细胞 | 第17页 |
| ·小量抽提质粒 | 第17-18页 |
| ·中量抽提质粒 | 第18-20页 |
| ·纯化DNA | 第20-21页 |
| ·DNA凝胶回收 | 第21-22页 |
| ·质粒转化 | 第22页 |
| ·双荧光报告素酶报告质粒的构建 | 第22-23页 |
| ·绿色荧光蛋白报告质粒的构建 | 第23-24页 |
| ·脂质体转染 | 第24-25页 |
| ·双荧光素酶报告实验 | 第25页 |
| ·总RNA提取 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR检测Oct4 和Sox2 表达情况 | 第26页 |
| ·绿色荧光蛋白实验 | 第26页 |
| ·核蛋白提取 | 第26-27页 |
| ·生物素标记探针 | 第27页 |
| ·斑点杂交检测探针标记效率 | 第27-28页 |
| ·凝胶电泳迁移率实验 | 第28-29页 |
| 第三章 实验结果 | 第29-39页 |
| ·人骨髓MSCs的原代培养 | 第29页 |
| ·人骨髓MSCs的鉴定 | 第29-30页 |
| ·成骨细胞分化鉴定 | 第30-31页 |
| ·提取人基因组DNA | 第31-32页 |
| ·双荧光素酶检测Nanog调控元件在骨髓MSCs内的活性 | 第32-35页 |
| ·绿色荧光蛋白实验检测Nanog调控元件在骨髓MSCs内的活性 | 第35-36页 |
| ·RT-PCR检测Oct4 和Sox2 表达情况 | 第36-37页 |
| ·斑点杂交检测探针标记效率 | 第37页 |
| ·EMSA检测Oct4 与Sox2 是否激活Nanog顺式调控元件 | 第37-39页 |
| 第四章 讨论 | 第39-41页 |
| 第五章 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第46页 |
