摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
图表目录 | 第8-9页 |
本论文常用中英文缩写词 | 第9-10页 |
文献综述 | 第10-20页 |
引言 | 第20-21页 |
1 材料与方法 | 第21-29页 |
·细胞、毒株、疫苗毒及鸡胚 | 第21页 |
·酶类与主要试剂(盒) | 第21页 |
·主要溶液与培养基的配制 | 第21-23页 |
·细胞培养所需溶液的配制与处理 | 第21-22页 |
·RNA 提取相关溶液配制 | 第22页 |
·感受态细胞制备所需溶液的配制 | 第22-23页 |
·主要培养基配制 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23页 |
·J 亚群禽白血病病毒的培养 | 第23-24页 |
·鸡胚成纤维细胞的制备与传代 | 第23-24页 |
·标准毒株的培养 | 第24页 |
·ALV-J 阳性标准品的制备 | 第24-26页 |
·标准毒株的 RNA 提取 | 第24页 |
·cDNA 合成 | 第24-25页 |
·PCR 扩增与产物纯化 | 第25页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第25页 |
·目的基因片段与质粒载体的连接反应 | 第25页 |
·重组质粒的转化与鉴定 | 第25-26页 |
·SYBRGreenⅠ荧光定量 RT-PCR 方法的建立 | 第26页 |
·反应体系与条件的优化 | 第26页 |
·标准曲线的建立 | 第26页 |
·荧光定量 RT-PCR 方法的特异性检测 | 第26页 |
·荧光定量 RT-PCR 方法的灵敏性检测 | 第26页 |
·荧光定量 RT-PCR 方法的重复稳定性检测 | 第26页 |
·SYBRGreenⅠ荧光定量 RT-PCR 方法的应用 | 第26-29页 |
·临床病料的检测 | 第26-27页 |
·临床病料的采集、运输与保存 | 第26页 |
·病料组织 RNA 提取与 cDNA 合成 | 第26-27页 |
·荧光定量 RT-PCR 方法检测 | 第27页 |
·病毒的分离与 PCR 扩增、测序鉴定 | 第27页 |
·ALV-J 基因在不同脏器中分布与 mRNA 表达水平检测 | 第27页 |
·阳性感染鸡不同组织 RNA 提取与 cDNA 合成 | 第27页 |
·ALV-J 基因 mRNA 表达水平检测 | 第27页 |
·疫苗毒的检测 | 第27-29页 |
2 结果与分析 | 第29-38页 |
·pol-gp85 基因片段的扩增与重组质粒的构建 | 第29页 |
·SYBRGreenⅠ荧光定量 RT-PCR 方法的建立 | 第29-32页 |
·RT-PCR 反应体系与反应条件的优化 | 第29页 |
·阳性标准品的实时扩增与标准曲线的建立 | 第29-30页 |
·荧光定量 RT-PCR 方法的特异性 | 第30-31页 |
·荧光定量 RT-PCR 方法的灵敏性 | 第31-32页 |
·荧光定量 RT-PCR 方法的重复稳定性 | 第32页 |
·临床病料的检测结果 | 第32-35页 |
·病鸡的剖检病变 | 第32-33页 |
·荧光定量 RT-PCR 方法检测临床病料结果 | 第33-34页 |
·病毒的分离与 PCR 扩增、测序结果 | 第34-35页 |
·ALV-J 基因在不同脏器中分布与 mRNA 表达水平 | 第35-36页 |
·荧光定量 RT-PCR 方法检测疫苗结果 | 第36-38页 |
3 讨论 | 第38-41页 |
·J 亚群禽白血病的危害与快速诊断 | 第38-39页 |
·安徽省鸡群中 ALV-J 的感染情况 | 第39-40页 |
·ALV-J 在不同脏器中的分布与表达 | 第40-41页 |
结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
附录 | 第47-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |