| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-17页 |
| ·转录因子在植物抗逆胁迫中的作用 | 第9-11页 |
| ·转录因子的概念 | 第9页 |
| ·植物抗逆胁迫相关的转录因子及其作用 | 第9-11页 |
| ·植物中CBF转录因子的研究进展 | 第11-15页 |
| ·CBF基因的结构特点 | 第11页 |
| ·CBF信号途径的研究 | 第11-13页 |
| ·生物节律钟调控CBF基因的表达 | 第13-14页 |
| ·CBF转录因子在植物抗逆基因工程中的作用 | 第14-15页 |
| ·本文研究目的与意义 | 第15-17页 |
| 2 甘菊CBF基因的克隆及表达分析 | 第17-34页 |
| ·材料与方法 | 第17-18页 |
| ·试验材料 | 第17页 |
| ·试剂、菌株 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-21页 |
| ·胁迫处理 | 第18页 |
| ·甘菊叶片总RNA提取 | 第18-19页 |
| ·反转录 | 第19页 |
| ·RT-PCR | 第19-20页 |
| ·甘菊ClCBF基因cDNA克隆 | 第20-21页 |
| ·全长cDNA扩增 | 第21页 |
| ·蛋白质的生物信息学分析 | 第21页 |
| ·ClCBF基因启动子的扩增及元件分析 | 第21页 |
| ·结果与分析 | 第21-33页 |
| ·ClCBF保守结构域分析 | 第21-22页 |
| ·ClCBF基因表达模式分析 | 第22-23页 |
| ·ClCBF基因全长cDNA的克隆 | 第23-26页 |
| ·ClCBF基因序列分析 | 第26-27页 |
| ·ClCBF家族系统进化树分析 | 第27-28页 |
| ·ClCBF基因理化性质分析 | 第28-30页 |
| ·ClCBF基因跨膜结构域分析 | 第30-31页 |
| ·ClCBF基因启动子元件分析 | 第31-33页 |
| ·本章小结 | 第33-34页 |
| 3 甘菊ClCBF基因植物表达载体的构建及转化拟南芥 | 第34-41页 |
| ·试验材料 | 第34页 |
| ·试验材料 | 第34页 |
| ·试验试剂及菌株 | 第34页 |
| ·试验方法 | 第34-38页 |
| ·ClCBF-pGEM-T中间表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·pBI121-ClCBF植物表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·农杆菌感受态的制备及转化 | 第36页 |
| ·农杆菌转化菌体鉴定 | 第36页 |
| ·农杆菌保存 | 第36-37页 |
| ·拟南芥播种 | 第37页 |
| ·花侵染法转化拟南芥及转基因株系鉴定 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-40页 |
| ·中间表达载体构建 | 第38页 |
| ·植物表达载体 | 第38-39页 |
| ·农杆菌菌液PCR | 第39页 |
| ·转基因拟南芥检测 | 第39-40页 |
| ·本章小结 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| ·甘菊ClCBF基因的克隆及序列分析 | 第41页 |
| ·甘菊ClCBF基因的表达分析 | 第41-42页 |
| ·甘菊ClCBF基因的启动子元件分析 | 第42-44页 |
| 5 结论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |