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人源化抗苏云金芽孢杆菌Bt(CrylB)毒素蛋白单链抗体的筛选、表达及生物学活性测定

符号说明第1-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-9页
目录第9-11页
第1章 前言与综述第11-29页
   ·苏云金芽孢杆菌的发现第11页
   ·苏云金芽孢杆菌Bt毒素蛋白的分类第11-13页
   ·Bt的杀虫机理及应用现状第13-17页
   ·Bt制剂及其转基因产品存在的风险第17-18页
   ·Bt毒素蛋白的检测方法第18-22页
     ·生物测定法第18-19页
     ·基于基因水平上的检测方法第19页
     ·基于蛋白质水平上的检测方法第19-22页
   ·基于噬菌体表面展示技术的抗体库发展及其在免疫学检测上的应用第22-27页
   ·展望第27-29页
第2章 抗Cry1B毒素蛋白单链抗体的筛选与鉴定第29-39页
   ·材料与方法第29-33页
     ·材料第29页
     ·培养基第29-30页
     ·溶液配制第30-31页
     ·实验方法第31-33页
   ·实验结果与分析第33-37页
     ·辅助噬菌体KM13扩增后的滴度测定第33页
     ·特异性重组噬菌体scFv的富集及多克隆噬菌体免疫分析第33-34页
     ·单克隆ELISA方法筛选阳性重组噬菌体第34-35页
     ·噬菌体scFv的氨基酸序列比对第35-37页
   ·讨论第37-39页
第3章 抗Cry1B毒素蛋白单链抗体的可溶性表达第39-57页
   ·材料与方法第39-47页
     ·材料第39-40页
     ·培养基和溶液配制第40页
     ·原核表达策略第40-43页
     ·sf9昆虫真核细胞表达策略第43-47页
   ·结果第47-55页
     ·原核表达结果第47-50页
     ·昆虫sf9真核细胞表达结果第50-55页
   ·讨论第55-57页
第4章 针对Cry1B毒素蛋白免疫学检测方法的建立与评价第57-69页
   ·材料与方法第57-61页
     ·材料与仪器第57-58页
     ·主要试剂的配制第58页
     ·针对Cry1B毒素蛋白间接竞争性ELISA检测方法的建立第58-59页
     ·三种形式表达的单链抗体对抗原特异性检测第59页
     ·基于双抗夹心的Cry1B毒素蛋白TRFIA检测方法的建立与评价第59-61页
   ·结果第61-66页
     ·针对Cry1B毒素蛋白间接竞争性ELISA检测方法的建立第61-62页
     ·可溶性单链抗体的结合特异性测定第62-63页
     ·基于双抗夹心的Cry1B毒蛋白TRFIA检测方法的建立与评价第63-66页
   ·讨论第66-69页
参考文献第69-76页
附录一 主要仪器第76-77页
在读期间发表的学术论文及研究成果第77-78页
致谢第78页

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