| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-19页 |
| ·植物基因启动子 | 第9-11页 |
| ·组成型启动子 | 第9页 |
| ·诱导型启动子 | 第9-10页 |
| ·组织特异性启动子 | 第10-11页 |
| ·果实特异启动子 | 第11-12页 |
| ·启动子的分离方法 | 第12-16页 |
| ·基因组文库筛选法 | 第12页 |
| ·探针载体筛选法 | 第12-13页 |
| ·启动子捕获法 | 第13页 |
| ·常规 PCR 法 | 第13-14页 |
| ·反向 PCR 法 | 第14页 |
| ·锅饼 PCR 法 | 第14-15页 |
| ·序列特异性引物 PCR 法 | 第15页 |
| ·热不对称交错 PCR 法 | 第15-16页 |
| ·Y 型接头扩增法 | 第16页 |
| ·启动子的分析鉴定 | 第16-18页 |
| ·生物信息学法 | 第16-17页 |
| ·实验分析法 | 第17-18页 |
| ·开展柑橘果实特异启动子研究的意义 | 第18-19页 |
| 2 柑橘果实成熟特异启动子的分离 | 第19-34页 |
| ·试验材料 | 第19页 |
| ·试验设计与方法 | 第19-26页 |
| ·脐橙基因组 DNA 的提取 | 第19-21页 |
| ·启动子序列的分离 | 第21-26页 |
| ·脐橙基因组 DNA 的酶切 | 第21页 |
| ·酶切产物的连接 | 第21-22页 |
| ·PCR 引物的设计合成 | 第22页 |
| ·nested PCR | 第22-24页 |
| ·特异片段的回收 | 第24-25页 |
| ·与克隆载体 PMD18-T 连接 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与 DNA 转化 | 第25页 |
| ·质粒提取 | 第25-26页 |
| ·启动子序列分析与功能预测 | 第26页 |
| ·结果分析与讨论 | 第26-33页 |
| ·脐橙基因组 DNA 的提取 | 第26页 |
| ·柑橘果实特异启动子序列的分离 | 第26-28页 |
| ·脐橙基因组 DNA 的酶切 | 第26-27页 |
| ·酶切产物的连接及 nested PCR | 第27-28页 |
| ·特异片段的克隆 | 第28页 |
| ·启动子序列分析与功能预测 | 第28-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| 3 柑橘果实成熟特异启动子表达载体的构建 | 第34-42页 |
| ·试验材料与仪器设备 | 第34页 |
| ·试验设计与方法 | 第34-37页 |
| ·PCR 引物设计合成 | 第34-35页 |
| ·目的片段的获得 | 第35页 |
| ·含目标启动子的表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·表达载体检测 | 第36-37页 |
| ·含目标启动子的表达载体转化农杆菌 | 第37页 |
| ·PCR、酶切检测 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-41页 |
| ·目的基因片段的获得 | 第37-38页 |
| ·含目标启动子载体的构建 | 第38-39页 |
| ·表达载体转化至农杆菌 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| 4 应用 GUS 基因瞬时表达体系初步验证目标启动子功能 | 第42-45页 |
| ·试验材料与仪器设备 | 第42页 |
| ·试验设计与方法 | 第42-43页 |
| ·侵染 | 第42-43页 |
| ·GUS 组织化学染色 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 5 结语 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 缩略词表 | 第51-53页 |
| 个人简介 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |