| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 绪论 | 第8-15页 |
| ·杨属植被及小黑杨研究现状 | 第8-10页 |
| ·杨属植被及小黑杨育种现状 | 第8页 |
| ·传统林木遗传育种 | 第8页 |
| ·分子遗传育种 | 第8-9页 |
| ·杨属植被及小黑杨而临问题 | 第9-10页 |
| ·蛋白质组学概况 | 第10-12页 |
| ·质谱鉴定技术 | 第10-11页 |
| ·翻译后修饰蛋白质组学 | 第11-12页 |
| ·磷酸化蛋白质组学 | 第11页 |
| ·甲基化蛋白组学 | 第11-12页 |
| ·其他翻译后修饰 | 第12页 |
| ·C4植物光合作用关键酶PPDK及PDRP的研究进展 | 第12-13页 |
| ·PPDK研究现状 | 第12-13页 |
| ·PDRP研究现状 | 第13页 |
| ·研究背景、目的意义及技术路线 | 第13-15页 |
| 2 小黑杨PPDK蛋白磷酸化质谱鉴定 | 第15-20页 |
| ·植物材料 | 第15页 |
| ·实验试剂 | 第15-16页 |
| ·主要实验仪器 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-18页 |
| ·提取小黑杨叶片蛋白 | 第16页 |
| ·小黑杨叶片蛋白的定量 | 第16页 |
| ·蛋白酶切及产物脱盐 | 第16-17页 |
| ·磷酸化肽段的富集 | 第17页 |
| ·Nano UPLC-ESI-MS/MS | 第17-18页 |
| ·数据分析处理 | 第18页 |
| ·实验结果与分析 | 第18页 |
| ·结论与讨论 | 第18-20页 |
| 3 小黑杨PPDK及PDRP基因的克隆及功能验证 | 第20-38页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌株和载体 | 第20页 |
| ·实验试剂及配制 | 第20-23页 |
| ·实验试剂 | 第20页 |
| ·主要溶液配制 | 第20-23页 |
| ·主要实验仪器 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·小黑杨RNA提取 | 第23-24页 |
| ·提取溶液 | 第23页 |
| ·RNA提取方法 | 第23页 |
| ·反转录(第一链cDNA合成) | 第23-24页 |
| ·基因克隆 | 第24-25页 |
| ·PCR反应 | 第24页 |
| ·DNA回收、测序 | 第24-25页 |
| ·载体构建 | 第25页 |
| ·载体验证 | 第25页 |
| ·PPDK和PDRP蛋白的表达及纯化 | 第25-26页 |
| ·蛋白的大量表达纯化 | 第25-26页 |
| ·PPDK及PDRP蛋白的western blot | 第26-27页 |
| ·Bradford法测定蛋白浓度 | 第26页 |
| ·体外磷酸化体系 | 第26页 |
| ·电泳及转膜 | 第26页 |
| ·Western blot | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-36页 |
| ·PPDK及PDRP序列分析 | 第27-29页 |
| ·PPDK及PDRP特异表达情况分析 | 第29-33页 |
| ·PPDK特异表达情况分析 | 第30-31页 |
| ·PDRP特异表达情况分析 | 第31-33页 |
| ·PPDK及PDRP基因的克隆 | 第33-34页 |
| ·PPDK和PDPR蛋白的原核表达及纯化 | 第34-36页 |
| ·PDRP对PPDK的磷酸化分析 | 第36页 |
| ·结论与讨论 | 第36-38页 |
| 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-47页 |
| 附录 | 第47-52页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |