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苏云金芽孢杆菌两类杀虫蛋白的遗传改良和抗虫性评价

致谢第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-9页
目录第9-11页
1 前言第11-13页
2 文献综述第13-27页
   ·Bt杀虫蛋白第13-15页
     ·Bt的发展概况第13-14页
     ·Bt的分类及杀虫机理第14-15页
   ·交叉抗性第15-16页
     ·交叉抗性的产生第15页
     ·广域交叉抗性与狭域交叉抗性第15-16页
   ·营养期杀虫蛋白VIP第16-19页
     ·营养期杀虫蛋白VIP概述第16页
     ·VIP的杀虫机理及杀虫谱第16-18页
     ·ICP蛋白与VIP蛋白在理化特性上的明显差异第18-19页
   ·植物转基因方法第19-21页
     ·基因枪法第19页
     ·化学物质诱导法第19-20页
     ·电穿孔法第20页
     ·花粉管通道法第20页
     ·农杆菌介导法第20-21页
   ·无选择标记基因植物转化系统第21-24页
     ·转基因植物选择标记去除的必要性第21-22页
     ·去除转基因选择标记基因的方法第22-24页
   ·转基因材料分子水平鉴定第24-26页
     ·DNA水平的检测第24-25页
     ·RNA水平的检测第25页
     ·免疫试纸条检测第25-26页
   ·本研究的目的及意义第26-27页
3 材料与方法第27-40页
   ·实验材料第27-30页
     ·受体品种第27页
     ·菌株与质粒载体第27-28页
     ·水稻遗传转化培养基第28-29页
     ·主要试剂、酶、引物及药品第29-30页
   ·实验方法第30-40页
     ·初生愈伤的诱导与继代第30页
     ·vip与mBt基因的分子设计及合成第30页
     ·转vip植株第30-37页
     ·转mBt植株第37-40页
4 结果与分析第40-55页
   ·转vip基因植株第40-48页
     ·vip表达载体的酶切鉴定第40页
     ·日本晴愈伤的诱导、继代及抗性愈伤的筛选第40-41页
     ·抗性愈伤的数目、PCR鉴定及再生状况第41-43页
     ·转vip基因植株的抗虫鉴定结果第43-47页
     ·转vip基因植株半定量RT-PCR分析第47页
     ·试纸条检测表达产物第47-48页
   ·转mBt基因植株第48-55页
     ·转mBt基因植株的获得及温室栽培第48页
     ·阳性转基因植株的DNA检测第48-49页
     ·阳性转基因植株的蛋白质分析第49-50页
     ·室内抗虫鉴定结果第50-51页
     ·转mBt植株T2代mBt与hph基因PCR检测第51-52页
     ·转mBt槟榔红材料T3代田间表现及PCR分子检测第52-53页
     ·T3代mBt阳性单株的RT-PCR第53-55页
5 结论与讨论第55-59页
   ·转vip与mBt基因植株的抗虫性第55-56页
   ·mBt基因表达抑制第56页
   ·影响抗虫性鉴定准确性的因素第56-57页
   ·分布转化第57-58页
   ·半定量RT-PCR第58-59页
6 小结与创新第59-61页
   ·小结第59页
   ·创新第59-61页
参考文献第61-67页
个人简历第67页

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