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鼠疫菌毒力蛋白YopM参与调控NALP3炎症小体的分子机制研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
缩略词表第10-11页
引言第11-29页
 1. 鼠疫第11-18页
   ·鼠疫的危害第11页
   ·鼠疫的致病菌及传播途径第11-18页
     ·鼠疫耶尔森菌第11-12页
     ·鼠疫的传播过程第12-14页
     ·鼠疫耶尔氏菌Ⅲ型分泌系统及毒力蛋白第14-18页
 2. 先天性免疫第18-28页
   ·TLRs介导的先天性免疫应答第19页
   ·RLRs介导的Ⅰ型干扰素抗病毒信号通路第19-20页
   ·NLRs介导的炎症小体信号通路第20-28页
     ·炎症小体第20-22页
     ·炎症小体的功能第22-24页
     ·炎症小体的分类第24-28页
       ·NLRP1炎症小体第24-25页
       ·NLRC4炎症小体及AIM2炎症小体第25页
       ·NALP3炎症小体第25-28页
 3. YoPM通过NALP3干扰宿主炎症反应第28-29页
材料与方法第29-39页
 1. 材料第29-30页
   ·细胞株第29页
   ·菌株与质粒第29页
   ·常用试剂盒第29-30页
   ·常用抗体、工具酶和其他化学试剂第30页
   ·主要实验仪器和器材第30页
 2. 实验方法第30-39页
   ·引物合成及载体构建第30-32页
   ·细胞培养与转染第32-33页
     ·细胞培养、传代及冻存第32-33页
     ·细胞转染第33页
   ·免疫印迹和免疫沉淀第33-35页
     ·GST-pull down体外相互作用实验第35-36页
     ·谷胱甘肽S转移酶(glutathion S-transferase)融合蛋白的制备第35页
     ·GST-pull down第35-36页
   ·酶联免疫吸附(ELISA)活性检测第36页
   ·免疫荧光第36页
   ·体外泛素化实验第36-37页
   ·鼠疫菌感染巨噬细胞实验第37-39页
结果第39-55页
 第一部分 YOPM参与炎症小体的激活第39-41页
 第二部分 YOPM是一个新的E3连接酶第41-44页
  1. YopM是个E3连接酶第41页
  2. YopM N端的68位半胱氨酸是其E3连接酶活性位点第41-44页
 第三部分 YOPM参与炎症小体调控的可能机制第44-52页
  1. YopM与Nalp3相互作用第44-48页
   ·YopM与Nalp3在293细胞体内特异性的相互作用第44-45页
   ·YopM通过第11-12LRR结构域与Nalp3发生相互作用第45-47页
   ·Nalp3三段结构域均能与YopM发生相互作用第47-48页
  2. YopM介导Nalp3发生K63-泛素连接影响稳定性及半衰期第48-50页
  3. YopM通过11-12LRR特异性增强Nalp3蛋白的稳定性第50-52页
 第四部分 YOPM激活NALP3炎症小体的生理意义第52-55页
  1. YopM促进caspase-1的激活和Il-1β的分泌第52-53页
  2. YopM缺失突变株严重降低其毒力第53-55页
讨论第55-59页
结论第59-60页
参考文献第60-68页
致谢第68-70页
硕士期间发表的论文第70页

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