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奶牛泌乳性状相关基因启动子甲基化分析

摘要第1-9页
Abstract第9-10页
1. 前言第10-18页
   ·DNA 甲基化研究进展第10-15页
     ·DNA 甲基化与 CpG 岛第10-11页
     ·DNA 甲基化作用的分子机制第11-12页
     ·DNA 去甲基化机制第12页
     ·甲基化生物学功能第12-14页
     ·DNA 甲基化研究方法第14-15页
   ·DNA 甲基化与泌乳研究现状第15-16页
   ·候选基因基因功能研究第16-17页
   ·研究目的与意义第17-18页
2. 材料和方法第18-30页
   ·奶牛乳腺组织泌乳性状相关基因甲基化启动子甲基化分析第18-25页
     ·实验主要试剂第18页
     ·实验主要仪器第18页
     ·实验动物第18页
     ·实验方法第18-23页
     ·实时荧光定量 PCR 检测泌乳性状相关基因 mRNA 水平第23-25页
     ·数据处理与统计分析第25页
   ·去甲基化药物 5-Aza 对乳腺上皮细胞 Cyclin D1 基因启动子甲基化的调节作用第25-30页
     ·乳腺上皮细胞原代及传代培养第25-26页
     ·5-Aza 实验处理第26-29页
     ·数据统计处理与统计分析第29-30页
3 结果与分析第30-52页
   ·奶牛乳腺组织泌乳相关基因启动子甲基化特征第30-46页
     ·STAT5a 基因启动子 CpG 岛预测及其甲基化特征第30-32页
     ·ELF5 基因启动子 CpG 岛预测及甲基化特征第32-34页
     ·AKT1 启动子 CpG 岛预测及甲基化特征第34-36页
     ·mTOR 启动子 CpG 岛预测及甲基化特征第36-38页
     ·EIF4EBP1 启动子 CpG 岛预测甲基化特征第38-40页
     ·RPS6KB1 启动子 CpG 岛预测及甲基化特征第40-42页
     ·SREBP1 启动子甲基化特征第42-44页
     ·Cyclin D1 基因启动子甲基化特征第44-46页
   ·实时荧光定量 PCR 分析不同奶牛乳腺组织泌乳相关基因 mRNA 差异结果第46-47页
   ·去甲基化 5-Aza 对乳腺上皮细胞 Cyclin D1 基因启动子甲基化的调节作用第47-52页
     ·乳腺上皮细胞的培养与鉴定第47-48页
     ·5-Aza 对奶牛乳腺上皮细胞活力及增殖的影响第48页
     ·5-Aza 对奶牛乳腺上皮细胞全基因组甲基化水平的影响第48-49页
     ·5-Aza 对 Cyclin D1 基因启动子甲基化水平的影响第49-50页
     ·Cyclin D1 荧光定量结果第50页
     ·Cyclin D1 蛋白 Western blotting 实验结果第50-52页
4. 讨论第52-55页
   ·DNA 甲基化与奶牛乳腺组织第52页
   ·营养条件、激素对奶牛乳腺组织泌乳相关基因启动子甲基化的影响第52-53页
   ·DNA 甲基化与奶牛乳腺发育及乳品质第53页
   ·非 5mCpG 甲基化模式的乳腺泌乳生物学作用第53-54页
   ·实验方法的选择第54-55页
5.结论第55-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-62页
附录第62-63页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第63页

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