| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-39页 |
| 1 微生物资源在农林生防方面具有重要意义 | 第13-23页 |
| ·微生物积累大量用于生防的生物活性物质 | 第13-17页 |
| ·用于植物病虫害生物防治的微生物制剂 | 第17-19页 |
| ·植物内生细菌生防作用研究 | 第19-23页 |
| 2 聚酮抗生素生物合成机制的研究 | 第23-37页 |
| ·抗生素产生菌-链霉菌的生物学特性 | 第23-25页 |
| ·链霉菌中聚酮类抗生素的生物合成机制 | 第25-30页 |
| ·聚酮类抗生素生物合成基因的遗传操作和药物创新 | 第30-33页 |
| ·抗生素糖基化生物学机制的研究 | 第33-37页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第37-39页 |
| ·植物生防内生菌的分离、鉴定及抑真菌活性的研究 | 第37-38页 |
| ·抗生素美达霉素生物合成基因的功能研究 | 第38-39页 |
| 第二章 抑制病原真菌活性的水稻内生细菌的分离与筛选 | 第39-50页 |
| 1 材料与方法 | 第39-42页 |
| ·生物材料 | 第39-40页 |
| ·培养基 | 第40页 |
| ·具有抗真菌活性的内生细菌的分离与抑菌活性测定 | 第40-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-48页 |
| ·具有抗真菌活性的内生细菌的分离 | 第42-43页 |
| ·内生细菌CHM-1对几株常见病原真菌抑菌作用的测定 | 第43-44页 |
| ·CHM-1对植物病原真菌菌丝生长的影响 | 第44-46页 |
| ·活体测定CHM-1对玉米小斑病、水稻纹枯病的防治效果 | 第46-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 水稻内生细菌CHM-1的鉴定 | 第50-58页 |
| 1 材料与方法 | 第50-53页 |
| ·菌株 | 第50-51页 |
| ·鉴定方法 | 第51-53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-56页 |
| ·CHM-1的培养特征 | 第53-54页 |
| ·CHM-1的革兰氏染色与氧化酶测定 | 第54页 |
| ·菌株CHM-1分类地位的初步确定 | 第54-55页 |
| ·16S rDNA的鉴定结果 | 第55页 |
| ·CHM-1的系统发育树的构建 | 第55-56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 细菌CHM-1内生性研究及对寄主植物生长的影响 | 第58-65页 |
| 1 材料与方法 | 第59-61页 |
| ·材料 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-63页 |
| ·双抗标记解淀粉芽孢杆菌CHMI | 第61页 |
| ·CHM-1~(RS)突变菌株在水稻和油菜体内的定殖 | 第61-62页 |
| ·内生细菌CHM-1对油菜和水稻的促生效果 | 第62页 |
| ·内生细菌CHM-1对油菜和水稻叶绿素含量的影响 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 第五章 美达霉素生物合成中糖基合成酶和C-糖基转移酶基因共表达体系的功能验证 | 第65-84页 |
| 1 材料与试剂 | 第67-69页 |
| ·菌株 | 第67页 |
| ·质粒 | 第67页 |
| ·生物酶和化学试剂 | 第67-68页 |
| ·引物 | 第68页 |
| ·仪器 | 第68页 |
| ·所用的培养基 | 第68-69页 |
| 2 实验方法 | 第69-74页 |
| ·天蓝色链霉菌共表达体系的建立与产物分析 | 第69-70页 |
| ·共表达体系B135/pAYT55、B135/pAYT65的获得 | 第70-74页 |
| ·生物转化(双菌株共培养)体系的建立与产物分析 | 第74页 |
| 3 结果与分析 | 第74-80页 |
| ·美达霉素糖基转移酶和糖基合成酶基因共表达体系的转化 | 第74-77页 |
| ·共表达体系B135/pAYT55、B135/pAYT65发酵培养与产物分析(单菌株异源表达体系) | 第77-79页 |
| ·生物转化体系的产物分析(双菌株共培养体系) | 第79-80页 |
| 4 讨论 | 第80-84页 |
| 第六章 美达霉素合成途径中C-糖基转移酶基因med-ORF8功能遗传学验证 | 第84-109页 |
| 1 材料与试剂 | 第85-88页 |
| ·菌株 | 第85-86页 |
| ·质粒 | 第86页 |
| ·生物酶和化学试剂 | 第86页 |
| ·引物 | 第86-87页 |
| ·发酵产物处理与分析仪器 | 第87页 |
| ·培养基 | 第87-88页 |
| 2 实验方法 | 第88-94页 |
| ·利用Reddirect系统进行med-ORF8敲除与回补方案 | 第88-91页 |
| ·突变株和互补菌株发酵与产物分析 | 第91页 |
| ·传统的med-ORF8敲除与互补的方案 | 第91-92页 |
| ·自杀质粒的构建示意图 | 第92页 |
| ·传统的方法构建自杀质粒 | 第92-93页 |
| ·天然菌株AM-7161中med-ORF8敲除与突变株的产生 | 第93-94页 |
| ·med-ORF8的回补 | 第94页 |
| ·med-ORF8敲除突变株与回补菌株的的产物分析 | 第94页 |
| 3 结果与分析 | 第94-107页 |
| ·Redirect~(TM)系统进行med-ORF8敲除与回补 | 第94-98页 |
| ·目的基因的互补实验 | 第98-99页 |
| ·传统的med-ORF8敲除与回补 | 第99-107页 |
| 4 讨论 | 第107-109页 |
| 第七章 美达霉素合成途径中C-糖基转移酶基因med-ORF8原核表达系统的优化 | 第109-129页 |
| 1 材料与试剂 | 第110-112页 |
| ·菌株 | 第110页 |
| ·质粒 | 第110页 |
| ·酶和化学试剂 | 第110-112页 |
| ·引物 | 第112页 |
| ·培养基 | 第112页 |
| 2 实验方法 | 第112-115页 |
| ·med-ORF8基因的克隆 | 第112-113页 |
| ·med-ORF8基因原核表达体系的建立 | 第113-115页 |
| 3 结果与分析 | 第115-127页 |
| ·med-ORF8基因的克隆 | 第115-116页 |
| ·表达质粒的构建(PCR、克隆及测序) | 第116页 |
| ·med-ORF8基因原核表达体系的建立 | 第116-119页 |
| ·med-ORF8蛋白的诱导表达 | 第119-127页 |
| 4 讨论 | 第127-129页 |
| 总结与展望 | 第129-131页 |
| 参考文献 | 第131-139页 |
| 博士期间发表论文与专利 | 第139-140页 |
| 致谢 | 第140页 |
