缩略词 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第一章 绪论 | 第11-25页 |
·Hedgehog 信号通路概述 | 第11-15页 |
·Hedgehog 信号通路简介 | 第11-13页 |
·Gli1 蛋白的特性 | 第13-15页 |
·Hedgehog 信号通路在脂肪发育过程中的作用 | 第15-21页 |
·脂肪组织发育的一般规律 | 第15-19页 |
·脂肪组织及其分类 | 第15-16页 |
·脂肪细胞分化的过程 | 第16-18页 |
·脂肪细胞分化的转录调控因子 | 第18-19页 |
·Hh 信号通路对脂肪细胞分化的影响 | 第19-21页 |
·组织特异性转基因动物的研究进展 | 第21-24页 |
·研究的目的和意义 | 第24-25页 |
第二章 猪 Gli1 基因 cDNA 的克隆及其生物信息学分析 | 第25-54页 |
·材料与方法 | 第25-41页 |
·实验材料 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-41页 |
·引物设计 | 第25-27页 |
·总 RNA 的提取、检测及 cDNA 第一链的合成 | 第27-28页 |
·PCR 扩增 | 第28-29页 |
·PCR 产物鉴定 | 第29页 |
·PCR 产物的纯化回收 | 第29-30页 |
·PCR 扩增产物的克隆及测序 | 第30-31页 |
·小量提取质粒 | 第31-32页 |
·酶切连接获得完整编码区 (CDS) 区域 | 第32-33页 |
·猪 Gli1 基因的非编码区序列的扩增 | 第33-40页 |
·猪 Gli1 基因的生物信息学分析 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41-53页 |
·猪舌头组织 RNA 的提取结果 | 第41页 |
·猪 Gli1 基因 CDS 区域的分段 PCR 扩增及 TA 克隆结果 | 第41-43页 |
·酶切连接猪 Gli1 基因的 CDS 全长 | 第43-46页 |
·猪 Gli1 基因的非编码区扩增 | 第46-48页 |
·猪舌头组织 RNA 的提取结果 | 第46页 |
·5’RACE 反应的扩增结果 | 第46-47页 |
·3’RACE 反应的扩增结果 | 第47页 |
·猪 Gli1 基因在不同组织中的表达结果 | 第47-48页 |
·猪 Gli1 基因的生物信息学分析 | 第48-53页 |
·核酸开放阅读框架分析 | 第48-49页 |
·氨基酸的组成理化性质分析 | 第49-51页 |
·猪 Gli1 蛋白的结构分析 | 第51-52页 |
·不同物种 Gli1 编码的氨基酸序列比对 | 第52页 |
·系统进化分析 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
第三章 小鼠 Gli1 基因编码区的克隆 | 第54-64页 |
·材料与方法 | 第54-57页 |
·材料 | 第54页 |
·实验方法 | 第54-57页 |
·引物设计 | 第55-56页 |
·总 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第56页 |
·PCR 扩增 | 第56-57页 |
·PCR 产物鉴定 | 第57页 |
·酶切连接获得阳性重组子 | 第57页 |
·结果与分析 | 第57-63页 |
·组织总 RNA 提取结果 | 第57页 |
·小鼠 Gli1 基因的 CDS 区域的分段扩增结果 | 第57-59页 |
·小鼠 Gli1 编码区的克隆 | 第59-63页 |
·利用重叠 PCR 扩增小鼠 Gli1 Frangment IV | 第60页 |
·Fragment I (1281 bp) cDNA TA 克隆和酶切验证结果 | 第60-61页 |
·Fragment IV (2089 bp) TA 克隆和酶切验证结果 | 第61-62页 |
·目的片段 2089 bp (Fragment IV) 连接到 pUC19 | 第62页 |
·目的片段 1281 bp (Fragment I)连接到 pUC-2089 | 第62-63页 |
·讨论 | 第63-64页 |
第四章 猪(小鼠)Gli1 基因的脂肪特异性表达载体的构建 | 第64-70页 |
·材料与方法 | 第64-67页 |
·材料 | 第64页 |
·实验方法 | 第64-67页 |
·小鼠 Gli1 基因的脂肪特异性表达载体的构建 | 第64-66页 |
·猪 Gli1 基因的脂肪特异性表达载体的构建 | 第66-67页 |
·结果与分析 | 第67-68页 |
·小鼠 Gli1 基因的脂肪特异性表达载体的构建 | 第67-68页 |
·猪 Gli1 基因的脂肪特异性表达载体的构建 | 第68页 |
·讨论 | 第68-70页 |
第五章 结论与创新点 | 第70-71页 |
·结论 | 第70页 |
·创新点 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第77-78页 |
附录 | 第78-85页 |
附录 1 主要仪器设备及化学试剂 | 第78-79页 |
附录 2 猪 Gli1 基因完整 cDNA 序列 | 第79-82页 |
附录 3 不同物种 Gli1 蛋白同源性比对结果 | 第82-85页 |
致谢 | 第85页 |