| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-16页 |
| ·布鲁菌病的概述 | 第9-10页 |
| ·布鲁菌的病原学 | 第10-12页 |
| ·布鲁菌的形态特征及培养特性 | 第10-11页 |
| ·布鲁菌的生物学特性 | 第11页 |
| ·布鲁菌的抵抗力 | 第11页 |
| ·布鲁菌的变异 | 第11-12页 |
| ·布鲁菌致病机制及免疫性 | 第12页 |
| ·布鲁菌致病机制 | 第12页 |
| ·布鲁菌的免疫机制 | 第12页 |
| ·布鲁菌病的预防措施 | 第12-13页 |
| ·布鲁菌病的诊断 | 第13-14页 |
| ·病原学诊断 | 第13页 |
| ·免疫血清学诊断 | 第13页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第13-14页 |
| ·布鲁菌外膜蛋白研究进展 | 第14-15页 |
| ·布鲁菌1组外膜蛋白 | 第14页 |
| ·布鲁菌2组外膜蛋白 | 第14-15页 |
| ·布鲁菌3组外膜蛋白 | 第15页 |
| ·研究的目的及意义 | 第15-16页 |
| 2 马耳他布鲁菌omp31的克隆及序列分析 | 第16-26页 |
| ·材料 | 第16-17页 |
| ·试验菌株和质粒 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·主要实验仪器 | 第16-17页 |
| ·方法 | 第17-22页 |
| ·试剂的配制 | 第17页 |
| ·马耳他布鲁菌的接种与培养 | 第17页 |
| ·布鲁菌菌体DNA的提取 | 第17页 |
| ·目的片段布鲁菌omp31基因的扩增与回收 | 第17-19页 |
| ·目的基因的克隆 | 第19-20页 |
| ·阳性重组子的筛选与鉴定 | 第20-22页 |
| ·实验结果 | 第22-25页 |
| ·PCR产物电泳结果 | 第22-23页 |
| ·重组质粒pMD18-T-omp31的双酶切和PCR鉴定结果 | 第23-24页 |
| ·重组质粒pMD18-T-omp31的序列分析 | 第24-25页 |
| ·讨论 | 第25-26页 |
| 3 马耳他布鲁菌omp31在大肠杆菌中表达 | 第26-35页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·重组质粒、宿主菌株 | 第26页 |
| ·试剂、工具酶及试剂盒 | 第26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-32页 |
| ·试剂的配制 | 第26-27页 |
| ·目的片段与pET-30a载体的酶切与回收 | 第27-29页 |
| ·阳性重组质粒pET-30a-omp31的鉴定 | 第29-30页 |
| ·pET-30a-omp31/BL21阳性重组菌的获得 | 第30页 |
| ·重组质粒pET-30a-omp31在大肠杆菌BL21中诱导表达 | 第30-31页 |
| ·表达产物的纯化 | 第31页 |
| ·表达产物的检测 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-34页 |
| ·重组质粒pET-30a-omp31的鉴定 | 第32页 |
| ·表达产物的鉴定 | 第32-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·马耳他布鲁菌omp31的原核表达 | 第34页 |
| ·重组蛋白的免疫活性检测 | 第34-35页 |
| 4 以重组OMP31蛋白作为间接ELISA检测抗原 | 第35-45页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·抗原及血清 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·仪器设备 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-39页 |
| ·试剂的配制 | 第36页 |
| ·抗原的制备 | 第36页 |
| ·间接ELISA操作程序 | 第36-37页 |
| ·间接ELISA反应条件的确定 | 第37-38页 |
| ·特异性试验 | 第38页 |
| ·间接ELISA重复性试验 | 第38页 |
| ·临床样本检测 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-44页 |
| ·抗原的制备 | 第39页 |
| ·间接ELISA反应条件的确定 | 第39-42页 |
| ·特异性试验 | 第42页 |
| ·重复试验 | 第42-43页 |
| ·临床样本检测 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·布鲁菌的膜蛋白 | 第44页 |
| ·ELISA反应的最佳条件 | 第44页 |
| ·选择omp31的意义 | 第44-45页 |
| 5 讨论与结论 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第45页 |
| ·结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
