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Bacillus amyloliquefaciens B3生防促生相关基因和内生质粒pBSG3的研究及高效生防工程菌的构建

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
上篇 文献综述第14-53页
 第一章 植物根际拮抗芽孢杆菌的防病促生机理概述第15-27页
  1 根际拮抗、促生芽孢杆菌的研发概况第15-17页
   ·国内生防促生芽孢杆菌的研发概况第16页
   ·国外生防促生芽孢杆菌的研发概况第16-17页
  2 拮抗芽孢杆菌的生防作用机制第17-21页
   ·营养和空间位点的竞争第17-18页
   ·芽孢杆菌拮抗物质的产生第18-20页
   ·芽孢杆菌对植物产生诱导抗性第20-21页
  3 根际拮抗芽孢杆菌的促生机理第21页
  4 目前实践应用中存在的问题及其对策第21-23页
   ·生防促生菌在实践应用中存在的问题第21-22页
   ·解决生防菌在植物病害防治中存在问题的对策第22-23页
  参考文献第23-27页
 第二章 非核糖体肽类抗生素的合成及生防作用第27-39页
  1 非核糖体肽化合物及其结构第27-29页
  2 非核糖体肽类化合物合成酶作用机理第29-32页
  3 非核糖体肽合成酶系(NRPSs/PKSs)的生物信息学研究第32-33页
  4 非核糖体肽类化合物的生理功能和应用第33页
  5 非核糖体肽类化合物在生物防治中的作用第33-35页
  6 展望第35-36页
  参考文献第36-39页
 第三章 细菌滚环式复制类型质粒的研究概况第39-53页
  1 滚环式复制质粒的宿主多样性第40-43页
  2 质粒序列结构第43-44页
  3 滚环式复制质粒的复制机理第44-47页
   ·前导链的复制第44-45页
   ·后随链的复制第45-47页
  4 质粒携带的基因功能研究第47-48页
  5 芽孢杆菌内生滚环式复制质粒的应用第48-49页
  参考文献第49-53页
下篇 研究内容第53-133页
 第一章 基于多相分类方法的生防芽孢杆菌鉴定和菌株产生抗生素质谱检测第55-71页
  摘要第55-56页
  1 材料和方法第56-59页
   ·菌株和培养基第56页
   ·酶和引物合成第56-57页
   ·基于DNA序列的分子鉴定第57-58页
   ·基于BOX-PCR指纹图谱的鉴定第58页
   ·脂肪酸甲酯鉴定第58-59页
   ·菌体发酵和抗菌物质粗提物的制备第59页
   ·质谱(MALDI-TOF-MS)检测第59页
  2 结果和讨论第59-66页
   ·16S rDNA鉴定第59-60页
   ·gyrB鉴定第60-62页
   ·BOX-PCR图谱第62页
   ·FAME分析第62-63页
   ·多相分类鉴定结果第63页
   ·生防菌产生非核糖体肽类物质质谱分析第63-66页
  3 本章小结第66-67页
  ABSTRACT第67-68页
  参考文献第68-71页
 第二章 基于Bacillus amyloliquefaciens B3基因组测序的新型非核糖体合成酶基因和生防促生相关基因分析第71-95页
  摘要第71-72页
  1 材料和方法第72-79页
   ·菌株和培养基第72页
   ·酶和引物合成第72-73页
   ·解淀粉芽孢杆菌B3差减文库的构建第73-76页
   ·Southern Dot Blot初步筛选差异DNA片段第76-78页
   ·反向PCR和半随机引物PCR第78页
   ·解淀粉芽孢杆菌B3基因组完全测序第78-79页
   ·基因组生物信息学比对和NRPS分析第79页
   ·解淀粉芽孢杆菌B3产生抗菌物质质谱检测第79页
  2 结果与讨论第79-90页
   ·解淀粉芽孢杆菌B3差减杂交第79-83页
   ·解淀粉芽孢杆菌B3测序分析第83-84页
   ·新型NRPS分析及预测第84-86页
   ·解淀粉芽孢杆菌B3中与植物促生防病相关基因初步分析第86-90页
  3 本章小结第90-91页
  ABSTRACT第91-92页
  参考文献第92-95页
 第三章 Bacillus amyloliquefaciens B3内生质粒PBSG3特性研究及应用第95-115页
  摘要第95-96页
  1 材料与方法第96-101页
   ·菌株和质粒第96-98页
   ·酶和引物合成第98页
   ·培养基和分子操作第98-99页
   ·质粒pBSG3的完全测序及序列分析第99页
   ·单链DNA(ssDNA)的检测第99页
   ·芽孢杆菌-大肠杆菌穿梭载体的构建第99页
   ·质粒在芽孢杆菌中的稳定性测试第99-100页
   ·木糖诱导下的rapQ,phrQ, rapQ-phrQ表达整合载体的构建第100页
   ·芽孢杆菌孢子形成效率的检测第100-101页
  2 结果和讨论第101-110页
   ·质粒pBSG3整体特征第101-102页
   ·质粒pBSG3属于RCR质粒第102-106页
   ·基于pBSG3开发的穿梭载体的稳定性分析第106-107页
   ·RapQ-PhrQ系统参与孢子形成过程第107-109页
   ·利用pTRDS穿梭载体在芽孢杆菌OKB105中表达Haprin蛋白第109-110页
  3 本章小结第110-111页
  ABSTRACT第111-112页
  参考文献第112-115页
 第四章 高效生防促生基因工程菌FZBHarpin的研发及其效果初评第115-133页
  摘要第115-116页
  1 材料和方法第116-122页
   ·培养基第116页
   ·生物材料第116-118页
   ·载体的构建和解淀粉芽孢杆菌FZB42化学转化第118-119页
   ·芽孢杆菌发酵第119页
   ·反转录PCR检测技术第119-121页
   ·生防菌促生、防病表型测定方法第121-122页
  2 结果和讨论第122-128页
   ·Harpin蛋白整合表达载体的构建第122-124页
   ·双突变体FZBAN和FZBHarpin工程菌的构建及其转化子验证第124-125页
   ·基于RNA水平的hpa1基因的转录检测第125-126页
   ·FZB42、FZBAN突变体和FZBHarpin生防促生效果第126-128页
  3 本章小结第128-130页
  ABSTRACT第130-131页
  参考文献第131-133页
附录第133-147页
缩略语第147-149页
致谢第149-151页
攻读博士学位期间发表的论文第151页

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