玉米在非生物胁迫和激素处理条件下实时荧光定量PCR内参基因的选择
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-24页 |
| ·玉米与非生物胁迫 | 第10页 |
| ·植物非生物胁迫的种类 | 第10-12页 |
| ·植物激素与胁迫 | 第12-13页 |
| ·基因表达量测定方法 | 第13-14页 |
| ·RT-qPCR | 第14-16页 |
| ·RT-qPCR的原理 | 第14-15页 |
| ·RT-qPCR的优化 | 第15-16页 |
| ·内参基因 | 第16-19页 |
| ·内参基因应具备的条件 | 第17页 |
| ·传统内参基因的缺陷 | 第17-19页 |
| ·从基因表达芯片数据中鉴别新的内参基因 | 第19页 |
| ·内参基因稳定性的分析方法 | 第19-21页 |
| ·geNorm程序 | 第20页 |
| ·NormFinder程序 | 第20-21页 |
| ·BestKeeper程序 | 第21页 |
| ·不同处理条件下筛选内参基因的研究 | 第21-23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-33页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·基本培养液 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-33页 |
| ·内参基因的选择和引物设计 | 第26-27页 |
| ·材料处理 | 第27-28页 |
| ·样品采集 | 第28页 |
| ·总RNA提取(Trizol法提取) | 第28-29页 |
| ·总RNA的质量检测 | 第29页 |
| ·基因组DNA的去除和cDNA的合成 | 第29-30页 |
| ·候选内参基因的PCR扩增 | 第30页 |
| ·目的基因的回收 | 第30-31页 |
| ·标准曲线的制备 | 第31页 |
| ·RT-qPCR | 第31-32页 |
| ·数据分析 | 第32-33页 |
| 3 实验结果与分析 | 第33-60页 |
| ·玉米总RNA的提取及基因组DNA的去除 | 第33页 |
| ·内参基因引物的特异性检测(普通PCR扩增) | 第33-34页 |
| ·内参基因表达的标准曲线和扩增效率 | 第34-36页 |
| ·熔解曲线分析 | 第36-37页 |
| ·不同处理条件下内参基因的筛选 | 第37-55页 |
| ·低温胁迫条件下内参基因的筛选 | 第37-39页 |
| ·高温胁迫条件下内参基因的筛选 | 第39-41页 |
| ·干旱胁迫条件下内参基因的筛选 | 第41-43页 |
| ·盐胁迫条件下内参基因的筛选 | 第43-44页 |
| ·铝毒胁迫条件下内参基因的筛选 | 第44-46页 |
| ·水杨酸处理条件下内参基因的筛选 | 第46-48页 |
| ·茉莉酸处理条件下内参基因的筛选 | 第48-50页 |
| ·脱落酸处理条件下内参基因的筛选 | 第50-51页 |
| ·赤霉素处理条件下内参基因的筛选 | 第51-53页 |
| ·乙烯处理条件下内参基因的筛选 | 第53-55页 |
| ·玉米不同组织中内参基因稳定性比较 | 第55-60页 |
| ·玉米根中内参基因稳定性比较 | 第55-57页 |
| ·玉米茎中内参基因稳定性比较 | 第57-58页 |
| ·玉米叶片中内参基因稳定性比较 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-66页 |
| ·RT-qPCR的精确度 | 第60-61页 |
| ·筛选稳定内参基因的分析程序 | 第61-62页 |
| ·内参基因的表达稳定性分析 | 第62-65页 |
| ·铝毒胁迫条件下内参基因的表达稳定性分析 | 第62-63页 |
| ·非生物胁迫下内参基因的表达稳定性分析 | 第63-64页 |
| ·激素处理条件下内参基因的表达稳定性分析 | 第64-65页 |
| ·不同组织部位中内参基因的表达稳定性分析 | 第65页 |
| ·从基因芯片中鉴定新的内参基因 | 第65-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文目录 | 第75页 |
