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镉胁迫诱导拟南芥MLH1基因启动子甲基化变化的分子诊断

摘要第1-13页
英文摘要第13-15页
第一章 文献综述第15-27页
   ·土壤重金属污染第15-19页
     ·土壤重金属污染现状第15-16页
     ·土壤重金属来源分布与污染特点第16-17页
     ·土壤Cd污染及危害第17-19页
   ·污染土壤生态毒理学诊断第19-21页
     ·污染土壤生态毒理学诊断的概念第19页
     ·污染土壤生态毒理学诊断的意义第19-20页
     ·污染土壤生态毒理学诊断的基本准则第20页
     ·污染土壤生态毒理学诊断的常规试验方法第20-21页
   ·生物标记物在土壤诊断中的应用第21页
   ·DNA错配修复相关基因被用作生物标记物的研究概况第21-25页
     ·原核生物DNA错配修复系统第22-23页
     ·真核生物DNA错配修复系统第23页
     ·拟南芥DNA错配修复系统第23-24页
     ·DNA错配修复相关基因被用作生物标记物的研究进展第24-25页
   ·植物DNA甲基化的生物标记功能第25-26页
   ·本研究的目的与意义第26页
   ·本研究的内容与技术路线第26-27页
第二章 镉胁迫对拟南芥幼苗形态和生理指标影响的研究第27-36页
   ·材料、试剂与仪器第27-29页
     ·供试材料第27页
     ·主要试剂第27-28页
     ·主要仪器第28-29页
   ·方法第29-31页
     ·拟南芥幼苗的培养和胁迫处理第29页
     ·拟南芥幼苗形态指标的测定第29-30页
     ·拟南芥幼苗地上部生理指标的测定第30-31页
     ·数据分析第31页
   ·结果与分析第31-33页
     ·Cd胁迫对拟南芥幼苗叶片数、地上部鲜重、根长的影响第31-32页
     ·Cd胁迫对拟南芥幼苗地上部可溶性蛋白质和叶绿素含量的影响第32-33页
   ·结论与讨论第33-35页
     ·Cd胁迫对拟南芥幼苗生长、外部形态的影响第33-34页
     ·Cd胁迫对拟南芥幼苗地上部叶绿素含量的影响第34页
     ·Cd胁迫对拟南芥幼苗地上部可溶性蛋白质含量的影响第34-35页
   ·小结第35-36页
第三章 镉胁迫对拟南芥幼苗MLH1基因启动子突变的影响研究第36-53页
   ·材料、试剂与仪器第36-39页
     ·供试材料第36页
     ·主要试剂第36-38页
       ·主要药品第36-37页
       ·主要试剂的配制第37-38页
     ·仪器设备第38-39页
   ·方法第39-46页
     ·幼苗基因组DNA提取第39-41页
       ·基因组DNA提取步骤第39-40页
       ·DNA完整性检测第40-41页
       ·DNA纯度和浓度检测第41页
     ·MLH1基因启动子PCR扩增第41-43页
     ·MLH1基因启动子体外重组与转化第43-45页
     ·MLH1基因启动子测序与突变分析第45-46页
   ·结果与分析第46-49页
     ·幼苗基因组DNA提取纯度、浓度、完整性检测第46-47页
     ·MLH1基因启动子PCR扩增结果检测第47-48页
     ·Cd胁迫对拟南芥幼苗MLH1基因启动子突变的影响第48-49页
   ·结论与讨论第49-52页
     ·植物基因组DNA的提取第49-50页
     ·PCR体系的构建和优化第50-51页
     ·目的片段的体外重组与转化第51页
     ·Cd对拟南芥幼苗MLH1基因启动子的诱变作用第51-52页
   ·小结第52-53页
第四章 镉胁迫对拟南芥幼苗MLH1基因启动子甲基化的影响研究第53-68页
   ·材料、试剂与仪器第54-55页
     ·供试材料第54页
     ·主要试剂第54-55页
     ·仪器设备第55页
   ·方法第55-60页
     ·幼苗基因组DNA的提取第55页
     ·基因组DNA亚硫酸氢盐修饰第55页
     ·修饰后DNA纯化回收第55-57页
     ·修饰后DNA用于MLH1基因启动子甲基化特异性扩增第57-58页
     ·MLH1基因启动子甲基化水平分析第58-60页
   ·结果与分析第60-64页
     ·拟南芥幼苗MLH1基因启动子甲基化特异性扩增结果检测第60-61页
     ·Cd胁迫对拟南芥幼苗MLH1基因启动子甲基化的影响第61-64页
   ·结论与讨论第64-67页
     ·重盐修饰在甲基化检测方法中的重要性第64-65页
     ·错配修复基因MLH1启动子甲基化检测区域的选取第65-67页
     ·Cd胁迫对拟南芥幼苗MLH1基因启动子甲基化的影响第67页
   ·小结第67-68页
第五章 结论与展望第68-70页
   ·研究结论第68-69页
   ·前景展望第69-70页
参考文献第70-81页
致谢第81-82页
攻读学位期间发表学术论文第82页

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