| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-25页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1 棉纤维细胞的分化、发育 | 第12-15页 |
| ·纤维原始细胞分化和突起 | 第13页 |
| ·纤维细胞的伸长及初生壁合成 | 第13-14页 |
| ·次生壁的合成 | 第14-15页 |
| ·脱水成熟 | 第15页 |
| 2 纤维发育相关基因的研究进展 | 第15-17页 |
| ·棉纤维细胞分化起始相关基因 | 第16页 |
| ·棉纤维伸长发育相关基因 | 第16页 |
| ·纤维细胞次生壁增厚期相关基因 | 第16-17页 |
| ·纤维脱水成熟相关基因 | 第17页 |
| 3 基因克隆的方法 | 第17-22页 |
| ·基因芯片技术分离目的基因 | 第17-18页 |
| ·基因文库技术分离目的基因 | 第18页 |
| ·利用功能蛋白组分离目的基因 | 第18页 |
| ·mRNA差异显示技术分离差别表达基因 | 第18-19页 |
| ·插入突变分离克隆目的基因 | 第19页 |
| ·图位克隆技术克隆目的基因 | 第19-20页 |
| ·利用酵母双杂交系统克隆基因 | 第20页 |
| ·PCR技术在基因克隆中的应用 | 第20-21页 |
| ·生物信息学在分离克隆基因中的应用 | 第21页 |
| ·基因分离克隆的新技术 | 第21页 |
| ·问题与展望 | 第21-22页 |
| 4 粟酒裂殖酵母概况 | 第22-23页 |
| 5 绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,简称GFP)的发现与应用 | 第23-25页 |
| 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二部分 研究报告 | 第26-68页 |
| 第二章 李氏突变体纤维伸长发育早期的亚显微结构分析 | 第26-32页 |
| 1 实验材料和方法 | 第27页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·透射电镜材料准备 | 第27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-30页 |
| ·李氏突变型和野生型0 DPA胚珠表皮细胞的亚显微结构 | 第27-28页 |
| ·李氏突变型和野生型1 DPA胚珠表皮细胞的亚显微结构 | 第28-29页 |
| ·李氏突变型和野生型3 DPA纤维细胞的亚显微结构 | 第29页 |
| ·李氏突变型和野生型5 DPA纤维细胞的亚显微结构 | 第29-30页 |
| ·李氏突变型和野生型0-5 DPA纤维细胞的亚显微结构差异 | 第30页 |
| 3 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 棉花GhBRICKI、GhWRM两个基因的克隆与表达分析 | 第32-60页 |
| 第一节 棉花GhBRICKI的克隆与表达分析 | 第32-51页 |
| 1 材料与方法 | 第33-43页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·试剂和菌种 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-43页 |
| ·GhBRICKI cDNA全长获得及序列分析 | 第34-35页 |
| ·棉花总RNA的提取和quantitative real time RT-PCR(qPCR) | 第35-36页 |
| ·棉花基因组DNA的提取 | 第36-38页 |
| ·Southern杂交 | 第38-40页 |
| ·酵母转化 | 第40-42页 |
| ·感受态细胞的制备及大肠杆菌的转化 | 第42-43页 |
| ·扩增产物的电泳、回收、克隆及测序 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-50页 |
| ·GhBRICKI全长序列的获得和分析 | 第44-45页 |
| ·棉花GhBRICKI与其他物种同源基因的聚类分析 | 第45-47页 |
| ·GhBRICKI的基因组序列分析 | 第47页 |
| ·GhBRICKI的表达分析 | 第47-48页 |
| ·GhBRICKI酵母转化结果 | 第48-50页 |
| ·酵母载体验证 | 第48页 |
| ·转化结果 | 第48-50页 |
| ·Southern杂交 | 第50页 |
| 3 讨论 | 第50-51页 |
| 第二节 棉花GhWRM的克隆与表达分析 | 第51-60页 |
| 1 实验材料与方法 | 第51-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-59页 |
| ·GhWRM的全长序列获得和分析 | 第52-54页 |
| ·GhWRM与其他物种同源基因的聚类分析 | 第54-55页 |
| ·GhWRM的基因组序列分析 | 第55-56页 |
| ·GhWRM的表达分析 | 第56-57页 |
| ·GhWRM的酵母转化结果 | 第57-59页 |
| ·酵母载体酶切验证 | 第57页 |
| ·转化结果 | 第57-59页 |
| ·Southern杂交分析 | 第59页 |
| 3 讨论 | 第59-60页 |
| 第四章 棉花β-氰丙氨酸合酶基因(GhCAS)的原核表达分析及亚细胞定位 | 第60-68页 |
| 1 材料和方法 | 第60-62页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·植物材料 | 第61页 |
| ·实验所用引物 | 第61页 |
| ·方法 | 第61-62页 |
| ·GhCAS的原核表达分析 | 第61-62页 |
| ·GhCAS的亚细胞定位 | 第62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-67页 |
| ·GhCAS全长序列的获得 | 第62-63页 |
| ·GhCAS的原核表达分析 | 第63-65页 |
| ·GhCAS的亚细胞定位 | 第65-66页 |
| ·GhCAS的Southern杂交分析 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-68页 |
| 全文结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
