艰难梭菌毒素B羧基末端膜受体结合蛋白基因的克隆和表达
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-20页 |
| ·艰难梭菌概述 | 第11-15页 |
| ·艰难梭菌感染 | 第11-12页 |
| ·艰难梭菌毒素 | 第12-13页 |
| ·艰难梭菌诊断 | 第13-14页 |
| ·艰难梭菌防治 | 第14-15页 |
| ·艰难梭菌疫苗 | 第15-19页 |
| ·传统疫苗和存在问题 | 第15页 |
| ·基因工程疫苗 | 第15-16页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第16页 |
| ·艰难梭菌疫苗研究概况 | 第16-19页 |
| ·选题意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-32页 |
| ·材料 | 第20-23页 |
| ·主要仪器和设备 | 第20页 |
| ·菌种及质粒 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20页 |
| ·溶液配制 | 第20-23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-32页 |
| ·艰难梭菌的培养 | 第23页 |
| ·艰难梭菌基因组 DNA的提取 | 第23-24页 |
| ·目的基因制备 | 第24-26页 |
| ·DNA酶切 | 第26页 |
| ·PCR产物和载体的连接 | 第26-27页 |
| ·制备的(大肠杆菌菌株)感受态细胞 | 第27页 |
| ·连接产物的转化 | 第27页 |
| ·阳性克隆子鉴定 | 第27-29页 |
| ·重组蛋白诱导表达 | 第29-32页 |
| 第三章 结果与分析 | 第32-42页 |
| ·艰难梭菌的培养 | 第32页 |
| ·目的基因PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·PCR产物直接测序结果及序列分析 | 第33-35页 |
| ·质粒pGEX-4T-1-CDB3的构建 | 第35-36页 |
| ·重组质粒提取 | 第36页 |
| ·重组质粒限制性内切酶分析 | 第36-37页 |
| ·重组质粒pGEX-4T-1-CDB3序列分析 | 第37-39页 |
| ·重组蛋白诱导表达 | 第39-40页 |
| ·Western blot | 第40-42页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第42-47页 |
| ·讨论 | 第42-46页 |
| ·艰难梭菌培养 | 第42页 |
| ·克隆片段选择 | 第42页 |
| ·pGEX-4T-1载体 | 第42-44页 |
| ·DNA聚合酶 | 第44页 |
| ·双酶切 | 第44-45页 |
| ·重组蛋白诱导表达 | 第45-46页 |
| ·结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第52页 |
