摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-14页 |
引言 | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-24页 |
1. 鱼类卵巢周年变化规律研究 | 第16-19页 |
·鱼类卵巢发育类型及分期 | 第16-17页 |
·鱼类卵细胞发生时相分期 | 第17页 |
·鱼类卵巢闭锁现象 | 第17-18页 |
·GSI、HSI 和 CF 的变化与卵巢发育的关系 | 第18页 |
·鱼类卵巢年周期变化的国内研究进展 | 第18-19页 |
2. 鱼类性类固醇激素的研究进展 | 第19-21页 |
·性类固醇激素的作用 | 第19-21页 |
·鱼类性类固醇激素周年变化的国内外研究进展 | 第21页 |
3. 促性腺激素 | 第21-24页 |
·FSH 和 LH 的研究 | 第21-22页 |
·N-连接糖基化位点的研究 | 第22页 |
·国内外对促性腺激素的研究进展 | 第22-24页 |
第二章 漠斑牙鲆卵巢发育特征研究 | 第24-36页 |
1. 材料与方法 | 第25-26页 |
·实验鱼培育 | 第25页 |
·实验鱼的温光调控 | 第25页 |
·取样方法与样品处理 | 第25-26页 |
·数量特征测量及分析 | 第26页 |
2. 结果 | 第26-33页 |
·漠斑牙鲆卵巢发育分期 | 第26-27页 |
·漠斑牙鲆卵母细胞发育的形态学变化 | 第27-30页 |
·GSI、HSI 和 CF 的季节变化规律 | 第30-33页 |
3. 讨论 | 第33-36页 |
·漠斑牙鲆卵母细胞发育特征和产卵类型 | 第33-34页 |
·GSI、HSI 和 CF 的变化与卵巢发育的关系 | 第34-36页 |
第三章 漠斑牙鲆血浆性类固醇激素及促性腺激素表达水平的周年变化与卵巢发育的关系 | 第36-52页 |
1. 材料与方法 | 第36-38页 |
·实验鱼培育 | 第36页 |
·实验鱼的温光调控 | 第36页 |
·实验设计 | 第36-37页 |
·实验鱼取样 | 第36-37页 |
·外源激素诱导亲鱼产卵实验 | 第37页 |
·实验所用试剂和器材 | 第37页 |
·性激素的 ELISA 测定相关方法和原理 | 第37-38页 |
·性类固醇激素和促性腺激素的测定 | 第38页 |
·数据统计分析 | 第38页 |
2. 结果 | 第38-48页 |
·漠斑牙鲆雌鱼血浆中雌二醇的周年变化 | 第38-40页 |
·漠斑牙鲆雌鱼血浆中睾酮的周年变化 | 第40-41页 |
·漠斑牙鲆雌鱼血浆中孕酮的周年变化 | 第41-43页 |
·漠斑牙鲆雌鱼血浆中 FSH 含量的周年变化 | 第43-44页 |
·漠斑牙鲆雌鱼血浆中 LH 含量的周年变化 | 第44-45页 |
·埋植外源激素(sGnRH)后漠斑牙鲆血浆中性类固醇激素含量的变化 | 第45-48页 |
3. 讨论 | 第48-52页 |
第四章 漠斑牙鲆 FSHβ亚基,LHβ亚基的 cDNA 克隆和组织表达特征 | 第52-79页 |
1. 材料与方法 | 第52-62页 |
·实验鱼 | 第52页 |
·各组织取样 | 第52-53页 |
·RNA 提取及反转录 | 第53-56页 |
·总 RNA 的提取及浓度测定 | 第53-54页 |
·总 RNA 提取方法 | 第53页 |
·RNA 浓度测定方法 | 第53-54页 |
·RNA 质量检测 | 第54页 |
·cDNA 及 RACE-Ready-cDNA 的合成 | 第54-56页 |
·cDNA 合成的实验步骤 | 第54-55页 |
·3'-RACE-Ready cDNA 和 5'-RACE-Ready cDNA 合成的实验步骤 | 第55-56页 |
·漠斑牙鲆 FSHβ亚基和 LHβ亚基的克隆 | 第56-60页 |
·引物设计 | 第56-58页 |
·核心序列 PCR 扩增的反应体系 | 第58-60页 |
·PCR 产物的切胶回收、T 载体连接转化、培养和测序 | 第60-61页 |
·PCR 产物切胶回收 | 第60页 |
·T 载体连接转化和培养 | 第60-61页 |
·菌液 PCR 和测序 | 第61页 |
·序列拼接和比对 | 第61页 |
·半定量表达分析 | 第61-62页 |
2. 结果 | 第62-77页 |
·漠斑牙鲆垂体总 RNA 的提取 | 第62页 |
·RACE 克隆过程中 PCR 电泳结果 | 第62-64页 |
·FSHβ亚基和 LHβ亚基的 cDNA 序列、同源性比较和系统进化分析 | 第64-73页 |
·FSHβ亚基和 LHβ亚基 cDNA 序列 | 第64-67页 |
·FSH 和 LH 同源性比较 | 第67-71页 |
·FSH 和 LH 基因的系统进化分析 | 第71-73页 |
·FSH 和 LH mRNA 的组织特异性表达和季节性表达变化 | 第73-77页 |
3. 讨论 | 第77-79页 |
结论 | 第79-82页 |
参考文献 | 第82-94页 |
致谢 | 第94页 |